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生化試劑的一些概要:硅膠板GF
生化試劑又叫生化藥品,簡稱試劑。它是工農(nóng)業(yè)、文教衛(wèi)生、科學(xué)研究以及國防建設(shè)等多方面進(jìn)行化驗(yàn)分析的重要藥劑。生化試劑是指具有一定純度標(biāo)準(zhǔn)的各種單質(zhì)和化合物(也可以是混合物。要進(jìn)行任何實(shí)驗(yàn)都離不了試劑,試劑不僅有各種狀態(tài),而且不同的試劑其性能差異很大。有的常溫非常安定、有的通常就很活潑,有的受高溫也不變質(zhì)、有的卻易燃易爆:有的香氣濃烈,有的則劇毒……。只有對生化試劑的有關(guān)知識深入了解,才能安全、順利進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)。既可保證達(dá)到預(yù)期實(shí)驗(yàn)?zāi)康?,又可消除對環(huán)境的污染。因此,首先要知道試劑的分類情況。然后掌握各類試劑的存放和使用。
下面是公司生化試劑產(chǎn)品: 硅膠板GF
2-硝基苯甲酸,鄰硝基苯甲酸,O-硝基苯甲酸,五五二硫酸,2-Nitrobenzoic acid CP,99% 25克 552-16-9 RT
3-硝基苯甲酸,間硝基苯甲酸,3-Nitrobenzoic acid CP,99% 25克 121-92-6 RT
4-硝基苯甲酸,對硝基苯甲酸,對硝苯甲酸,4-Nitrobenzoic acid,PNB CP,99% 100克 62-23-7 RT
4-叔丁基苯甲酸,對叔丁基苯甲酸,對第三丁基苯甲酸,對特丁基苯甲酸,4-T-丁基苯甲酸,PTBBA 特純,99% 100克 98-73-7 RT
500克
2-氯苯甲酸,鄰氯苯甲酸,鄰氯芐酸,OCBA CP,98% 25克 118-91-2 RT
250克
3-氯苯甲酸,間氯苯甲酸,3-Chlorobenzoic acid CP,99% 25克 535-80-8 RT
100克
500克
4-氯苯甲酸,對氯苯甲酸,PCBA CP,98% 25克 CAS:74-11-3 RT
100克
4-氯-3,5-二硝基苯甲酸,3,5-二硝基-4-氯苯甲酸,3,5-二硝基對氯苯甲酸,4-C-3,5-DNBA BR,99% 25克 118-97-8 RT
100克
3,5-二硝基苯甲酸,3,5-二硝基安息香酸,3,5-二硝基苯酸,3,5-二硝苯甲酸,DNBA CP,99% 25克 99-34-3 RT
2,4-二羥基苯甲酸,雷瑣辛甲酸,間苯二酚甲酸,樹脂酚甲酸,β-雷鎖辛酸,對羥基水楊酸,β-雷瑣酸,BRA CP,99% 25克 89-86-1 RT,避光
3,4-二羥基苯甲酸,原兒茶酸,鄰苯二酚-4-羧酸,3,4-Dihydroxybenzoic acid CP,97% 25克 99-50-3 RT,避光
100克
500克
3,4-二甲氧基苯甲酸,綠藜蘆酸,藜蘆酸,3,4-二甲氧基苯酸,3,4-二甲氧基甲酸,3,4-二甲氧苯甲酸,3,4-二甲氧芐酸,3,4-Dimethoxybenzoic acid AR,98% 100克 CAS:93-07-2 RT
鄰,2-乙氧基苯甲酸,2-乙氧基安息香酸,2-Ethoxybenzoic acid BR,98% 25克 134-11-2 RT
100克
500克
4-氟苯甲酸,對氟苯甲酸,對氟安息香酸,4-Fluorobenzoic acid CP,99% 10克 456-22-4 RT
對羥基苯甲酸,4-羥基苯甲酸,對苯酚甲酸,對羥基安息香酸,p-Hydroxybenzoic acid CP,99% 100克 99-96-7 RT,避光
3-碘苯甲酸,間碘苯甲酸,3-碘苯酸,間碘苯酸,3-Iodobenzoic acid GR,99.0% 5克 618-51-9 RT,避光
