豬弓形蟲抗體ELISA檢測試劑盒說明書
【產(chǎn)品名稱】
通用名稱:豬弓形蟲抗體ELISA檢測試劑盒
英文名稱:ELISA Kit For Swine Toxoplasma gondii Antibodies
【規(guī)格】
96T×2/盒
【用途】
用于檢測豬血清樣本中豬弓形蟲抗體。
【注意事項】
- 所有試劑用前應(yīng)恢復(fù)至室溫18 ~26℃ ,用完后返回到2-8℃以便下次使用。
- 請在試劑盒規(guī)定的有效期內(nèi)使用;禁止非同批試劑盒混用。
- 沒用完的微孔板應(yīng)貯存在密封鋁箔袋內(nèi),于2℃-8℃存放。
- 用過的材料要無害化處理,處理時遵照當(dāng)?shù)亍^(qū)域以及國家法規(guī)。
- 避免單底物液暴露于強(qiáng)光,避免 接觸氧化劑。
- 待檢血清樣品數(shù)量較多時,應(yīng)先使用血清稀釋板稀釋完所有待檢血清,再將稀釋好的血清轉(zhuǎn)移到檢測板,使反應(yīng)時間一致。
- 濃縮洗滌液用去離子水稀釋,如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶加熱使其溶解后再使用。
- 嚴(yán)格按照操作程序,仔細(xì)地吸液、計時、充分洗滌,對于獲得精q的結(jié)果是非常必要的。
【主要組成成份】
1 | 弓形蟲抗原包被板 | 96T×2 | |
2 | 酶標(biāo)記物 | 22ml | 黃色帽 |
3 | 樣本稀釋液 | 50ml | 透明帽 |
4 | 豬弓形體陰性對照血清 | 1.5ml | 綠色帽 |
5 | 豬弓形體陽性對照血清 | 1.5ml | 紅色帽 |
6 | 顯色劑 | 12ml×2 | 橙色帽 |
7 | 終止液 | 12ml | 藍(lán)色帽 |
8 | 20X濃縮洗滌液 | 50ml | 白色帽 |
9 | 蓋板膜 | 2張 |
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10 | 說明書 | 1份 |
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【樣品準(zhǔn)備】
用樣本稀釋液40倍稀釋待檢血清,(例如:117μl血清稀釋液中加3μl待檢血清)。陰陽對照血清不用稀釋,直接加樣。
【洗滌液準(zhǔn)備】
20倍濃縮的洗滌液使用前恢復(fù)至室溫并搖勻,待結(jié)晶*溶解后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋(例如:10ml的濃縮洗滌液加上190ml蒸餾水)。
【操作步驟】
- 取抗原包被板(根據(jù)樣品多少,可拆開分次使用),將稀釋好的待檢血清、陽性對照血清和陰性對照血清,各取100μl加入到抗原包被板孔中,陽性對照和陰性對照,各設(shè)2孔。輕輕振勻孔中樣品(勿溢出),用蓋板膜覆蓋包被板,置37℃溫育30分鐘。
- 打開蓋板膜,甩掉板孔中的溶液,用洗滌液注滿反應(yīng)板孔,靜置10秒,直接甩出,洗滌3次,后一次洗滌后在吸水材料上拍干。
- 每孔加酶標(biāo)記物100μl,蓋好蓋板膜,置37℃溫育30分鐘。
- 打開蓋板膜,甩掉板孔中的溶液,用洗滌液注滿反應(yīng)板孔,靜置10秒,重復(fù)洗滌3次,后一次在吸水材料上拍干。
- 每孔加入單底物液100μl,混勻,蓋好蓋板膜,37℃避光顯色10分鐘。
- 打開蓋板膜,每孔加終止液50μl,10分鐘內(nèi)測定結(jié)果(測定前輕輕振勻,勿溢出)。
【結(jié)果判定】
在酶標(biāo)儀上測各孔的OD值。檢測結(jié)果有效的條件是陽性對照孔的OD450/630值必須≥0.6,陰性對照孔的OD450/630值必須<0.15;
Cutoff值(COV)=陰性對照平均OD值×2.1(陰性對照孔OD值小于0.08時,按0.08計算)
樣品OD值≥2COV判為弓形體抗體陽性;樣品OD值<COV判為弓形體抗體陰性,介于陽性和陰性O(shè)D值之間的數(shù)值判為可疑。
【儲存條件及有效期】
2℃~8℃保存,有效期12個月。
【生產(chǎn)日期及批號】
詳見包裝袋和外包裝盒。