Cy5雙酸-N-羥基琥珀酰亞胺酯實時熒光定量PCR技術(shù)有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點檢測的局限，實現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測一次熒光信號的強度，并記錄在電腦軟件之中，通過對每個樣品Ct值的計算，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得定量結(jié)果。

參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：Cy5雙酸-N-羥基琥珀酰亞胺酯
貨號：FSP017
產(chǎn)品規(guī)格：1 mg/5 mg
分類：熒光核酸試劑
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。
產(chǎn)品特點：
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
儲存條件：
14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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探針法：
aqMan 探針是一種寡核苷酸探針，它的熒光與目的序列的擴增相關(guān)。它與目標(biāo)序列上游引物和下游引物之間的序列配對。熒光基團(tuán)連接在探針的5’ 末端，而淬滅劑則在3’ 末端。當(dāng)完整的探針與目標(biāo)序列配對時，熒光基團(tuán)發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進(jìn)行延伸反應(yīng)時，聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進(jìn)行酶切，使得熒光基團(tuán)與淬滅劑分離。隨著擴增循環(huán)數(shù)的增加，釋放出來的熒光基團(tuán)不斷積累。因此熒光強度與擴增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系。相對于染料法,Taqman探針法具有更高的特異性和準(zhǔn)確性。
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
小鼠γ分泌酶分析檢測試劑盒HSP60 (D6F1) XP® Rabbit mAb100 ul

小鼠αL巖藻糖苷酶（AFU）分析檢測試劑盒MAML1 (D3K7B) Rabbit mAb100 ul

小鼠α1酸性糖蛋白（α1-AGP）分析檢測試劑盒Histone H3 (D1H2) XP® Rabbit mAb (Pacific Blue™ Conjugate)100 ul

小鼠Ⅳ型膠原（Col Ⅳ）分析檢測試劑盒BLNK (D8R3G) Rabbit mAb1 Kit

兔干擾素誘導(dǎo)蛋白10（IP-10/CXCL10）分析檢測試劑盒PTMScan® Phospho-CK2 Substrate Motif (S*/T*DXE) Kit100 ul

豚鼠催產(chǎn)素（OT）分析檢測試劑盒KLF4 (D1F2) Rabbit mAb300 ul

山羊過氧化氫酶（CAT）分析檢測試劑盒SignalSilence® EWS siRNA I100 ul

人角化細(xì)胞生長因子（KGF）分析檢測試劑盒Phospho-Akt (Thr450) (D5G4) Rabbit mAb100 ul

人降鈣素（CT）分析檢測試劑盒p27 Kip1 (D69C12) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate)1 Kit

人鉀離子通道蛋白抗體分析檢測試劑盒PhosphoPlus® PERK (Thr980) Antibody Duet100 ul

人甲基化DNA蛋白半胱氨酸S甲基轉(zhuǎn)移酶分析檢測試劑盒Bim (C34C5) Rabbit mAb (PE Conjugate)100 ul

人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4（TIMP-4）分析檢測試劑盒RNF40 (D2R2O) Rabbit mAb100 ul

人基質(zhì)金屬蛋白酶25（MMP25）分析檢測試劑盒SPT16 (D7I2K) Rabbit mAb100 ul

人肌腱蛋白R（TN-R）分析檢測試劑盒CCR2 (D14H7) Rabbit mAb1 Kit

人環(huán)磷酸鳥苷（cGMP）分析檢測試劑盒PhosphoPlus® Histone H3 (Ser10) Antibody Duet100 ul

人黑色素瘤活性抑制蛋白（MIA）分析檢測試劑盒Ki-67 (D3B5) Rabbit mAb (Mouse Preferred; IHC Formulated)20 ul

人果糖（FRA）分析檢測試劑盒Ki-67 (D3B5) Rabbit mAb (Mouse Preferred; IHC Formulated)100 ul
Cy5雙酸-N-羥基琥珀酰亞胺酯Aspergillus│oryzae分離基物: 醬曲凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)蛋白酶培養(yǎng)基: CM0014生長條件: 25~28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法

Vibrio│carchariae分離基物: 水樣/上層海水斜面培養(yǎng)物模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: potential antifouling 潛在的抗污損活性培養(yǎng)基: 467生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

Pseudoalteromonas│sp.分離基物: 沉積物/深灰色沉積物凍干物模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)酶微生物/產(chǎn)蛋白酶菌株 產(chǎn)酶微生物/蛋白酶、脂酶（三丁酸甘油酯）培養(yǎng)基: 821生長條件: 15℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

Salmonella│sp.分離基物: 雞肛門拭子斜面培養(yǎng)物；凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 流行病學(xué)調(diào)查和細(xì)菌耐藥性檢測培養(yǎng)基: 2生長條件: 37℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

Bacillus│thuringiensis斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 266生長條件: 30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法

Escherichia│coli分離基物: 畜禽臟器凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 用于科研培養(yǎng)基: 335生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法;

Colletotrichum│gloeosporioides斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 25-28℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;礦物油法;定期移植法

米曲霉種屬: Aspergillus oryzae (Ahlburg) Cohn凍干管，斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究；。產(chǎn)糖化酶，淀粉酶，酒精糖化菌。培養(yǎng)基: Czapek's 瓊脂：蔗糖 30.0 g,NaNO3 3.0 g,MgSO4·7H2O 0.5 g,KCl 0.5 g,FeSO4·4H2O 0.01 g,K2HPO4 1.0 g,瓊脂 15.0 g,蒸餾水 1.0 L,pH 6.0-6.5，121℃，15min。傳代方法: ①凍干管：75%酒精擦拭管壁，后用砂輪在凍干管壁劃兩圈，掰斷，用200μL無菌水或培養(yǎng)基充分溶解，平板涂布，活化培養(yǎng)。

②斜面：試管口用75%酒精擦拭后，火焰灼燒，后用無菌接種鏟切塊，挑取接入平板或斜面，培養(yǎng)。生長條件: 25-28℃，好氧存儲條件: 2-8℃冷藏

Escherichia│coli分離基物: 病料凍結(jié)物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 分類學(xué)，形態(tài)研究。培養(yǎng)基: 335生長條件: 37
操作程序：
產(chǎn)品僅用于科研由您提供該實驗中目的基因的相關(guān)資料（如：基因名稱、序列等信息），我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線；
商定服務(wù)收費、付款方式、服務(wù)期限等，并簽定技術(shù)服務(wù)合同。
有您提供實驗所需的足夠量的實驗樣本（100mg組織或107個細(xì)胞），本公司不接受您提供的RNA樣本PCR所需引物/探針（如果用探針法），可以由您自己提供，也可以委托本公司設(shè)計合成（費用另計）。如果由您自己提供，必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉，本公司不接受已溶解的引物/探針。
我們進(jìn)行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴增、數(shù)據(jù)分析。
提供實驗報告，包括實驗過程、所用儀器試劑、擴增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。