25克
100克
2-甲氧基苯甲酸,鄰甲氧基苯甲酸,鄰茴香酸,水楊酸甲醚,2-Methoxybenzoic acid CP,99% 100克 579-75-9 RT
3-甲氧基苯甲酸,間甲氧基苯甲酸,間茴香酸,3-Methoxybenzoic acid CP,98% 100克 586-38-9 RT
500克
4-甲氧基苯甲酸,對甲氧基苯甲酸,對茴香酸,大茴香酸,P-茴香酸,4-茴香酸,對甲氧苯甲酸,4-Methoxybenzoic acid CP,99% 100克 100-09-4 RT
N-苯基代鄰氨基苯甲酸,苯基鄰-氨基苯甲酸,釩試劑,N-苯基鄰氨基苯甲酸,芬那酸,N-苯基氨茴酸,二苯胺-2-羧酸,N-苯基代鄰位氨基苯酸,2-(苯基氨基)苯甲酸,2-苯氨基苯甲酸,N-苯基蒽酸,鄰苯胺苯甲酸,DPC AR,99.5% 25克 91-40-7 RT
苯甲酸鈉,安息香酸鈉,苯酸鈉,Sodium benzoate AR,99.5% 250克 532-32-1 RT
4-羥基苯甲酸鈉,對羥基苯甲酸鈉,對苯酚甲酸鈉,4-Hydroxybenzoic acid sodium salt CP,98.5% 100克 114-63-6 RT,避光
3-硝基苯二甲酸,3-硝基鄰苯二甲酸,3-硝基酞酸,3-硝基-1,2-苯二羧酸,間硝基苯二甲酸,3-硝基鄰苯二酸,3-硝酞酸,間硝基酞酸,3-NPA BR,96% 100克 603-11-2 RT
500克
鄰苯二甲酸,鄰酞酸,1,2-苯二羧酸,1,2-苯二甲酸,鄰苯二酸,o-Phthalic acid AR,99.8% 500克 88-99-3 RT
色標(biāo),99% 5克
1-羥基-2-萘甲酸,1-萘酚-2-羧酸,1,2-酸,1-萘酚-2-甲酸,1-羥基-2-萘酸,1-Hydroxy-2-naphthoic acid BR,98% 100克 86-48-6 RT,避光
500克
2-羥基-1-萘甲酸,2-萘酚-1-羧酸,2-羥基-1-萘酸,2-羥基-α-萘甲酸,2-Hydroxy-1-naphthoic acid BR,98% 50克 2283-8-1 RT
250克
間苯二甲酸,間酞酸,間二羧基苯,異苯二甲酸,1,3-苯二羧酸,1,3-苯二甲酸,異酞酸,IPA CP,99% 250克 121-91-5 RT
對苯二甲酸,對酞酸,松油苯二甲酸,松油苯二甲酸,1,4-苯二甲酸,苯-1,4-二羧酸,PTA AR,99% 100克 100-21-0 RT
500克
4-α-二羥基桂皮酸,4-α-二羥基肉桂酸,α-羥基對香豆酸,4-Hydroxyphenylpyruvic acid BR,98% 1克 156-39-8 RT
5克
2-丁酮酸,2-氧代丁酸,3-甲基丙酮酸,丙酰基甲酸,2-酮丁酸,2-Ketobutyric acid BR,97% 5克 600-18-0 RT
25克
苦酮酸,4-硝基-3-甲基對硝基苯基-5-吡唑啉酮,3-甲基-4-硝基-1-(對硝基苯)-2-吡唑啉-5-酮,1-(對硝基苯)-3-甲基-4-硝基-5-吡唑啉酮,4-硝基-3-甲基-1-(對硝基苯)-5-吡唑啉酮,3-甲-4-硝-1-對硝苯-5-吡唑啉酮,Picrolonic acid CP,98% 25克 550-74-3 RT
丙酮酸,乙酰甲酸,2-氧代丙酸,2-酮基丙酸,α-酮基丙酸,乙鹽甲酸,乙酰基甲酸,Pyruvic acid AR,98% 250克 127-17-3 2~8℃,避光
常用生化試劑作用:
1、蛋白酶K:能水解消化蛋白質(zhì),特別是與DNA結(jié)合的組蛋白,在尿素和SDS中穩(wěn)定。一般工作濃度是50—100μg/ml,推薦反應(yīng)緩沖液:50mM Tris-HCl (pH7.5),10mM CaCl2。
