產(chǎn)品名稱(chēng):大鼠嗜酸性粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白(ECP)ELISA試劑盒
英文名稱(chēng):Rat eosinophil cationic protein,ECP ELISAKit
酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)
①直接法 該方法直接利用抗原 與酶聯(lián)抗體的結(jié)合,較簡(jiǎn)單易行。A.假抗原。在聚苯乙烯酶標(biāo)版的孔穴中加入待檢測(cè)的抗原(捕食者胃內(nèi)含物抽提液)0.2mL,在4℃冰箱中過(guò)夜,使抗原黏附于塑料孔壁上。B.洗滌兩次,倒置于干毛巾上,使孔穴中的液體盡量流出。c.加酶聯(lián)抗體。 各孔穴中加入酶聯(lián)抗體0.2mL,在mL37℃下孵育3h,使其充分結(jié)合。d. 加底物。 用PBS充分洗滌以除去未結(jié)合的酶聯(lián)抗體,然后加入底物(鄰苯二胺)0.2 mL,于37℃反應(yīng)30min,用2mol/L硫酸0.05 mL終止反應(yīng)。e. 用ELISA檢測(cè)儀測(cè)定其吸光度值,分別設(shè)陽(yáng)性、陰性和空白對(duì)照,以確定陽(yáng)性反應(yīng)臨界值。
②雙抗體夾心法 該方法與直接法的不同在于吸附抗體。a. 包被抗體。酶標(biāo)板的孔穴中加入0.2 mL抗體(用PH=9.6/0.05mol/L碳酸鹽緩沖液稀釋?zhuān)?,?7℃水浴中孵育3h,移入4℃冰箱過(guò)夜。將各孔中多余的抗體傾去,加入PBS洗滌,立即甩去,再將PBS加滿各板孔,置5min,甩去溶液,如此洗滌2次,倒置于干毛巾上,使孔穴中的液體盡量流出。b. 加待檢抗原。沒(méi)孔中加入待檢捕食者胃內(nèi)含物抽提液0.2 mL.同時(shí)設(shè)陽(yáng)性、陰性和空白(PBS)對(duì)照,37℃水溶中孵育3h,轉(zhuǎn)入冰箱中過(guò)夜。如上法洗滌3次。C. 加入酶聯(lián)抗體。每孔加入酶聯(lián)抗體0.2 mL,37℃水浴孵育2h,如上法洗滌3次。d. 加底物。 每孔加入底物鄰苯二胺0.2 mL, 37℃水浴孵育1h,加入2mol/L硫酸0.05,以終止反應(yīng)。e. 用 ELISA檢測(cè)儀測(cè)定其吸光度值。
③間接法 與前兩種方法不同點(diǎn)在于酶聯(lián)抗體與抗原的間接結(jié)合。a. 每孔加入待檢抗原0.2 mL ,4℃冰箱中過(guò)夜,使抗原黏附于塑料孔壁上。并依上法洗滌3次。b. 每孔加0.2 mL,用PBS稀釋的抗體,37℃孵育2-3h。c.用PBS洗滌3次后,加入溶于PBS的酶聯(lián)抗體0.2mL,37℃孵育2-3h。d. 加底物,方法同上。e. 用ELISA檢測(cè).
其他產(chǎn)品:Human Stem Cell Factor Receptor,SCFR ELISAKit
Human Stem cell factor/mast cell growth factor,SCF/MGF ELISAKit
Human Soluble Cluster of differentiation 40 ligand,sCD40L ELISAKit
Human Soluble Cluster of differentiation 30 ligand,sCD30L ELISAKit
Human regulated on activation in normal T-cell expressed and secreted,RANTES ELISAKit
Human P-Selectin/CD62P/GMP140 ELISAKit
Human Plaet-Derived Growth Factor AB,PDGF-AB ELISAKit
Human Plaet-Derived Growth Factor Soluble Receptor α,PDGFsR-α ELISAKit
Human Neurotrophin 4,NT-4 ELISAKit
人神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(NT-3)ELISAKit
Human Nerve growth factor,NGF ELISAKit
Human Macrophage Inflammatory Protein-3β,MIP-3β ELISAKit
Human Macrophage Inflammatory Protein-3α,MIP-3α ELISAKit
Human Macrophage Inflammatory Protein-1β,MIP-1β ELISAKit