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Gey's紅細(xì)胞裂解液

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更新時(shí)間:2022-07-04 14:31:25瀏覽次數(shù):239

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100ml
貨號(hào) FS-R6507 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研 貨號(hào) FS-R6507
Gey's紅細(xì)胞裂解液公司正在銷售的產(chǎn)品:兔生長(zhǎng)分化因子11(GDF11)試劑盒Anti-FABP2 AntibodyRad52抗體
兔膜橋蛋白(Ponticulin)試劑盒 Anti-FABP1 Antibody(0644)環(huán)指蛋白150抗體
兔血管緊張素II (ANG II)試劑盒 Anti-FABP2 AntibodyT特異性趨化因子抗體
兔蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶(PDI)試劑盒Anti-FAB

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品分類:細(xì)胞組分分離

儲(chǔ)存條件:4℃,12個(gè)月

用途:溶紅細(xì)胞,紅細(xì)胞裂解液

注意事項(xiàng):無菌溶液。主要由氯化銨、葡萄糖、氯化鎂、碳酸氫鈉等組成。注意無菌操作,經(jīng)過濾除菌處理。

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn),咨詢并訂購!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號(hào)

Gey's紅細(xì)胞裂解液

100ml

FS-R6507

 

63.jpg 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理:

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因;

EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。

配制步驟:

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標(biāo)線,搖勻。

13.jpg 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定:

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制:精密量取腦對(duì)照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱;柱溫120℃;進(jìn)樣口溫度250℃;檢測(cè)器溫度250℃;分流進(jìn)樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法:配制的對(duì)照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液,三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來,保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過2.0%,驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

使用方法:

1.  常用篩選濃度

注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,培養(yǎng)基,生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,來確定最佳篩選濃度。

一般而言,哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來實(shí)現(xiàn),至少選擇5個(gè)濃度。

1)  第一天:未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對(duì)于需要更高密度來檢測(cè)活力的細(xì)胞,可增加接種量。

2)  根據(jù)細(xì)胞類型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3)  第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4)  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5)  按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1)  轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。

注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密,其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2)  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3)  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克隆(集落)的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,這取決于宿主細(xì)胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。

4)   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5)   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

D-半乳糖(標(biāo)準(zhǔn)品) TeniposideB和T淋巴衰減蛋白抗體包裝5g

D-(標(biāo)準(zhǔn)品) TeniposideCD4抗體包裝150

D-甘露糖(標(biāo)準(zhǔn)品) Tenofovir disoproxil fumarateCD44抗體包裝2050

D-核糖(標(biāo)準(zhǔn)品) Tenofovir/Tenofovir disoproxil fumarate白共同抗原抗體包裝580

D-環(huán)絲(標(biāo)準(zhǔn)品) TenoxicamCD5抗體包裝5g

D-焦谷(標(biāo)準(zhǔn)品) Terbinafine 間粘附分子-1抗體包裝25g

D-木糖(標(biāo)準(zhǔn)品) Terbinafine 神經(jīng)粘附分子1抗體包裝5g

D-絲(標(biāo)準(zhǔn)品) Terbinafine HClL選擇抗體包裝25g

Deoxycorticosterone acetate... Terbinafine HClCD68抗體包裝5g

Dexamethasone Acetate(標(biāo)準(zhǔn)品) Teriparatide acetate/Human PTH(1-34)6號(hào)染色體開放閱讀框226抗體包裝100g

Dexamethasone Sodium Phosph... Terlipressin Acetate間隙連接蛋白30抗體包裝25g

Dexamethasone(標(biāo)準(zhǔn)品) Thiamphenicol2號(hào)染色體開放閱讀框69抗體包裝25g

Diethylstilbestrol(標(biāo)準(zhǔn)品) Thiamphenicol3號(hào)染色體開放閱讀框18抗體包裝5g

DL-精(標(biāo)準(zhǔn)品) Thymopentin Acetate巨噬炎癥因子1β /MIP-1β抗體包裝1g

Donepezil HCl type III(標(biāo)準(zhǔn)品) Tiagabine HCl外基質(zhì)金屬蛋白誘導(dǎo)因子抗體包裝5g

結(jié)核分枝桿菌Mycobacterium│tuberculosis 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR,可用于培養(yǎng)血吸蟲試劑盒熊果乙酯;Acetylursolic

威斯不動(dòng)桿菌Acinetobacter│venetianus 質(zhì)量規(guī)格:≥675 U/mg,USP28血栓B2試劑盒細(xì)辛;2,4,5-Trimethoxy

大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定血栓A2合成試劑盒香葉;Geraniol
Gey's紅細(xì)胞裂解液Phospho-MKK7 (Ser271/Thr275) /FITC  熒光標(biāo)記化絲裂原活化蛋白激MKK7IgG正十六烷  >99.0% (GC)

MKP-1/DUSP1/FITC  熒光標(biāo)記絲裂原活化蛋白激-1IgG十八烷 AR,98%

Phospho-MKP1 (Ser359)/FITC  熒光標(biāo)記化絲裂原活化蛋白激-1IgG5- 98%

Phospho-MKP1 (Ser296 + Ser318)/FITC  熒光標(biāo)記化絲裂原活化蛋白激-1IgG3,5-二溴 98%

MKP-2/DUSP4/FITC  熒光標(biāo)記絲裂原活化蛋白激-2IgG3,5-二 98%

MLK3 /FITC  熒光標(biāo)記絲氨/蘇氨蛋白激MLK3IgG三化 CP(劇品)

Phospho-MLK3 (Thr277/Ser281)/FITC  熒光標(biāo)記化絲氨/蘇氨蛋白激MLK3IgG三化 AR,99.00%(劇品)

MLCK/FITC  熒光標(biāo)記肌球蛋白輕鏈激IgG叔丁鈉 98%


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