詳細介紹
探針法:
aqMan 探針是一種寡核苷酸探針,它的熒光與目的序列的擴增相關(guān)。它與目標序列上游引物和下游引物之間的序列配對。熒光基團連接在探針的5’ 末端,而淬滅劑則在3’ 末端。當完整的探針與目標序列配對時,熒光基團發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進行延伸反應(yīng)時,聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進行酶切,使得熒光基團與淬滅劑分離。隨著擴增循環(huán)數(shù)的增加,釋放出來的熒光基團不斷積累。因此熒光強度與擴增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系。相對于染料法,Taqman探針法具有更高的特異性和準確性。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:ATTO 495
貨號:FSP217
產(chǎn)品規(guī)格:1mg/5mg/100mg
分類:熒光核酸試劑
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
產(chǎn)品特點:
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
儲存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
操作程序:
產(chǎn)品僅用于科研由您提供該實驗中目的基因的相關(guān)資料(如:基因名稱、序列等信息),我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線;
商定服務(wù)收費、付款方式、服務(wù)期限等,并簽定技術(shù)服務(wù)合同。
有您提供實驗所需的足夠量的實驗樣本(100mg組織或107個細胞),本公司不接受您提供的RNA樣本PCR所需引物/探針(如果用探針法),可以由您自己提供,也可以委托本公司設(shè)計合成(費用另計)。如果由您自己提供,必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉,本公司不接受已溶解的引物/探針。
我們進行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴增、數(shù)據(jù)分析。
提供實驗報告,包括實驗過程、所用儀器試劑、擴增曲線、標準曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。
人腦動脈血管內(nèi)皮細胞現(xiàn)貨供應(yīng)Cytokine Receptor Common beta-Chain Antibody100 ul
人膀胱癌組織源細胞價格RECK (D8C7) Rabbit mAb100 ul
大鼠食管平滑肌細胞報價Hydroxy-HIF-1α (Pro564) (D43B5) XP® Rabbit mAb20 ul
大鼠肝動脈平滑肌細胞現(xiàn)貨供應(yīng)Hydroxy-HIF-1α (Pro564) (D43B5) XP® Rabbit mAb100 ul
大鼠輸尿管上皮細胞報價Flotillin-2 (C42A3) Rabbit mAb100 ul
大鼠大隱靜脈內(nèi)皮細胞報價AMPA Receptor 3 (GluA 3) Antibody100 ul
大鼠前脂肪細胞價格Phospho-PDK1 (Ser241) (C49H2) Rabbit mAb20 ul
大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細胞報價Phospho-PDK1 (Ser241) (C49H2) Rabbit mAb100 ul
小鼠食管平滑肌細胞報價Notch1 (C37C7) Rabbit mAb100 ul
小鼠肝內(nèi)膽管上皮細胞報價Chk2 (1C12) Mouse mAb20 ul
小鼠心肌成纖維細胞現(xiàn)貨供應(yīng)Chk2 (1C12) Mouse mAb100 ul
小鼠心肌主動脈平滑肌細胞價格Phospho-S6 Ribosomal Protein (Ser235/236) (D57.2.2E) XP® Rabbit mAb (PE-Cy®7 Conjugate)100 ul
小鼠皮膚肥大細胞報價GOT1 (E4A4O) Rabbit mAb100 ul
RAW 264.7(小鼠單核巨噬細胞白血病細胞)說明書S100A9 (D5O6O) Rabbit mAb (IHC Formulated)100 ul
STO(小鼠胚成纖維細胞)價格Phospho-HDAC4 (Ser246)/HDAC5 (Ser259)/HDAC7 (Ser155) (D27B5) Rabbit mAb20 ul
SW480(人結(jié)腸癌細胞)報價Phospho-HDAC4 (Ser246)/HDAC5 (Ser259)/HDAC7 (Ser155) (D27B5) Rabbit mAb100 ul
CRT(人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞)現(xiàn)貨供應(yīng)HA-Tag (6E2) Mouse mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)100 ul
ATTO 495Absidia│corymbifera凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25-28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Schizosaccharomyces│pombe凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0013生長條件: 25-28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Pseudomonas│aeruginosa凍干物安全等級: 2模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
Trichoderma│viride凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 微生物代謝調(diào)控研究培養(yǎng)基: 14生長條件: 26℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
Streptomyces│aureofaciens斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)生四環(huán)素培養(yǎng)基: CM0012生長條件: 28C存儲條件: 真空冷凍干燥
Arterivirus│Porcine respiratory and reproductive syndrome virus分離基物: 病豬凍結(jié)物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 教學研究培養(yǎng)基: 0生長條件: 37
丁香假單胞菌種屬: Pseudomonas│syringae分離基物: 天牛腸道凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 飼料用纖維素酶、植酸酶、木聚糖酶等的篩選培養(yǎng)基: 0002生長條件: 26℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法
Bacillus│laevolacticus Nakayama and yanoshi分離基物: 植物根面斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 141生長條件: 28-30存儲條件: 定期移植法
Dactylella│zhongdianensis分離基物: 土壤斜面培養(yǎng)物;凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 18生長條件: 25℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法