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細(xì)胞不貼壁生長(zhǎng)可能原因及解決方法：

可能原因：

1. 支原體污染。

2. 培養(yǎng)瓶瓶底不干bai凈。

3. 培養(yǎng)液pH 值過(guò)堿（NaHCO3 分解）。

4. 消化du液或培養(yǎng)液配制錯(cuò)誤、過(guò)期儲(chǔ)存、儲(chǔ)存不當(dāng)。

5. 細(xì)胞老化（如傳代前細(xì)胞已匯合導(dǎo)致失去貼附性）。

6. 接種細(xì)胞起始濃度太低或太高。

解決方法：

1. 縮短胰蛋白酶消化時(shí)間或降低胰蛋白酶濃度.

2. 分離培養(yǎng)物,檢測(cè)支原體.清潔支架和培養(yǎng)箱.如發(fā)現(xiàn)支原體污染,丟棄培養(yǎng)物.

3. 注意刷洗,或換用一次性塑料培養(yǎng)瓶.

4. 使用無(wú)菌醋酸溶液調(diào)整pH 值或充入無(wú)菌CO2（將培養(yǎng)液敞口放入培養(yǎng)箱也可）.

5. 重新配置消化液或培養(yǎng)液.

6. 啟用新的保種細(xì)胞.

7. 調(diào)節(jié)最佳接種細(xì)胞濃度.