詳細介紹
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
產(chǎn)品名稱 | 細胞間粘附分子1抗體 |
英文名稱 | ICAM1 |
規(guī)格 | 0.1ml |
?
公司專業(yè)供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,產(chǎn)品品質(zhì),價格實惠,多種規(guī)格供應,售后完善。抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術(shù):
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
大鼠疊氮胸苷(AZT)蠟樣芽胞桿菌拉丁屬名: Bacillus cereus
大鼠多巴胺(DA)黑曲霉拉丁屬名: Aspergillus niger
大鼠高靈敏度促甲狀腺激素(U-TSH)三葉草根瘤菌用途: 與三葉草共生固氮
大鼠高敏甲狀腺素(u-T4)灰肉色鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces griseocarneus
大鼠谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)桑帕約氏酵母拉丁屬名: Rhodotorula vanillica
大鼠甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP) 屎腸球菌拉丁屬名: Enterococcus faecium
大鼠抗心脂抗體IgG(ACA-IgG)蛹蟲草*拉丁屬名: Cordyceps sobolifera
大鼠抗心脂抗體IgM(ACA-IgM)鞘氨盒菌屬拉丁屬名: Sphingopyxis wooponensis
大鼠抗心脂抗體IgA(ACA-IgA)巨型艾美耳球蟲拉丁屬名: maxima
大鼠apelin 12(AP12)葡萄座腔菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
大鼠α干擾素(IFN-α)金龜子綠僵菌小孢變種用途: 生物防治
大鼠的牛血清白蛋白殘留檢測栗疫菌拉丁屬名: Cryphonectria parasitica
大鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)魯杰氏菌拉丁屬名: Ruegeria sp.
大鼠內(nèi)毒素(ET)大腸埃希氏菌拉丁屬名: Escherichia coli
大鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
大鼠環(huán)孢素A(CsA)炭疽芽胞桿菌拉丁屬名: anthracis
細胞間粘附分子1抗體磷酸化FRA-1蛋白抗體Donepezil hydrochloride中文名:鹽酸多奈哌齊別名:分子式:C24H30Cl3
磷酸化叉頭蛋白家族抗體Nifedipine中文名:硝苯地平別名:分子式:C17H18N2O6
磷酸化叉頭蛋白3A抗體Thiamphenicol中文名:甲砜霉素別名:分子式:C12H15Cl25S
叉頭蛋白O4抗體Fenbendazole中文名:芬苯達唑別名:分子式:C15H13N3O2S
FMS樣酪氨酸激酶3Lidocaine中文名:利多卡因別名:分子式:C14H22N2O