硼酸洋紅染色液公司正在銷售的產(chǎn)品：豚鼠Apelin 13(AP13)試劑盒 Anti-MAP2K3 Antibody囊泡相關(guān)膜蛋白3抗體
豚鼠S100鈣結(jié)合蛋白B (S100B)試劑盒 Anti-MAP2K3 Antibody空泡分選蛋白18抗體
豚鼠GATA結(jié)合蛋白3(GATA3)試劑盒Anti-MAP2K4 Antibody磷酸化波形蛋白抗體
豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)試劑

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購(gòu)！

產(chǎn)品分類：細(xì)胞染色

儲(chǔ)存條件：室溫,避光,12個(gè)月

用途：硼酸洋紅染色液主要用于花粉、動(dòng)植物組織切片等樣本中細(xì)胞核的染色，亦可用于線粒體的染色

注意事項(xiàng)：又稱格林額史氏硼酸洋紅染色液，主要由高濃度硼酸、洋紅(也稱胭脂紅)等組成，pH呈酸性

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來(lái)水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測(cè)器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái)，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

黃精（制）（標(biāo)準(zhǔn)品） Niobium standard磷化GATA結(jié)合蛋白2抗體包裝1g

黃連(三角葉黃連）（標(biāo)準(zhǔn)品） Nickel Standard磷化GATA結(jié)合蛋白3抗體包裝25g

核苷 Potassium standard磷化GATA結(jié)合蛋白4抗體包裝5g

黃芪（蒙古黃芪）（標(biāo)準(zhǔn)品）  Potassium SolutionGATM蛋白抗體包裝25g

黃芪（膜莢黃芪）（標(biāo)準(zhǔn)品） Praseodymium standardγ1基丁受體GABAA Rβ1抗體包裝5g

黃芪苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Ruthenium solutionG蛋白修補(bǔ)結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體包裝1g

黃芪皂苷I(標(biāo)準(zhǔn)品) Rhodium solution過(guò)氧化1包裝5g

黃芪皂苷II(標(biāo)準(zhǔn)品) Rhenium standard粒-巨噬克激因子抗體包裝1g

黃芪皂苷III(標(biāo)準(zhǔn)品) Silicon dioxide solutionG蛋白偶聯(lián)受體GPR62蛋白抗體包裝5g

黃芪紫檀烷苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Silver standard癌雌激調(diào)控蛋白GREB1抗體包裝1g

黃芪總黃 Silver standard生長(zhǎng)分化因子9抗體包裝250mg

黃芪總皂苷（標(biāo)準(zhǔn)品） Scandium standard3-磷甘油脫氫抗體包裝1g

黃杞苷（標(biāo)準(zhǔn)品） Samarium standard生長(zhǎng)分化因子15/巨嗜抑制因子1抗體包裝5g

黃芩（標(biāo)準(zhǔn)品） Tin standardG蛋白偶聯(lián)受體GPR91蛋白抗體包裝1g

(80%) Tin standard葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白8抗體包裝5g

雞痘病毒Avipoxvirus│Fowlpox virus 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%熱穩(wěn)定抗原試劑盒輔Q10;Ubidecarenone；

大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定缺血修飾白蛋白試劑盒菝葜皂苷元;Sarsasapogenin

皺環(huán)球蓋菇Stropharia│rugosoannulata Farl. ex Murrill 質(zhì)量規(guī)格：>99%,AR犬尿試劑盒蟛蜞菊內(nèi)酯;wedelolactone
硼酸洋紅染色液IL-5 peptide  白細(xì)胞介su5抗原規(guī)格： 0.5mg

IL-6 (Interleukin-6) Human  白介su6規(guī)格： 0.5mg

IL-7(Interleukin-7)  白介su7抗原規(guī)格： 0.5mg

IL-6R Alpha (IL6R-alpha)  白細(xì)胞介su6受體α抗原規(guī)格： 0.5mg

gp130/IL-6R  白介su-6受體抗原規(guī)格： 0.5mg

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來(lái)確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過(guò)建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來(lái)實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過(guò)夜；注：對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。