ATTO 488琥珀酰亞胺酯實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。

服務(wù)流程：
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

產(chǎn)品名稱(chēng)	規(guī)格	貨號(hào)
ATTO 488琥珀酰亞胺酯	1mg/5mg/100mg	FSP216

產(chǎn)品特點(diǎn):
靈敏度高：產(chǎn)品僅用于科研可檢測(cè)個(gè)位拷貝數(shù)的基因
特異性高：有效避免非特異性擴(kuò)增的出現(xiàn)
穩(wěn)定性高：復(fù)孔間差異小，實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)性強(qiáng)
擴(kuò)增性能優(yōu)：擴(kuò)增效率高，熒光信號(hào)強(qiáng)
?
實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué)：基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué)：microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué)：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測(cè)：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測(cè)：Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測(cè)：HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué)：GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型：原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
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使用方法：
注：所有試劑使用前需*解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1.樣本處理（樣本處理區(qū)）
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等，具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說(shuō)明書(shū)；陽(yáng)性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無(wú)需提取，可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備（PCR前準(zhǔn)備區(qū)）
取N個(gè)（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽(yáng)性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。
組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣（樣本處理區(qū)）
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽(yáng)性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
大鼠白介素1可溶性受體Ⅱ（sIL-1RⅡ）分析檢測(cè)試劑盒Topoisomerase IIα (D10G9) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate)100 ul

大鼠癌胚抗原（CEA）分析檢測(cè)試劑盒CTCF (D31H2) XP® Rabbit mAb20 ul

大鼠Toll樣受體7（TLR-7）分析檢測(cè)試劑盒CTCF (D31H2) XP® Rabbit mAb400 ul

大鼠c-fos 分析檢測(cè)試劑盒Streptavidin (Sepharose® Bead Conjugate)400 ul

大鼠Ⅵ型膠原（Col Ⅵ）分析檢測(cè)試劑盒Mouse IgG (Sepharose® Bead Conjugate)100 ul

大鼠Ⅴ型膠原（Col Ⅴ）分析檢測(cè)試劑盒CNOT2 (D8Z8P) Rabbit mAb400 ul

大鼠5核苷酸酶（5-NT）分析檢測(cè)試劑盒Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control (Sepharose® Bead Conjugate)100 ul

大鼠Ⅲ型前膠原氨基末端肽（PⅢNP）分析檢測(cè)試劑盒Phospho-HDAC4 (Ser632)/HDAC5 (Ser661)/HDAC7 (Ser486) Antibody100 ul

猴子α1微球蛋白（α1-MG）分析檢測(cè)試劑盒Phospho-Stathmin (Ser38) Antibody100 ul

猴尿微量白蛋白（ALB）分析檢測(cè)試劑盒NCoR1 (E4S4N) Rabbit mAb100 ul

魚(yú)皮質(zhì)醇（Cortisol）分析檢測(cè)試劑盒Rad50 Antibody20 ul

魚(yú)黃體生成素（LH）分析檢測(cè)試劑盒Rad50 Antibody100 ul

魚(yú)果糖1 6-二磷酸酶分析檢測(cè)試劑盒Phospho-53BP1 (Thr543) Antibody100 ul

羊生長(zhǎng)分化因子9（GDF9）分析檢測(cè)試劑盒Phospho-NuMA (Ser395) Antibody100 ul

人支氣管成纖維細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)RhoC (D40E4) Rabbit mAb20 ul

人胎盤(pán)滋養(yǎng)層細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)RhoC (D40E4) Rabbit mAb100 ul

人椎間盤(pán)髓核細(xì)胞價(jià)格Id2 (D39E8) Rabbit mAb100 ul
ATTO 488琥珀酰亞胺酯Micromonospora│sp.分離基物: 爛葉土斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 抗細(xì)菌；抗金黃色葡萄球菌；抗枯草芽孢桿菌培養(yǎng)基: CM0012生長(zhǎng)條件: 35-37C存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥

Micromonospora│sp.分離基物: 土壤凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 抗恥垢分枝桿菌培養(yǎng)基: CM0027生長(zhǎng)條件: 28C存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)；真空冷凍干燥

Corynebacterium│tianjin凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)谷氨酸。培養(yǎng)基: CM0389生長(zhǎng)條件: 28-30℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法

pCas(#62225)模式菌株: 未知

安全等級(jí): 1模式菌株: no

Vibrio│alginolyticus分離基物: 水樣/上層海水斜面培養(yǎng)物模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 近海細(xì)菌培養(yǎng)基: 471生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

Penicillium│aurantiogriseum凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0013生長(zhǎng)條件: 25℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

Citricoccus│sp.分離基物: 水樣/海水凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 有機(jī)污染物降解菌/石油烴類(lèi)降解菌培養(yǎng)基: 471生長(zhǎng)條件: 4℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

Streptomyces│sp.分離基物: 土壤凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0012生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱(chēng)TaqMan PCR，后來(lái)也叫Real-Time PCR，是美國(guó)PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來(lái)的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來(lái)實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì)，熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過(guò)一個(gè)循環(huán)，收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào)，這樣我們就可以通過(guò)熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測(cè)產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線(xiàn)圖。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線(xiàn)可以分成三個(gè)階段：熒光背景信號(hào)階段，熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。在熒光背景信號(hào)階段，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無(wú)法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺(tái)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒(méi)有線(xiàn)性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對(duì)數(shù)值與起始模板量之間存在線(xiàn)性關(guān)系，我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。