2、SDS:十二烷基硫酸鈉,溶解細(xì)胞膜上的脂類與蛋白質(zhì),因而溶解膜蛋白而破壞細(xì)胞膜,并解離細(xì)胞中的核蛋白,SDS 還能與蛋白質(zhì)結(jié)合而沉淀。
3、IPTG:異丙基-β-D-硫代半乳糖苷, 常用于藍(lán)白斑篩選及IPTG誘導(dǎo)的細(xì)菌內(nèi)的蛋白表達(dá)等。IPTG和乳糖的結(jié)構(gòu)相似,所以它和乳糖一樣,可以與乳糖操縱元的阻遏蛋白結(jié)合,使阻遏蛋白的空間構(gòu)像變化,四聚體解聚成單體,失去與操縱子特異性結(jié)合的能力,從而解除了阻遏蛋白的作用,使其后的基因得以轉(zhuǎn)錄合成利用乳糖的酶類。與乳糖不同的是,IPTG不被 β-半乳糖苷酶水解。常與X-GAL一起用于藍(lán)白斑篩選。作用*的誘導(dǎo)劑,不被細(xì)菌代謝而十分穩(wěn)定。
4、X-gal:5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷,是IPTG的顯色試劑,在IPTG的催化下顯藍(lán)色。常跟IPTG一起用與藍(lán)白斑篩選。
5、G418:一種抗生素,對幾乎所有的細(xì)胞都有毒性,是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染zui常用的選擇試劑。當(dāng)neo基因被整合進(jìn)真核細(xì)胞基因組合適的地方后,則能啟動neo基因編碼的序列轉(zhuǎn)錄為mRNA,從而獲得抗性產(chǎn)物氨基糖苷磷酸轉(zhuǎn)移酶的高效表達(dá),使細(xì)胞獲得抗性而能在含有G418的選擇性培養(yǎng)基中生長。G418的這一選擇特性 ,已在基因轉(zhuǎn)移、基因敲除、抗性篩選以及轉(zhuǎn)基因動物等方面得以廣泛應(yīng)用。
6、DMSO:二甲基亞砜。實(shí)驗(yàn)室常用于作液體層析溶劑,同時(shí)用作測試物質(zhì)紫外消光值上時(shí)用作參照物。能溶于所有烷烴和烯烴。
7、曲拉通X-100:TritonX-100,用的細(xì)胞裂解液成分之一,在保護(hù)蛋白活性方面有一定作用, 能力介于NP40和SDS之間,偏向于NP40。
8、NP-40:很溫和的去垢劑,1%濃度的基本可以破壞掉胞膜,而對核膜破壞的作用弱,結(jié)合特定的buffer可以獲得胞漿蛋白。
9、BSA:牛血清白蛋白, 主要起維持滲透壓作用、PH緩沖作用、載體作用和營養(yǎng)作用。在動物細(xì)胞無血清培養(yǎng)中,添加白蛋白可起到生理和機(jī)械保護(hù)作用和載體作用。常用于蛋白定量中的內(nèi)參和抗體稀釋液。
10、甲酰胺: 甲酰胺被用作凝膠電泳中RNA的穩(wěn)定劑,也用于穩(wěn)定毛細(xì)管電泳中的變性單股DNA。
11、TEMED:四甲基乙二胺。促凝劑。在中性及堿性pH條件下,加入TEMED可加速凝膠聚合。
12、巰基乙醇:一種強(qiáng)還原劑??蛇€原蛋白二硫鍵,從而使蛋白保持溶解狀態(tài),有利于與SDS的結(jié)合。使蛋白解離成單個(gè)亞基。
13、甲叉雙丙烯酰胺:N,N'-甲叉雙丙烯酰胺,別名MBA,又叫亞甲基雙丙烯酰胺,次甲基雙丙烯酰胺,N,N'-甲撐雙丙烯酰胺。作交聯(lián)劑與丙烯酰胺聚合而制備聚丙烯酰胺凝膠。
14、過硫酸銨:過硫酸銨(APS)的作用主要是提供自由基,然后在促凝劑TEMED的作用下使丙烯酰胺及甲叉丙烯酰胺聚合。
15、B27:一種添加劑,用于神經(jīng)肝細(xì)胞培養(yǎng),被認(rèn)為具有抑制膠質(zhì)細(xì)胞生長的作用。
16、DTT:二硫蘇糖醇,常用還原劑,既有抗氧化作用。它能保護(hù)酶分子上的還原性基團(tuán),維持還原性環(huán)境,穩(wěn)定酶的活性。又是一種蛋白質(zhì)變性劑,破壞二硫鍵,濃度不同,起到的作用也不同。
