產(chǎn)品簡(jiǎn)介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
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貨號(hào) | A01X2202 | 主要用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
組織來源 | 正常腦組織 | 種屬來源 | 兔 |
生長(zhǎng)特性 | 半貼壁半懸浮 | 細(xì)胞形態(tài) | 集落,克隆球狀 |
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司 |
—— 銷售熱線 ——
18201748966 |
參考價(jià) | ¥7750 |
5×10^5 | 7750元 | 15 瓶 可售 |
更新時(shí)間:2024-01-29 15:48:09瀏覽次數(shù):319
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
---|---|---|---|
貨號(hào) | A01X2202 | 主要用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
組織來源 | 正常腦組織 | 種屬來源 | 兔 |
生長(zhǎng)特性 | 半貼壁半懸浮 | 細(xì)胞形態(tài) | 集落,克隆球狀 |
一、細(xì)胞基本屬性:
細(xì)胞名稱 | 兔神經(jīng)干細(xì)胞 | 商品貨號(hào) | A01X2202 |
組織來源 | 正常腦組織 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
種屬來源 | 兔 | 傳代特性 | 根據(jù)細(xì)胞特性 |
生長(zhǎng)特性 | 半貼壁半懸浮 | 細(xì)胞形態(tài) | 集落,克隆球狀 |
包被條件:
培養(yǎng)基:原代神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)體系
換液頻率:每2-3天換液一次
傳代比例:
消化液:0.25%胰蛋bai酶
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介 |
神經(jīng)干細(xì)胞是存在于哺乳動(dòng)物體內(nèi)的一種具有多向分化潛能和自我更新能力的細(xì)胞,能分化為神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞,其在神經(jīng)系統(tǒng)疾病中的替代治療前景廣闊。 |
原代細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟:
一、取7-10d雄性SD大鼠,頸椎脫臼處死,浸泡于75%乙醇消毒3-5min。
二、在超凈工作臺(tái)中,將大鼠斷頭置于玻璃培養(yǎng)皿中,打開顱腔后取出全腦,放在盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中,去除小腦和間腦。
三、將大腦半球在干濾紙上緩慢滾動(dòng)以去除軟腦膜和腦膜大血管,再放在新的盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中。
四、用細(xì)解剖鑷去除大腦白質(zhì)、殘余大血管和軟腦膜,保留大腦皮質(zhì)。
五、大腦皮質(zhì)放于DMEM中,剪碎成約1mm3大小,放入50ml的離心管中,加入混合酶液I(0.05-0 .1%II型膠原酶,0 .025-0 .05%IV型膠原酶,200-400U DNaseI),混勻后37℃水浴消化1-1.5h。
六、室溫1 000×g離心8min,去上清液。
七、沉淀中加入20%BSA重懸浮,充分混勻,1 000×g,20min,4℃離心,去上清。
八、沉淀加入4ml混合酶液II( 0.05-0.1%的膠原酶/分散酶,0.05-0.1%I型膠原酶,100-300U DNaseI )重懸浮,混勻,37℃水浴消化0.5-1h,700×g室溫離心6min,去上清液。
九、沉淀加入2ml DMEM培養(yǎng)液懸浮混勻,鋪于經(jīng)離心形成連續(xù)梯度的12ml 50%Percoll(25 000×g,60min,4℃),1000×g,4℃離心10min。
十、靠近底部的紅細(xì)胞層之上的白黃色的層面即為純化的微血管段,吸出后DMEM
漂洗兩次(離心1000×rpm,6min,室溫),去上清液。
加入DMEM培養(yǎng)液(20%FBS,4ug/ml嘌呤霉素 )重懸浮,接種于含5%的大鼠 血清37℃孵育過夜所制備的細(xì)胞培養(yǎng)皿中,置于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)24h后更換不含嘌呤霉素的混合培養(yǎng)基,隨后隔天換液。
原代細(xì)胞使用方法:
是一種半貼壁半懸浮細(xì)胞,細(xì)胞形態(tài)呈集落,克隆球狀,在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下,細(xì)胞可傳2-3代;建議您收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)。
客戶收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 貼壁細(xì)胞消化
1)吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后,吸出多余消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml培養(yǎng)基終止消化;
3)用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);
4)待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基。
3. 細(xì)胞收貨脫落
1)收集所有細(xì)胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀;
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min);消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化;
3)經(jīng)1000rpm,離心5min,丟棄上清,用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi);
4)待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱)。
5)原瓶?jī)?nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。
4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
因原代細(xì)胞貼壁特殊性,貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時(shí),需要對(duì)實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被,以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性,避免細(xì)胞因沒貼好影響實(shí)驗(yàn);包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小菊頭蝠肌肉成纖維樣細(xì)胞;LHBM4
獼猴皮膚細(xì)胞;MMS4
獼猴肺細(xì)胞;MML2
獼猴肌肉細(xì)胞;MMm7
荷蘭黑白花奶牛牛肺細(xì)胞;DCL1
獼猴皮膚細(xì)胞;MMS7
雪羊皮膚細(xì)胞;SSHS1
白牦牛皮膚細(xì)胞;Yak-2
抗人轉(zhuǎn)鐵蛋白單抗雜交瘤細(xì)胞;Ferritin-1
盤羊皮膚細(xì)胞;ASHS3
山羊皮膚細(xì)胞;WGS1
抗人肝癌單抗HAb18雜交瘤細(xì)胞;HAb18
絨鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞;LOVS2
抗人肝癌單抗F11雜交瘤細(xì)胞;F11
盤羊皮膚細(xì)胞;ASHS2
Plate Count Agar
四號(hào)瓊脂
No.4 Agar Base
CC瓊脂添加劑
CC Agar Supplement
纖維二糖-多粘菌素E(CC)瓊脂
Cellobiose-polymyxin E Agar
酸雙水解酶試驗(yàn)用培養(yǎng)基(AD)
Aaginine dehydrolase Medium
嗜鹽性試驗(yàn)用胰胨水
兔神經(jīng)干細(xì)胞Halophilic experimental medium
副溶血性弧菌成套生化鑒定管(HRGB)
革蘭氏染色液
Gram Staining
Voges-Proskauer(V-P)試劑盒