詳細(xì)介紹
探針?lè)ǎ?/font>
aqMan 探針是一種寡核苷酸探針,它的熒光與目的序列的擴(kuò)增相關(guān)。它與目標(biāo)序列上游引物和下游引物之間的序列配對(duì)。熒光基團(tuán)連接在探針的5’ 末端,而淬滅劑則在3’ 末端。當(dāng)完整的探針與目標(biāo)序列配對(duì)時(shí),熒光基團(tuán)發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進(jìn)行延伸反應(yīng)時(shí),聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進(jìn)行酶切,使得熒光基團(tuán)與淬滅劑分離。隨著擴(kuò)增循環(huán)數(shù)的增加,釋放出來(lái)的熒光基團(tuán)不斷積累。因此熒光強(qiáng)度與擴(kuò)增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系。相對(duì)于染料法,Taqman探針?lè)ň哂懈叩奶禺愋院蜏?zhǔn)確性。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱(chēng):6-TAMRA尸胺
貨號(hào):FSP145
產(chǎn)品規(guī)格:5 mg
分類(lèi):熒光核酸試劑
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。
產(chǎn)品特點(diǎn):
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏 PCR檢測(cè)試劑盒 。
儲(chǔ)存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線(xiàn)放線(xiàn)桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
操作程序:
產(chǎn)品僅用于科研由您提供該實(shí)驗(yàn)中目的基因的相關(guān)資料(如:基因名稱(chēng)、序列等信息),我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線(xiàn);
商定服務(wù)收費(fèi)、付款方式、服務(wù)期限等,并簽定技術(shù)服務(wù)合同。
有您提供實(shí)驗(yàn)所需的足夠量的實(shí)驗(yàn)樣本(100mg組織或107個(gè)細(xì)胞),本公司不接受您提供的RNA樣本PCR所需引物/探針(如果用探針?lè)ǎ梢杂赡约禾峁?,也可以委托本公司設(shè)計(jì)合成(費(fèi)用另計(jì))。如果由您自己提供,必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉,本公司不接受已溶解的引物/探針。
我們進(jìn)行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴(kuò)增、數(shù)據(jù)分析。
提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告,包括實(shí)驗(yàn)過(guò)程、所用儀器試劑、擴(kuò)增曲線(xiàn)、標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。
BOC-L-脯氨醇保存PYY (D1K3Q)Rabbit mAb (Mouse Specific)100 ul
BOC-D-甘氨酸保存Ambra1 Antibody100 ul
CBZ-D-脯氨酸價(jià)格eIF4A1 Antibody20 ul
DL-鄰氯甘氨酸實(shí)驗(yàn)步驟eIF4A1 Antibody100 ul
SDS-PAGE蛋白質(zhì)低分子量標(biāo)準(zhǔn)保存Phospho-IRS-1 (Ser302) (34C7) Rabbit mAb100 ul
DEAE葡聚糖凝膠A-25價(jià)格MAVS (D5A9E) Rabbit mAb100 ul
肝素瓊脂糖凝膠CL-6B價(jià)格SirT1 (D739) Antibody100 ul
透析袋17實(shí)驗(yàn)步驟MALT1 Antibody100 ul
單道定時(shí)鐘實(shí)驗(yàn)步驟NF-κB1 p105/p50 (D4P4D) Rabbit mAb (PE Conjugate)100 ul
α-淀粉酶(枯草桿菌)價(jià)格NCBP1/CBP80 (D7Z2Z) Rabbit mAb100 ul
還原輔酶Ⅱ四鈉鹽價(jià)格SirT1 (C14H4) Rabbit mAb20 ul
小麥胚芽粉使用說(shuō)明書(shū)SirT1 (C14H4) Rabbit mAb100 ul
變色酸保存LRRC8A/SWELL1 Antibody100 ul
麗春紅S保存FoxO3a (75D8) Rabbit mAb100 ul
硝基氯化四氮唑藍(lán)使用說(shuō)明書(shū)eIF4G Antibody100 ul
靛藍(lán)保存FoxO4 (55D4) Rabbit mAb100 ul
天青I價(jià)格Phospho-SF3B1 (Thr313) (D8D8V) Rabbit mAb100 ul
6-TAMRA尸胺熱帶假絲酵母種屬: Candida│tropicalis凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 13生長(zhǎng)條件: 25-28℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
Lactobacillus│sp.凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 6生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 定期移植法
Trichothecium│roseum斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長(zhǎng)條件: 26℃
Paecilomyces tenuipes凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長(zhǎng)條件: 27℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Escherichia│coli分離基物: 種鴨大腸斜面培養(yǎng)物;凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 動(dòng)物疫苗研究培養(yǎng)基: 2生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Rhodococcus│yunnanensis分離基物: 沉積物/表層沉積物斜面培養(yǎng)物模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 微生物/耐冷菌培養(yǎng)基: 471生長(zhǎng)條件: 15℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Micromonospora│sp.斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 代謝產(chǎn)物具有抗真菌活性。培養(yǎng)基: 0027生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;礦物油法;定期移植法
曲霉種屬: Aspergillus│sp.分離基物: 土壤凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長(zhǎng)條件: 25℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
百日咳博德特氏菌種屬: Bordela│pertussis凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0119生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法