詳細(xì)介紹
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗(yàn)、研究實(shí)驗(yàn)、教學(xué)實(shí)驗(yàn)、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,產(chǎn)品品質(zhì),價(jià)格實(shí)惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。
產(chǎn)品名稱 | 蛋白激酶AKT1,2,3抗體 |
英文名稱 | AKT1+2+3 |
規(guī)格 | 0.1ml |
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抗體制備過(guò)程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無(wú)菌采制)
抗體的制備過(guò)程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見(jiàn)偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
奧氮平標(biāo)準(zhǔn)品Rat HbA1c ELISA Kit純度:0.95
鄰代馬尿標(biāo)準(zhǔn)品Rat HbA1c ELISA Kit純度:100μg/mL
鄰-他標(biāo)準(zhǔn)品Rat carbonic anhydrase ELISA Kit純度:0.999
氧沙星標(biāo)準(zhǔn)品Rat carbonic anhydrase ELISA Kit純度:0.999
辛基十二標(biāo)準(zhǔn)品Rat MD2 ELISA Kit純度:0.98
辛聚糖標(biāo)準(zhǔn)品Rat MBP ELISA Kit純度:0.999
奧克立林標(biāo)準(zhǔn)品Rat MBP ELISA Kit純度:0.999
Porcine intercellular adhesion molecule 2,ICAM-2 ELISA Kit豬細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA試劑盒進(jìn)口/分裝規(guī)格:96T/48T121551-200902TLC法鑒別葛根(野葛)規(guī)格:1.0g
Porcine intercellular adhesion molecule 3,ICAM-3 ELISA Kit豬細(xì)胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA試劑盒進(jìn)口/原裝規(guī)格:96T/48T121552-200501TLC法鑒別地錦草(斑地錦)規(guī)格:1.0g
Porcine plasmigen activator inhibitor 1,PAI-1 ELISA Kit豬纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA試劑盒*規(guī)格:96T/48T121553-TLC法鑒別黃精(制)規(guī)格:10g
Porcine plasmigen activator inhibitor,PAI ELISA Kit豬纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA試劑盒*規(guī)格:96T/48T121554-200702TLC法鑒別苦杏仁(東北杏)規(guī)格:2.5g
Porcine Fibrigen Degradation Product,FDP ELISA Kit豬血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA試劑盒進(jìn)口/分裝規(guī)格:96T/48T121555-TLC法鑒別茵陳(茵陳蒿)規(guī)格:
Porcine thrombomodulin,TM ELISA Kit豬血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISA試劑盒進(jìn)口/原裝規(guī)格:96T/48T121556-200701TLC法鑒別橘葉規(guī)格:3.0g
蛋白激酶AKT1,2,3抗體human Prostaglandin D2-methoxime,PGD2-MOX 檢測(cè)試劑盒 甲肟前列腺素D2* 規(guī)格: 48T/96T
Human Proinsulin,PI 檢測(cè)試劑盒 胰島素原* 規(guī)格: 48T/96T
Human preptin 檢測(cè)試劑盒 preptin* 規(guī)格: 48T/96T
Human Poly Serium Antigen,PHSA 檢測(cè)試劑盒 多聚血清蛋白* 規(guī)格: 48T/96T
Human podocin 檢測(cè)試劑盒 Podocin* 規(guī)格: 48T/96T
Human plaet-derived growth factor,PDGF 檢測(cè)試劑盒 血小板衍生生長(zhǎng)因子* 規(guī)格: 48T/96T
Human plaet membrane glycoprotein II b III a,GP- II b III a 檢測(cè)試劑盒 血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa* 規(guī)格: 48T/96T
抗體的制備過(guò)程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見(jiàn)偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物:常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無(wú)載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過(guò)濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見(jiàn)。