詳細(xì)介紹
探針法:
aqMan 探針是一種寡核苷酸探針,它的熒光與目的序列的擴(kuò)增相關(guān)。它與目標(biāo)序列上游引物和下游引物之間的序列配對。熒光基團(tuán)連接在探針的5’ 末端,而淬滅劑則在3’ 末端。當(dāng)完整的探針與目標(biāo)序列配對時,熒光基團(tuán)發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進(jìn)行延伸反應(yīng)時,聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進(jìn)行酶切,使得熒光基團(tuán)與淬滅劑分離。隨著擴(kuò)增循環(huán)數(shù)的增加,釋放出來的熒光基團(tuán)不斷積累。因此熒光強(qiáng)度與擴(kuò)增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系。相對于染料法,Taqman探針法具有更高的特異性和準(zhǔn)確性。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:Cy5,尸胺
貨號:FSP015
產(chǎn)品規(guī)格:1 mg/5 mg
分類:熒光核酸試劑
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn):
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
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儲存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
操作程序:
產(chǎn)品僅用于科研由您提供該實(shí)驗(yàn)中目的基因的相關(guān)資料(如:基因名稱、序列等信息),我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線;
商定服務(wù)收費(fèi)、付款方式、服務(wù)期限等,并簽定技術(shù)服務(wù)合同。
有您提供實(shí)驗(yàn)所需的足夠量的實(shí)驗(yàn)樣本(100mg組織或107個細(xì)胞),本公司不接受您提供的RNA樣本PCR所需引物/探針(如果用探針法),可以由您自己提供,也可以委托本公司設(shè)計(jì)合成(費(fèi)用另計(jì))。如果由您自己提供,必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉,本公司不接受已溶解的引物/探針。
我們進(jìn)行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴(kuò)增、數(shù)據(jù)分析。
提供實(shí)驗(yàn)報告,包括實(shí)驗(yàn)過程、所用儀器試劑、擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。
人胞質(zhì)動力蛋白(CD)分析檢測試劑盒SignalSilence® SP1 siRNA I100 ul
人伴侶蛋白10(CPN10)分析檢測試劑盒Bak (D4E4) Rabbit mAb20 ul
人白細(xì)胞酯酶(LE)分析檢測試劑盒Bak (D4E4) Rabbit mAb300 ul
人白介素33(IL-33)分析檢測試劑盒SignalSilence® SP1 siRNA II100 ul
人白介素1受體樣1(IL1RL1)分析檢測試劑盒Bora (D2B9) Rabbit mAb100 ug
人γ谷氨酰轉(zhuǎn)移酶(GGT)分析檢測試劑盒Phospho-MEK1/2 (Ser221) Blocking Peptide100 ul
人γ-谷氨酰環(huán)化轉(zhuǎn)移酶(GGCT)分析檢測試劑盒Phospho-MERIT40 (Ser29) Antibody1 Kit
人α干擾素(IFN-α)分析檢測試劑盒PathScan® Phospho-Acetyl-CoA Carboxylase (Ser79) Chemiluminescent Sandwich Kit100 ul
人α1防御素(DEFA1)分析檢測試劑盒ITCH (D8Q6D) Rabbit mAb100 ul
人Toll樣受體6(TLR6)分析檢測試劑盒Bcl-11B (D6F1) XP® Rabbit mAb20 ul
人Toll樣受體1(TLR1)分析檢測試劑盒Bcl-11B (D6F1) XP® Rabbit mAb10 mg
人TGF-β誘導(dǎo)早期基因1(TIEG1)分析檢測試劑盒Lapatinib100 ul
人Podocin 分析檢測試劑盒WIPI1 Antibody100 ul
人L-乳酸脫氫酶(L-LDH)分析檢測試劑盒Phospho-ALK (Tyr1078) (D28B4) Rabbit mAb300 ul
人B因子(BF)分析檢測試劑盒SignalSilence® Cbl-b siRNA I100 ul
雞環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)分析檢測試劑盒DDR2 Antibody100 ul
大鼠金屬硫蛋白2(MT-2)分析檢測試劑盒CDK5 (1H3) Mouse mAb100 ul
Cy5,尸胺Escherichia│coli分離基物: 病雞肝膽凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 抗藥性檢驗(yàn)培養(yǎng)基: 335生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法;
Mesorhizobium│sp.分離基物: 紫云英根系根瘤內(nèi)斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 生物固氮培養(yǎng)基: 0063生長條件: 28-30℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法
蕈狀芽胞桿菌種屬: Bacillus│mycoides分離基物: 牛奶凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
羊布氏菌種屬: Brucella│melitensis凍干物安全等級: 3模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 分型用地方菌株,強(qiáng)毒株 生物3培養(yǎng)基: CM0112生長條件: 37℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法
Rhizobium│sp.分離基物: 馬占相思斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 固氮培養(yǎng)基: 63生長條件: 28-30存儲條件: 定期移植法
蘇云金芽孢桿菌種屬: Bacillus│thuringiensis凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
嗜熱鏈球菌種屬: Streptococcus│thermophilus分離基物: 酸奶凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 用于益生菌類食品。培養(yǎng)基: CM0790生長條件: 37℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Rhizobium│sp.分離基物: 雨樹根瘤斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 固氮培養(yǎng)基: 63生長條件: 28-30存儲條件: 定期移植法
Candida│valida凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0013生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法