PEG8000溶液公司正在銷售的產(chǎn)品：兔通用轉(zhuǎn)錄因子II B(GTF2B)試劑盒Anti-CAV2 Antibody(0108)腺苷酸環(huán)化酶激活肽-27/38抗體
兔煙酰腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶1(NOX1)試劑盒Anti-CAV3 Antibodyp19ARF抑癌基因抗體
兔載脂蛋白A2(ApoA2)試劑盒 Anti-Caveolin-2/CAV2 Antibodyp21蛋白抗體
兔α-胞襯蛋白

產(chǎn)品分類：細(xì)胞培養(yǎng)

儲存條件  4℃,6個(gè)月

用途  聚乙二醇誘導(dǎo)細(xì)胞融合，可用作融合劑,以獲得單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞,誘導(dǎo)細(xì)胞雜交

注意事項(xiàng)  無菌溶液,由DPBS(pH7.4)和PEG8000或稱聚乙二醇8000組成,經(jīng)無菌處理。體外培養(yǎng)的單層貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞均可以做融合，但成功概率較大的是單層貼壁細(xì)胞。

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購！

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計(jì)算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗(yàn)證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)PⅢNP ELISA Kitβ分泌抗體包裝5g

Ⅲ型前膠原基端肽(PⅢNT)PⅢNT ELISA Kit相關(guān)死亡促進(jìn)因子Bad抗體包裝100ml

Ⅲ型前膠原(HPCⅢ)HPCⅢ ELISA KitBax包裝25ml

Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)Col Ⅲ ELISA Kit程序性死亡配體2抗體包裝500ml

Ⅱ型膠原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)HELIX-Ⅱ ELISA Kit膽汁鹽輸出泵/ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白11抗體包裝1g

Ⅱ型膠原C端肽(CTX-Ⅱ)CTX-Ⅱ ELISA Kitβ2微球蛋白抗體(單抗)包裝1g

Ⅱ型膠原(ColⅡ)ColⅡ ELISA Kit骨/軟骨蛋白多糖1抗體包裝5g

Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)Col Ⅱ ELISA Kit染色體相關(guān)蛋白CAP抗體包裝1g

Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)PⅠCP ELISA KitBcl-2同源結(jié)構(gòu)域樣蛋白1抗體包裝250mg

Ⅰ型前膠原N端前肽(PⅠNP)PⅠNP ELISA KitBcl2相關(guān)抗凋亡基因6抗體包裝10g

Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)CⅠCP ELISA Kit半乳糖轉(zhuǎn)移7亞基β1,4抗體包裝50g

Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)ⅠCTP ELISA KitBEN結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體包裝100g

Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)NTX ELISA Kit巴德-畢德氏綜合征蛋白BBS5抗體包裝25g

Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)CTX-Ⅰ ELISA Kit癌相關(guān)蛋白1抗體包裝500g

Ⅰ型膠原(ColⅠ)ColⅠ ELISA Kit腦蛋白CG6抗體包裝1g

膽汁結(jié)合蛋白DDH2抗體促狀腺胚胎因子(TEF)PX-478 是有抗癌活性的缺氧誘導(dǎo)因子-1α (HIF-1α) 抑制劑，對一些癌系 IC50 為 20-30 μM。
PEG8000溶液ELAVL1/HuR/FITC  熒光標(biāo)記ELAVL1IgG納銅粉 99.9% metals basis,80-0nm

Elastin/Gold  金標(biāo)記抗彈性蛋白IgG鈷 99.5%，300目

ELK1/FITC  熒光標(biāo)記轉(zhuǎn)錄因子ELK1IgG鎳 AR,99.5%

Endo G /FITC  熒光標(biāo)記核內(nèi)切GIgG不銹鋼粉 200目

Phospho-ELk1 (Ser383) /FITC  熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化轉(zhuǎn)錄因子ELK1IgG不銹鋼粉 200目

Emp1/FITC  熒光標(biāo)記表皮膜蛋白1IgG不銹鋼粉 200目

Endostatin/FITC  熒光標(biāo)記內(nèi)皮抑/內(nèi)皮他丁IgG敵草隆 ，99.5%

envelope glycoprotein Yellow fever virus/FITC  熒光標(biāo)記抗黃熱病包膜糖蛋白IgG敵草隆 99%