詳細(xì)介紹
探針法:
aqMan 探針是一種寡核苷酸探針,它的熒光與目的序列的擴(kuò)增相關(guān)。它與目標(biāo)序列上游引物和下游引物之間的序列配對(duì)。熒光基團(tuán)連接在探針的5’ 末端,而淬滅劑則在3’ 末端。當(dāng)完整的探針與目標(biāo)序列配對(duì)時(shí),熒光基團(tuán)發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進(jìn)行延伸反應(yīng)時(shí),聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進(jìn)行酶切,使得熒光基團(tuán)與淬滅劑分離。隨著擴(kuò)增循環(huán)數(shù)的增加,釋放出來的熒光基團(tuán)不斷積累。因此熒光強(qiáng)度與擴(kuò)增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系。相對(duì)于染料法,Taqman探針法具有更高的特異性和準(zhǔn)確性。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:Cy3, 乙二胺
貨號(hào):FSP008
產(chǎn)品規(guī)格:1 mg/5 mg
分類:熒光核酸試劑
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn):
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
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儲(chǔ)存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
操作程序:
產(chǎn)品僅用于科研由您提供該實(shí)驗(yàn)中目的基因的相關(guān)資料(如:基因名稱、序列等信息),我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線;
商定服務(wù)收費(fèi)、付款方式、服務(wù)期限等,并簽定技術(shù)服務(wù)合同。
有您提供實(shí)驗(yàn)所需的足夠量的實(shí)驗(yàn)樣本(100mg組織或107個(gè)細(xì)胞),本公司不接受您提供的RNA樣本PCR所需引物/探針(如果用探針法),可以由您自己提供,也可以委托本公司設(shè)計(jì)合成(費(fèi)用另計(jì))。如果由您自己提供,必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉,本公司不接受已溶解的引物/探針。
我們進(jìn)行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴(kuò)增、數(shù)據(jù)分析。
提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告,包括實(shí)驗(yàn)過程、所用儀器試劑、擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。
小鼠銅藍(lán)蛋白(CP/CER)分析檢測試劑盒Phospho-HSP27 (Ser82) (D1H2F6) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)100 ul
小鼠白介素28A(IL-28A)分析檢測試劑盒UCHL1 (D8R2I) XP® Rabbit mAb100 ul
人甲狀旁腺激素1-34(PTH 1-34)抗體分析檢測試劑盒Phospho-NDRG1 (Ser330) (D3A12) Rabbit mAb1 Kit
人基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)分析檢測試劑盒PhosphoPlus® HSP27 (Ser82) Antibody Duet100 ul
人基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)分析檢測試劑盒WIP1 (D4F7) Rabbit mAb100 ul
人肌細(xì)胞生成素(MYOG)分析檢測試劑盒IRF-3 (D6I4C) XP® Rabbit mAb20 ul
人肌紅蛋白(MYO/MB)分析檢測試劑盒IRF-3 (D6I4C) XP® Rabbit mAb300 ul
人饑餓激素(GHRL)分析檢測試劑盒SignalSilence® MDR1/ABCB1 siRNA II100 ul
人核糖體合成蛋白NSA2同源物(NSA2)分析檢測試劑盒PAI-1 (D9C4) Rabbit mAb100 ul
人核糖核酸酶核糖核酸酶A家族分析檢測試劑盒MDH2 (D8Q5S) Rabbit mAb100 ug
人果糖二磷酸醛縮酶A(ALDOA)分析檢測試劑盒Phospho-cdc25C (Ser216) Blocking Peptide100 ul
人過氧化氫酶(CAT)分析檢測試劑盒EWS Antibody100 ul
人甘露糖結(jié)合蛋白/甘露糖結(jié)合凝集素(MBP/MBL)分析檢測試劑盒NFI-C Antibody100 ul
人甘露聚糖結(jié)合凝集素絲氨酸肽1(MASP1)分析檢測試劑盒CHD4 (D8B12) Rabbit mAb100 ul
人二氫嘧啶酶樣2(DPYSL2)分析檢測試劑盒PC1/3 Antibody100 ul
人多肽YY(Peptide-YY)分析檢測試劑盒ENSA (D5Z1U) Rabbit mAb5 mg
人多免疫球蛋白受體(poly-IgR)分析檢測試劑盒Chelerythrine Chloride100 ul
Cy3, 乙二胺Bacillus│sp.凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)蛋白酶培養(yǎng)基: CM0002生長條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法;定期移植法
Botryosphaeria│ribis Grossenb. & Duggar分離基物: 楊樹干部斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 用于該菌種群遺傳學(xué)研究及與蘋果輪紋、干腐、楊梅和石榴流膠、獼猴桃腐爛等病菌系統(tǒng)學(xué)研究培養(yǎng)基: 14生長條件: 25存儲(chǔ)條件: 定期移植法
Fusarium│oxysporum凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25-28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Bacillus│pumilus分離基物: 海洋沉積物凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 524生長條件: 25℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
Hanseniaspora│uvarum凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0077生長條件: 28-30℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Helicostylum│piriforme凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 15-20℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
大西洋假交替單胞菌種屬: Pseudoalteromonas│atlantica凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 0223生長條件: 25℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Escherichia│sp.凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 分解培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Rhizobium│leguminosarum分離基物: 自豌豆根瘤分離凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 主要用于分類學(xué)研究培養(yǎng)基: 63生長條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法