Krebs-Ringer粉劑公司正在出售的產(chǎn)品：豚鼠胰多肽(PP)試劑盒 Anti-IL23A Antibody脫中胚蛋白抗體
豚鼠脂蛋白關聯(lián)磷脂酶A2(LpPLA2)試劑盒Anti-IL23A Antibody生長抑制基因1蛋白抗體
豚鼠胰蛋白酶原激活肽(TAP)試劑盒Anti-IL23R Antibody甲狀腺素T4抗體
豚鼠酮酸脫氫酶E1(PDH E1)試劑盒Anti-IL25 Antibo

產(chǎn)品分類：細胞其他

儲存條件：4℃,12個月

用途：又稱KREBS-RINGER BICARBONATE BUFFER。不含碳酸氫鈉。作用類似于Ringer液，用于動物離體實驗,肌體灌流、清洗組織，并維持離體組織的正常生理功能。

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點，咨詢并訂購！

 

 

 

配制與標定的實驗原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑，基準試劑的預處理：稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標線，搖勻。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應不低于10000。

4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應曲線）來實現(xiàn)，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細胞類型，設定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

5-羥色鹽鹽（標準品） Potassium bicarbonate轉(zhuǎn)錄因子E2F-2抗體包裝500g

6'''-阿魏酰斯皮諾 Sodium dodecanesulfonate內(nèi)皮受體蛋白酪激抗體包裝250mg

6''-O-二?；玖夏拒?Theophylline酪蛋白激受體B2抗體包裝1g

6''-二沙苑子苷單酯 Cellulase磷化雌激受體ER alpha 抗體包裝5g

6'-O-β-D-葡萄糖基龍膽苦苷 Chondroitin sulfate重組增強型綠色熒光蛋白抗體包裝25ml

6'-O-β-D-芹糖獐芽菜苷 Isonicotinic acid雌激受體α抗體（用于western blot）包裝5ml

6,7,4'-三羥基異黃 L-Malic acid雌激受體α/β抗體包裝25g

6-氧基二氫血根堿 Proteinase K Solution, 20 mg/ml自分泌運動因子抗體包裝5g

6-氧基山柰-3-O-蕓香糖苷 Poly-L-lysine solution ( 0.1%)酪蛋白激A3受體抗體包裝100ml

6-姜(姜辣) Tetracycline hydrochloride solution, 50 mg/ml, sterileEHM2蛋白抗體包裝1g

6-姜烯（標準品） D-Glucose-6-phosphate, disodium, dihydrate磷化真核翻譯起始因子4E抗體包裝1g

6-羥基(標準品) Sodium succinate翻譯延伸因子EF-1a抗體包裝5g

6-基異麥冬黃烷A(標準品) Hemoglobin磷化雌激受體α抗體包裝1g

7,4'-二羥基黃（標準品） PEG 10000磷化表皮生長因子受體抗體包裝1g

7,8-二氫生物蝶呤 DL-Malic acid磷化絲裂原活化蛋白激1抗體包裝5g

JCM3170=ATCC27875=CBS420.74=CECT3304=DSM4資源名稱: 披發(fā)糖多孢菌披發(fā)亞種 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品髓性核分化抗原試劑盒肉豆蔻;Myristicin

瓦克青霉Penicillium│waksmanii 質(zhì)量規(guī)格：純度大于99%,R構(gòu)型髓系觸發(fā)受體-1試劑盒忍冬苷;Lonicerin

ATCCBAA-482=CCM7143=CIP106688=DSM15638=NC資源名稱: 低溫乳桿菌 質(zhì)量規(guī)格：>99%髓鞘相關糖蛋白抗體試劑盒日蟾蜍他靈;Gamabufotalin
Krebs-Ringer粉劑SPHK2/FITC  熒光標記鞘氨激2IgG

Spindlin 1/SPIN-2/FITC  熒光標記Spindlin 1/SPIN-2 腫瘤形成相關因IgG

SPY /FITC  熒光標記抗spindlyIgG

SRC /FITC  熒光標記整合樣金屬蛋白與凝血1型-7IgG

phospho-Src (Tyr418)/FITC   熒光標記化Src原癌因IgG

SREBP-1/FITC  熒光標記膽固調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1IgG

SREBP-2/FITC  熒光標記膽固調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白2IgG

SRF/FITC  熒光標記血清應答因子IgG