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大鼠冠狀動脈平滑肌細(xì)胞

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更新時間:2024-01-29 10:13:05瀏覽次數(shù):515

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
貨號 A01X1535 主要用途 僅供科研研究實驗
組織來源 冠狀動脈 種屬來源 大鼠
生長特性 貼壁 細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
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詳細(xì)介紹

公司產(chǎn)品僅供科研研究實驗

一、細(xì)胞基本屬性

細(xì)胞名稱

大鼠冠狀動脈平滑肌細(xì)胞

組織來源

冠狀動脈

商品貨號

A01X1535

種屬來源

大鼠

產(chǎn)品規(guī)格

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

細(xì)胞簡介

大鼠冠狀動脈平滑肌細(xì)胞分離自冠狀動脈組織;冠狀動脈是供給心臟血液的動脈,起于主動脈根部,分左右兩支,行于心臟表面。采用Schlesinger等的分類原則,將冠狀動脈的分布分為三型:右優(yōu)勢型、均衡型、左優(yōu)勢型。左右冠狀動脈是升主動脈的第一對分支。左冠狀動脈為一短干,發(fā)自左主動脈竇,經(jīng)肺動脈起始部和左心耳之間,沿冠狀溝向左前方行后,立即分為前室間支和旋支。前室間支沿前室間溝下行,旋支繞過心尖切跡至心的膈面與右冠狀動脈的后室間支相吻合。它是構(gòu)成冠狀動脈壁的主要細(xì)胞成分,細(xì)胞膜上分布著多種離子通道,如電壓依賴性Na+通道、多種Ca2+通道和K+通道;它們參與了靜息電位的維持與細(xì)胞膜電位的復(fù)極化、超極化,調(diào)節(jié)血管平滑肌的收縮及舒張功能,此外動脈粥樣硬化的發(fā)展也涉及冠狀動脈平滑肌細(xì)胞增殖、炎癥及凋亡等。因此,原代分離培養(yǎng)的冠狀動脈平滑肌細(xì)胞,對研究生理和病理狀態(tài)下離子通道及血管張力變化機制具有非常重要的作用。冠狀動脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細(xì)胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點。

包被條件


培養(yǎng)基

FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率

2-3天換液一次

生長特性

貼壁

細(xì)胞形態(tài)

成纖維細(xì)胞樣

傳代特性

可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)良好

消化液

0.25%胰蛋bai酶

培養(yǎng)條件

氣相:空氣,95%;CO2,5%

 

原代細(xì)胞培養(yǎng):

原代細(xì)胞(Primary cells):是指直接從機體取出的組織或細(xì)胞獲得單個細(xì)胞并在體外進行培養(yǎng)的細(xì)胞。這里的組織主要指:組織器官、外周血及胚胎等。

原代細(xì)胞培養(yǎng):由于原代細(xì)胞生長緩慢,繁殖一定的代數(shù)停止生長(一般10代以內(nèi))。所以一般認(rèn)為:培養(yǎng)的原代的第1和傳代到第10代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞培養(yǎng)。

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6.jpg



具體步驟:

1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;

2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;

3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);

4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;

5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞,收集;

6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

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注意事項:

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。

3. 傳代培養(yǎng)過程中,消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。

4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和技術(shù)部溝通。

 


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