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流式抗體保存注意事項(xiàng)
閱讀:11041 發(fā)布時(shí)間:2021-7-281. 流式抗體應(yīng)該如何保存?
流式抗體一般都是直接帶熒光標(biāo)記的,一般情況下4°C避光可以保存一年,勿-20°C保存,熒光基團(tuán)在反復(fù)凍融之后會從抗體上脫落。
2. 流式抗體過了一年還能用嗎?
一般來說,流式抗體還是比較穩(wěn)定的,如果說明書上寫4°C避光可以保存一年,大部分情況下,過了一年還是可以使用的,有些流式抗體甚至可以4°C避光保存2-3年。
3. 不能及時(shí)檢測的樣本應(yīng)該如何保存?
流式實(shí)驗(yàn)建議是用新鮮細(xì)胞做,樣本如果不能及時(shí)上機(jī)檢測,可以在得到單細(xì)胞懸液后就立即放到4°C冰箱中,到第二天早上做流式,或嘗試抗體染色后,用0.5%多聚甲醛固定15 min后,用PBS洗滌兩遍,置于4°C,第二天上機(jī)檢測,無論是哪種方法,處理不當(dāng)可能都會造成實(shí)驗(yàn)失敗的,需要嘗試摸索合適的條件。流式實(shí)驗(yàn)最好在當(dāng)天檢測,即使要固定的話,也建議在24 h內(nèi)檢測。
4. -20°C保存再解凍的流式抗體可以使用嗎?
建議解凍的抗體做個預(yù)實(shí)驗(yàn)看下實(shí)驗(yàn)效果,F(xiàn)ITC這種比較穩(wěn)定的熒光,一般情況下凍存對其應(yīng)用不大,但也要避免反復(fù)凍融,串聯(lián)染料一定要避免凍存。