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進口Elisa試劑盒原理與特點
閱讀：371 發(fā)布時間：2020-11-4進口Elisa試劑盒原理：
采用競爭法測定金黃地鼠氧化低密度脂蛋白OXLDL水平。用金黃地鼠氧化低密度脂蛋白OXLDL抗原包被微孔板，制成固相載體，實驗時依次在微孔板中加入標本及標準品，并加入HRP標記的OXLDL抗體，標本及標準品中的抗體和一定量的酶標抗體競爭與固相抗原結合。反復洗滌后加底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化為藍色，再用硫酸終止反應，轉變成黃色。標本中抗體量越多，結合在固相上的酶標抗體愈少，顏色越淺。顏色的深淺和樣品中的OXLDL含量呈負相關。采用酶標儀在450nm波長測定吸光度（OD值），根據(jù)標準曲線，計算測試樣品中OXLDL濃度。
進口Elisa試劑盒操作步驟：
1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘，恢復至室溫。
2.取所需用量酶標板條，設空白對照1孔、陰性/陽性對照各2孔，未用的板條盡快密封，2～8℃保存。
3.空白對照孔加樣品稀釋液100μl；陰、陽性對照孔分別加入陰、陽性對照100μl；樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl。
4.混勻，置37℃反應30分鐘。
5.扣去孔內液體，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，重復洗滌5次，拍干。
6.每孔加酶標記物100μl（空白孔除外）。置37℃反應30分鐘。
7.洗滌，同步驟5。
8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl，混勻，37℃避光反應10分鐘。
9.每孔加終止液50μl，混勻，用空白孔調零，于450nm(可用630nm作參比波長）測定各孔吸光值（A值）。
進口Elisa試劑盒注意事項：
1.實驗操作時需戴手套、穿工作衣，嚴格健全和執(zhí)行消毒隔離制度，各種實驗廢棄物都應按傳染物處理。
2.終止液具有腐蝕性，應避免接觸皮膚和衣物，如不慎接觸請立即用大量自來水沖洗。
3.酶標板從冷藏環(huán)境中取出時應恢復至室溫方可開袋，未用完的酶標板需放入有干燥劑的密封袋中保存。
4.濃縮洗滌液在低溫時容易結晶，使用時需恢復至室溫以*溶解。
5.洗滌時各孔均需加滿液體，防止孔口有游離酶不能洗凈。
6.用于檢測的樣品應保持新鮮。
7.試驗結果的判定必須以酶標儀讀數(shù)為準。
8.不同批號試劑組分不得混用。
進口Elisa試劑盒特點：
一、高效、靈敏、特異的抗體。
二、穩(wěn)定的重復性和可靠性。
三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體。
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型。
五、節(jié)省實驗經費。