17、弗氏不*佐劑和弗氏*佐劑:弗氏*佐劑是一種油包水的乳濁液,含結(jié)核分枝桿菌的細(xì)胞壁成分。佐劑活性來自于油滴中免疫原的持續(xù)釋放,并刺激局部免疫反應(yīng)。弗氏不*佐劑用于初次免疫刺激。為了減少副作用,不含結(jié)核分枝桿菌成分的弗氏不*佐劑用于加強(qiáng)弗氏*佐劑是一種油包水的乳濁液,能夠非常有效的誘導(dǎo)產(chǎn)生高滴度的抗體。弗氏*佐劑含結(jié)核分枝桿菌的細(xì)胞壁成分,可以加強(qiáng)對抗原的抗體反應(yīng)。佐劑活性來自于油滴中免疫原的持續(xù)釋放,并刺激局部免疫反應(yīng)。
18、吐溫 20:Tween-20 ,常用的非離子去垢劑。
19、吐溫 80:weenum 80 ,除作乳化劑外,也用作某些水中難溶藥物的增溶劑。
20.、十二烷基肌氨酸鈉 :脫細(xì)胞試劑,制備脫細(xì)胞組織工程支架材料。21.PVPP:PVPP對片劑具有崩解作用,能和各種不溶于水的藥物共容,能穩(wěn)定化各種懸浮劑,又具有形成絡(luò)合物的能力以及吸附作用等,因而可用作醫(yī)藥助劑。也用于除去啤酒中的多酚。22、PIPES:哌嗪-N,N'-二(2-乙磺酸),實(shí)驗(yàn)室做緩沖劑用。全名是哌嗪-N,N-二(2-乙磺酸),pKa是6.80。不參與也不干擾生物化學(xué)反應(yīng),價(jià)格比較貴。常用在免疫和細(xì)胞類的實(shí)驗(yàn)中,PIPES有時(shí)還被用來制備大腸桿菌感受態(tài)。23、CTAB:十六烷基三乙基溴化銨,一種去污劑,可溶解細(xì)胞膜,它能與核酸形成復(fù)合物,在高鹽溶液中((0.7 mol/L NaCl)是可溶的,當(dāng)降低溶液鹽濃度到一定程度(0.3 mol/L NaCl)時(shí),從溶液中沉淀,通過離心就可將CTAB-核酸的復(fù)合物與蛋白,多糖類物質(zhì)分開。zui后通過乙醇或異丙醇沉淀DNA,而CTAB溶于乙醇或異丙醇而除去。CTAB法是現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)室zui常用的一種提取核酸的手段。24、HEPES:羥乙基哌秦乙硫磺酸,一種弱酸緩沖劑,主要作用是防止培養(yǎng)基pH迅速變化。在開放式培養(yǎng)條件下,培養(yǎng)基脫離了5%CO2的環(huán)境,CO2氣體迅速逸出,pH迅速升高,若加了HEPES,此時(shí)可以維持pH7.0左右。一般在進(jìn)行克隆化培養(yǎng)時(shí)要添加HEPES。
25、MOPS:一種緩沖液,有抑制RNA酶的作用,一般和甲醛(用于變形RNA)用于RNA變性電泳。26、鹽酸胍:鹽酸胍等可使蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)中的氫鍵發(fā)生斷裂,這增加了非極性分子包括氨基酸側(cè)鏈的溶解度,減少了疏水相互作用。27、PMSF:Phenylmethanesulfonyl fluoride,中文名為苯甲基磺酰氟。用于抑制蛋白酶. PMSF嚴(yán)重?fù)p害呼吸道粘膜、眼睛及皮膚,吸入、吞進(jìn)或通過皮膚吸收后有致命危險(xiǎn)。一旦眼睛或皮膚接觸了PMSF,應(yīng)立即用大量水沖洗之。凡被PMSF污染的衣物應(yīng)予丟棄。PMSF在水溶液中不穩(wěn)定。應(yīng)在使用前從貯存液中現(xiàn)用現(xiàn)加于裂解緩沖液中。PMSF在水溶液中的活性喪失速率隨pH值的升高而加快,且25℃的失活速率高于4℃。pH值為8.0時(shí),20μmmol/l PMSF水溶液的半壽期大約為85min,這表明將PMSF溶液調(diào)節(jié)為堿性(pH>8.6)并在室溫放置數(shù)小時(shí)后,可安全地予以丟棄。
