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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>滴定緩沖溶液>>細(xì)胞培養(yǎng)>>無菌超純水

無菌超純水

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更新時(shí)間:2022-07-04 11:37:31瀏覽次數(shù):222

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100ml
貨號(hào) FS-R6379 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研 貨號(hào) FS-R6379
無菌超純水公司正在銷售的產(chǎn)品:兔纖維蛋白原(FBG)試劑盒Anti-C5 Antibody磷酸化樁蛋白Paxillin抗體
兔組織多肽特異性抗原(TPS)試劑盒 Anti-C7 Antibody磷酸化樁蛋白Paxillin抗體
兔組織因子途徑抑制因子2(TFPI2)試劑盒Anti-C9 Antibody磷酸化樁蛋白Paxillin抗體
兔血小板衍生生長因子BB(PDGF-BB)試劑盒Anti-C9

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品分類:細(xì)胞培養(yǎng)

儲(chǔ)存條件  室溫,12個(gè)月

用途  可用于細(xì)胞培養(yǎng)和PCR等試驗(yàn)

注意事項(xiàng)  無菌超純水經(jīng)去離子處理后,經(jīng)微孔濾膜過濾,再經(jīng)高壓滅菌處理,不含細(xì)菌,幾乎不含金屬離子

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點(diǎn),咨詢并訂購!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號(hào)

無菌超純水

100ml

FS-R6379

 

63.jpg 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理:

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因;

EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。

配制步驟:

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標(biāo)線,搖勻。

13.jpg 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定:

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制:精密量取腦對(duì)照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱;柱溫120℃;進(jìn)樣口溫度250℃;檢測(cè)器溫度250℃;分流進(jìn)樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法:配制的對(duì)照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液,三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來,保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過2.0%,驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

使用方法:

1.  常用篩選濃度

注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細(xì)胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,來確定最佳篩選濃度。

一般而言,哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來實(shí)現(xiàn),至少選擇5個(gè)濃度。

1)  第一天:未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對(duì)于需要更高密度來檢測(cè)活力的細(xì)胞,可增加接種量。

2)  根據(jù)細(xì)胞類型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3)  第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4)  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5)  按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1)  轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。

注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密,其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2)  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3)  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,這取決于宿主細(xì)胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。

4)   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5)   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

白介2可溶性受體α鏈(sIL-2Rα/CD25)sIL-2Rα/CD25 ELISA Kit通道蛋白5抗體包裝1g

白介29(IL-29)IL-29 ELISA Kitβ淀粉樣肽(1-40)抗體包裝5g

白介28A(IL-28A)IL-28A ELISA Kitβ淀粉樣肽(1-42)抗體包裝1g

白介28(IL-28)IL-28 ELISA Kit載脂蛋白A1抗體包裝25g

白介27(IL-27)IL-27 ELISA Kitβ-抑制蛋白1抗體包裝5g

白介27(IL-27)IL-27 ELISA Kit錨定蛋白B抗體包裝500g

白介25(IL25/C19orf10)IL25/C19orf10 ELISA Kit銅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白質(zhì)α鏈抗體包裝1g

白介23(IL-23)IL-23 ELISA Kit單克/抗體包裝5g

白介23(IL-23)IL-23 ELISA KitASMTL蛋白抗體包裝10MG

白介22(IL-22)IL-22 ELISA Kit激受體相關(guān)蛋白16抗體包裝1g

白介2(IL-2)IL-2 ELISA Kitβ淀粉樣肽1-40 C端/Aβ1-40 C端抗體包裝5g

白介2(IL-2)IL-2 ELISA Kit含錨蛋白重復(fù)序列-因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族13抗體包裝25g

白介1受體相關(guān)激1(IRAK1)IRAK1 ELISA Kitβ淀粉樣肽(31-35)/Aβ 31-35 抗體包裝100g

白介1受體拮抗劑(IL1Ra/CD121)IL1Ra/CD121 ELISA Kitβ淀粉樣肽 1-40(C端)抗體包裝25g

白介1受體拮抗劑(IL1Ra)IL1Ra ELISA Kitβ-抑制蛋白2抗體/β休止蛋白2/β-arrestin抗體包裝5g

膜粘連蛋白13抗體基質(zhì)金屬蛋白10(MMP10)AG-18 inhibits EGFR with IC50 of 35 μM.
無菌超純水DHAV/FITC  鴨型肝炎A病IgG2,6-二氧苯 98%

DIO2/FITC  熒光標(biāo)記脫2IgG2,5-二羥苯酯 98%

DISC1(CT)/FITC  熒光標(biāo)記DISC1 C端IgG5-氧水楊 98%

DISC1(NT)/FITC  熒光標(biāo)記DISC1 N端IgG6-氧水楊 98%

DJ-1/FITC  熒光標(biāo)記絲裂原依賴性癌因蛋白IgG羥纖維 USP級(jí)

DKK1/FITC  熒光標(biāo)記抑癌蛋白DKK1IgG羥纖維 3400~5000mpa.s,25℃

DKK3/FITC  熒光標(biāo)記抑癌蛋白DKK3IgG羥纖維 250~450mpa.s,25℃

KMT6/EZH2/FITC  熒光標(biāo)記抑癌蛋白EZH2IgG羥纖維 00~1500mpa.s,25℃


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