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大鼠海綿體平滑肌細(xì)胞

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參考價(jià)7750
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
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    生產(chǎn)商
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    上海市

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5×10^57750元15 瓶 可售
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更新時(shí)間:2024-01-29 10:17:25瀏覽次數(shù):529

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
貨號(hào) A01X1623 主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
組織來(lái)源 海綿體組織 種屬來(lái)源 大鼠
生長(zhǎng)特性 貼壁 細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
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詳細(xì)介紹

公司產(chǎn)品僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

一、細(xì)胞基本屬性

細(xì)胞名稱

大鼠海綿體平滑肌細(xì)胞

組織來(lái)源

海綿體組織

商品貨號(hào)

A01X1623

種屬來(lái)源

大鼠

產(chǎn)品規(guī)格

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

細(xì)胞簡(jiǎn)介

大鼠海綿體平滑肌細(xì)胞分離自海綿體組織;海綿體,又稱海綿體肌,是硬的平滑肌和結(jié)締組織。海綿體是一種勃起組織,外面包有堅(jiān)厚的白膜,內(nèi)部由結(jié)締組織和平滑肌組成海綿狀支架,其腔隙與血管相通。它主要包括海綿體內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞和成纖維細(xì)胞3種細(xì)胞成分。其中平滑肌細(xì)胞和成纖維細(xì)胞鑲嵌于海綿體細(xì)胞外基質(zhì)的膠原中,在消化海綿體組織時(shí),膠原酶的作用主要是松解海綿體內(nèi)皮細(xì)胞與基膜的聯(lián)系,破壞海綿體內(nèi)皮細(xì)胞間的緊密連接。因此可用膠原酶分離出海綿體平滑肌細(xì)胞。平滑肌,是非橫紋肌的肌肉組織。分布在人體動(dòng)脈和靜脈血管壁、膀胱、子宮、男性和女性生殖道、消化道、呼吸道、眼睛的睫狀肌和虹膜。平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見(jiàn)細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng),高低起伏;細(xì)胞密度低時(shí),常交織成網(wǎng)狀;密度高時(shí),則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn)。

包被條件

鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)

培養(yǎng)基

FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率

2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性

貼壁

細(xì)胞形態(tài)

成纖維細(xì)胞樣

傳代特性

可傳3-5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

消化液

0.25%胰蛋bai酶

培養(yǎng)條件

氣相:空氣,95%;CO2,5%

 

原代細(xì)胞培養(yǎng):

原代細(xì)胞(Primary cells):是指直接從機(jī)體取出的組織或細(xì)胞獲得單個(gè)細(xì)胞并在體外進(jìn)行培養(yǎng)的細(xì)胞。這里的組織主要指:組織器官、外周血及胚胎等。

原代細(xì)胞培養(yǎng):由于原代細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢,繁殖一定的代數(shù)停止生長(zhǎng)(一般10代以內(nèi))。所以一般認(rèn)為:培養(yǎng)的原代的第1和傳代到第10代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞培養(yǎng)。

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6.jpg



具體步驟:

1. 在無(wú)菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無(wú)菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;

2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;

3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);

4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來(lái)定,約1-2h;

5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí),用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞,收集;

6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

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注意事項(xiàng):

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。

2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作。

3. 傳代培養(yǎng)過(guò)程中,消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。

4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和技術(shù)部溝通。

 


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