28、溴酚藍(lán):pH指示劑,pH=3.0時(shí)呈黃色,pH=4.6時(shí)呈藍(lán)紫色。酸堿指示劑;非水滴定用指示劑,蛋白電泳染色;病毒化驗(yàn)等。29、臺盼蘭:臺盼藍(lán)(Trypan Blue)或稱臺盼蘭,是細(xì)胞活性染料,常用于檢測細(xì)胞膜的完整性。30、二甲苯青FF:用于瓊脂糖聚丙烯酰胺凝膠電泳的示蹤染料, 易溶于水和醇,可與溴芬藍(lán)按照一定比例配置loading buffer。31、吖啶橙:是一種熒光色素,與細(xì)胞中DNA和RNA結(jié)合量存在差別,可發(fā)出不同顏色的熒光,與DNA結(jié)合量少發(fā)綠色熒光,與RNA結(jié)合量多發(fā)桔黃色或桔紅色熒光。該染料具有膜通透性,能透過細(xì)胞膜,使核DNA和RNA染色。在熒光顯微鏡下觀察,吖啶橙可透過正常細(xì)胞膜,使細(xì)胞核呈綠色或黃綠色均勻熒光;而在凋亡細(xì)胞中,因染色質(zhì)固縮或斷裂為大小不等的片斷,形成凋亡小體。吖啶橙使其染上致密濃染的黃綠色熒光,或黃綠色碎片顆粒;而壞死細(xì)胞黃熒光減弱甚至消失。吖啶橙AO常與溴化乙啶EB合用雙染,因EB只染死細(xì)胞使之產(chǎn)生桔黃色熒光,由此可區(qū)分出正常細(xì)胞、凋亡細(xì)胞及壞死細(xì)胞.它還可以用作移碼突變的誘變劑,能鑲嵌于兩個(gè)相鄰的堿基對之間,這樣在DNA復(fù)制過程中,會使DNA鏈增加或缺失一個(gè)堿基,造成移碼突變。吖啶橙染液有毒,操作時(shí)要戴手套,需避光。32、EDTA和EGTA:EDTA--乙二胺四乙酸EDTA是螯合劑的代表性物質(zhì)。能和堿金屬、稀土元素和過渡金屬等形成穩(wěn)定的水溶性絡(luò)合物。此外EDTA也可用來使有害放射性金屬從人體中迅速排泄起到解毒作用。也是水的處理劑。EGTA--乙二醇雙(2-氨基乙基)四乙酸在Mg2+存在下測定Ca2+時(shí),可用EGTA直接滴定,滴定誤差小于0.3% ,比用EDTA滴定提高了選擇性。此外它與金屬離子形成的配合物的穩(wěn)定性普遍比相應(yīng)的EDTA配合物差。33、TRICINE:N-[三(羥甲基)甲基]甘氨酸, 常見的電泳系統(tǒng)是Tris-甘氨酸系統(tǒng);Tris-Tricine電泳則用于分子量小于10kDa的多肽和蛋白的電泳,能夠獲得較好的分離效果。可以用前者代替。34、PVP40:PVP40 中的CO - N = 有很強(qiáng)的結(jié)合酚類化合物的能力,與其形成穩(wěn)定的復(fù)合物,常用于提取RNA時(shí)除去酚類。35、脫氧膽酸鈉:離子型去垢劑,作用有:1、裂解細(xì)胞;2、溶解蛋白,尤其是可以溶解一些難溶于水的蛋白,如膜蛋白等;3、很適合做WB,但在Co-IP中使用,需要謹(jǐn)慎。36、6-BA:細(xì)胞培養(yǎng)中用到,細(xì)胞分裂素。37、碘代乙酰胺:也叫作碘乙酰胺,2-碘乙酰胺。用于有機(jī)合成,在蛋白組學(xué)中組氨酸和半胱氨酸的烷基化試劑,用于多肽測序以及酶抑制劑等,蛋白組學(xué)級試劑。38、萘乙酸:NAA,為廣譜性植物生長調(diào)節(jié)劑??纱龠M(jìn)細(xì)胞分裂,誘導(dǎo)形成不定根,改變雌雄花比例,增加坐果率等39。番紅O與藏紅T:氧化還原指示劑、生物染色、酸堿指示劑,滴定分析亞硝酸鹽。40。TTC:2,3,5-三苯基氯化四氮唑(紅四氮唑),多用于藥物分析和瓊脂糖添加劑,在計(jì)數(shù)瓊脂中加入適量的TTC(0.5% TTC 1ML加到100ML瓊脂中),細(xì)菌菌落長成紅顏色,對去除食品本底顆粒物干擾非常有意義。