化工儀器網(wǎng)
技術(shù)文章
小鼠ELISA試劑盒八大保存方法的各種事項(xiàng)
閱讀：1588 發(fā)布時(shí)間：2020-9-9注意事項(xiàng)：
1.一般供給的小鼠ELISA試劑盒為無菌，無需再過濾除菌。如發(fā)現(xiàn)小鼠ELISA試劑盒有懸浮物，則可將小鼠ELISA試劑盒加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過濾，切勿直接過濾血清。
2.需要長期保存的小鼠ELISA試劑盒有必要儲(chǔ)存于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時(shí)刻切勿超過1個(gè)月。由于小鼠ELISA試劑盒結(jié)冰時(shí)體積會(huì)增加約10%，因而，小鼠ELISA試劑盒在凍入低溫冰箱前，有必要預(yù)留一定體積空間，不然易發(fā)作污染或玻璃瓶凍裂。
3.瓶裝小鼠ELISA試劑盒凍結(jié)需采用逐漸凍結(jié)法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的小鼠ELISA試劑盒放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室溫，待全部溶解后再分裝。在溶解過程中需不斷悄悄搖晃均勻(小心勿形成氣泡)，使溫度與成分均一，削減沉積的發(fā)作。切勿直接將小鼠ELISA試劑盒從-20℃進(jìn)入37℃凍結(jié)，這樣因溫度改變太大，容易形成蛋白質(zhì)凝聚而出現(xiàn)沉積。
4.熱滅活是指56℃， 30分鐘加熱已*凍結(jié)的小鼠ELISA試劑盒。加熱過程中須規(guī)矩?fù)u晃均勻。此熱處理的意圖是使小鼠ELISA試劑盒中的補(bǔ)體成分(complement)滅活。除非有必要，一般不建議作此熱處理，因?yàn)闊崽幚頃?huì)形成血清沉積物顯著增多，而且還會(huì)影響小鼠ELISA試劑盒的質(zhì)量。補(bǔ)體參與反響有: 滑潤肌細(xì)胞收縮， 肥大細(xì)胞和血小板釋放組胺， 增強(qiáng)吞噬作用， 促進(jìn)淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞發(fā)作化學(xué)趨化和活化。
5.切勿將小鼠ELISA試劑盒在37℃放置太久，不然血清會(huì)變得污濁，同時(shí)小鼠ELISA試劑盒中的有效成分會(huì)破會(huì)而影響小鼠ELISA試劑盒質(zhì)量。
6.血清中的沉積物
處理與保存方法：
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：適用于小鼠ELISA試劑盒檢測體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無菌管收集細(xì)胞上清液，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
2. 細(xì)胞：用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次，調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104-106/ml 左右，通過反復(fù)凍融，使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份，或者細(xì)胞超聲粉碎，離心取上清液檢測。
3. 血清：在室溫下，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘，取上清待測。
4. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20 分鐘后，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
5. 體液：包括胸腹水、腦脊液，分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
6. 組織標(biāo)本：切取組織標(biāo)本，稱取重量0.5mg，加入500ul 的PBS，用手工或勻漿器，或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿，以2000-3000rmp離心20 分鐘，收集上清進(jìn)行檢測。
7. 樣品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
8. 保存：如果樣品小鼠ELISA試劑盒不能立即檢測，應(yīng)將其分裝，-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。