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ELISA實驗各類組織勻漿樣本的處理說明
閱讀：663 發(fā)布時間：2022-11-1ELISA 實驗中的各類組織勻漿有容易勻漿的組織和不易勻漿的組織的兩類樣本，下面分別介紹它們的采集、處理和保存。
一、應用 ELISA 實驗的各類組織勻漿（容易勻漿的組織）樣本的采集、處理和保存。
1、 采集組織，在冰冷的生理鹽水中漂洗，除去血液，濾紙拭干，稱重，剔除附屬的結締組織，稱取組織塊。
2、用移液管量取 0.1M PBS 或者用 0.86％冷生理鹽水，勻漿介質或生理鹽水的體積總量應該是組織塊重量的 9 倍，用眼科小剪盡快剪碎組織塊（天然時操作要在冰水浴中進行，將盛有組織 的小燒杯放入冰水中）。
3、勻漿的方式有多種：
a) 手工勻漿：將剪碎的組織倒入玻璃勻漿管中，再將剩余的 1/3 勻漿介質或生理鹽水沖洗殘留在燒杯中的碎組織塊，一起倒入勻漿管中進行勻漿，左手持勻漿管將下 端插入盛有冰水混合物的器皿中，右手將搗桿垂直插入套管中，上下轉動研磨數十次（6～8 分鐘），充分研碎，使組織勻漿化。
b) 機器勻漿：用組織搗碎機 10000～15000r/min 上下研磨制成 10％組織勻漿，也可用內切式組織勻漿機制備（勻漿時間 10 秒/次，間隙 30 秒，連續(xù) 3～5 次，在冰水中進行），皮膚、肌肉組織等可延長勻漿時間。
4、將制備好的 10％勻漿用離心機 4℃，3000rpm 離心 15min，將離心好的勻漿留上清，棄下面沉淀。
5、取上清。 分裝凍存?zhèn)溆茫?/p>
2-8℃下，可放置保存 24-48 小時；
-20℃下，可放置保存 1 個月；
-70℃下，可放置保存 6 個月；
6、根據你的實驗需要，取適量上清夜進行各種 ELISA 測定。
二、ELISA 實驗中各類組織勻漿（不易勻漿的組織）樣品的采集、處理和保存。
1、采集組織，在冰冷的生理鹽水中漂洗，除去血液，濾紙拭干，稱重，剔除附屬的結締組織，稱取組織塊。
2、用移液管量取 0.1M PBS 或者用 0.86％冷生理鹽水，勻漿介質或生理鹽水的體積總量應該是組織塊重量的 9 倍，用眼科小剪盡快剪碎組織塊（天然時操作要在冰水浴中進行，將盛有組織 的小燒杯放入冰水中）。
3、勻漿的方式有多種：
a)手工勻漿：將剪碎的組織倒入玻璃勻漿管中，再將剩余的 1/3 勻漿介質或生理鹽水沖洗殘留在燒杯中的碎組織塊，一起倒入勻漿管中進行勻漿，左手持勻漿管將下 端插入盛有冰水混合物的器皿中，右手將搗桿垂直插入套管中，上下轉動研磨數十次（6～8 分鐘），充分研碎，使組織勻漿化。
b)機器勻漿：用組織搗碎機 10000～15000r/min 上下研磨制成 10％組織勻漿，也可用內切式組織勻漿機制備（勻漿時間 10 秒/次，間隙 30 秒，連續(xù) 3～5 次，在冰水中進行），皮膚、肌肉組織等可延長勻漿時間。
c) 超聲粉碎：用超聲粉碎機進行粉碎，可用 Soniprep150 型超聲波發(fā)生器以振幅 14 微米超聲處理 30 秒使細胞破碎，也可用國產超聲波發(fā)生儀，用 40 安培，5 秒/次，間隙 10 秒反復 3～5 次。
4、將制備好的 10％勻漿用離心機 4℃，3000rpm 離心 15min，將離心好的勻漿留上清，棄下面沉淀。
5、取上清。 分裝凍存?zhèn)溆茫?/p>
2-8℃下，可放置保存 24-48 小時；
-20℃下，可放置保存 1 個月；
-70℃下，可放置保存 6 個月；
6、根據你的實驗需要，取適量上清夜進行各種 ELISA 測定。