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技術(shù)文章

人ELISA試劑盒使用和處理中的常見問題

閱讀:346          發(fā)布時間:2018-4-25

人ELISA試劑盒使用和處理中的常見問題
1.保存血清的方法
 建議血清應(yīng)保存在-5℃至-2O℃。若存放于4℃時,請勿超過一個月。一次無法用完一瓶,建議您無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。 
 2.如何解凍血清才不會使產(chǎn)品品質(zhì)受損 
 將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。但必須注意的是,融解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。 
 3.血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),該如何處理
 血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因,但zui普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后,也會存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的品質(zhì)。 
 欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi)離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。不建議以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為它可能會阻塞您的過濾膜。 
 4.為什么要熱滅活血清
 加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng)。啟動的補(bǔ)體參與溶解細(xì)胞事件,刺激平滑肌收縮,細(xì)胞和血小板釋放組胺,啟動淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。在免疫學(xué)研究,培養(yǎng)ES細(xì)胞,昆蟲細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞時,推薦使用熱滅活血清。 
 5.有必要做熱滅活嗎
 實驗顯示,經(jīng)過正確處理的熱滅活血清,對大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過的血清對細(xì)胞的生長只有微小的促進(jìn),或*沒有任何作用,甚至通常因為高溫處理影響了血清的品質(zhì),而造成細(xì)胞生長速率的降低。而經(jīng)過熱處理的血清,沉淀物的形成會顯著的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,如同“小黑點”,常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環(huán)境中,又會使此沉淀物更增多,使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增。因此,除非必須,盡可能不需要做熱處理這一步。
 6.為什么儲存在冰箱中的胎牛血清會出現(xiàn)沉淀
 儲存在2-8℃時,血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。這應(yīng)該不會影響血清的品質(zhì)。建議在-20℃儲存胎牛血清,避免反復(fù)凍融。 
 7.如何避免沉淀物的產(chǎn)生
 解凍血清時,請按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫),若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃),實驗顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。 解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。 請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害,而影響血清的品質(zhì)。 血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。 
人ELISA試劑盒α1-微球蛋白(α1M)ELISA試劑盒    ,英文名:    α1M ELISA Kit
α1-酸性糖蛋白(α1AGP)ELISA試劑盒    ,英文名:    α1AGP ELISA Kit
α1-抗胰糜蛋白酶(α1ACT)ELISA試劑盒    ,英文名:    α1ACT ELISA Kit
α1-抗胰蛋白酶(α1AT)ELISA試劑盒    ,英文名:    α1AT ELISA Kit
α1-B-糖蛋白(α1BG)ELISA試劑盒    ,英文名:    α1BG ELISA Kit
Zinedin蛋白(ZIN)ELISA試劑盒    ,英文名:    ZIN ELISA Kit
Zeste同源物增強(qiáng)子2(EZH2)ELISA試劑盒    ,英文名:    EZH2 ELISA Kit
Zeste同源物增強(qiáng)子1(EZH1)ELISA試劑盒    ,英文名:    EZH1 ELISA Kit
Zeste12同源物1抑制因子2(SUZ12)ELISA試劑盒    ,英文名:    SUZ12 ELISA Kit
Y-染色體胸腺素β4(Tβ4Y)ELISA試劑盒    ,英文名:    Tβ4Y ELISA Kit
YY肽3(PYY3)ELISA試劑盒    ,英文名:    PYY3 ELISA Kit
YY肽2(PYY2)ELISA試劑盒    ,英文名:    PYY2 ELISA Kit
YY肽(PYY)ELISA試劑盒    ,英文名:    PYY ELISA Kit
YY1轉(zhuǎn)錄因子(YY1)ELISA試劑盒    ,英文名:    YY1 ELISA Kit
YbeY金屬肽酶(YBEY)ELISA試劑盒    ,英文名:    YBEY ELISA Kit
X-轉(zhuǎn)運蛋白3(Xtrp3)ELISA試劑盒    ,英文名:    Xtrp3 ELISA Kit
X-轉(zhuǎn)運蛋白2(Xtrp2)ELISA試劑盒    ,英文名:    Xtrp2 ELISA Kit
X-射線修復(fù)交叉互補(bǔ)蛋白6(XRCC6)ELISA試劑盒    ,英文名:    XRCC6 ELISA Kit
X-射線修復(fù)交叉互補(bǔ)蛋白5(XRCC5)ELISA試劑盒    ,英文名:    XRCC5 ELISA Kit
X-脯氨酰氨肽酶3(XPNPEP3)ELISA試劑盒    ,英文名:    XPNPEP3 ELISA Kit
X-連鎖凋亡蛋白抑制因子(XIAP)ELISA試劑盒    ,英文名:    XIAP ELISA Kit
X-框結(jié)合蛋白1(XBP1)ELISA試劑盒    ,英文名:    XBP1 ELISA Kit
Wolfram綜合征蛋白1(WFS1)ELISA試劑盒    ,英文名:    WFS1 ELISA Kit
WNT抑制因子1(WIF1)ELISA試劑盒    ,英文名:    WIF1 ELISA Kit
WNT1誘導(dǎo)信號通道蛋白2(WISP2)ELISA試劑盒    ,英文名:    WISP2 ELISA Kit
WNT1誘導(dǎo)信號通道蛋白1(WISP1)ELISA試劑盒    ,英文名:    WISP1 ELISA Kit人ELISA試劑盒

 

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