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人真皮成纖維細胞

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    上海市

規(guī)格
5×10^57010元15 瓶 可售
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更新時間:2024-01-31 09:54:19瀏覽次數(shù):344

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
貨號 A01X1400 主要用途 僅供科研研究實驗
組織來源 皮膚組織 種屬來源
生長特性 貼壁 細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
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詳細介紹

原代細胞培養(yǎng):

原代細胞(Primary cells):是指直接從機體取出的組織或細胞獲得單個細胞并在體外進行培養(yǎng)的細胞。這里的組織主要指:組織器官、外周血及胚胎等。

原代細胞培養(yǎng):由于原代細胞生長緩慢,繁殖一定的代數(shù)停止生長(一般10代以內(nèi))。所以一般認為:培養(yǎng)的原代的第1和傳代到第10代以內(nèi)的細胞統(tǒng)稱為原代細胞培養(yǎng)。

公司產(chǎn)品僅供科研研究實驗

一、細胞基本屬性

細胞名稱

人真皮成纖維細胞

組織來源

皮膚組織

商品貨號

A01X1400

種屬來源

產(chǎn)品規(guī)格

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

細胞簡介

人真皮成纖維細胞分離自皮膚組織內(nèi)的真皮層;皮膚組織來源包括頭部、臉部、手、腳、腿、背部、腹部、包皮等體表部位皮膚,可依據(jù)需求選用;真皮,位于表皮深層,向下與皮下組織相連,真皮結(jié)締組織的膠原纖維和彈性纖維互相交織在一起,埋于基質(zhì)內(nèi)。其內(nèi)分布著各種結(jié)締組織細胞和大量的膠原纖維彈性纖維,使皮膚既有彈性,又有韌性。其由兩層組成——乳頭層與網(wǎng)狀層。真皮的結(jié)構(gòu)組成是膠原蛋白、彈性纖維以及基質(zhì)。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的真皮成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細胞基本貼壁wan全,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質(zhì)透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。真皮成纖維細胞在生理條件下的主要功能包括:構(gòu)造和維持組織的正常形態(tài),合成和釋放細胞外基質(zhì)以及組織損傷后及時大量聚集修復損傷組織。

包被條件


培養(yǎng)基

FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率

2-3天換液一次

生長特性

貼壁

細胞形態(tài)

成纖維細胞樣

傳代特性

可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)良好

消化液

0.25%胰蛋bai酶

培養(yǎng)條件

氣相:空氣,95%;CO2,5%

8.jpg

6.jpg



具體步驟:

1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;

2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;

3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);

4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;

5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞,收集;

6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
注意事項:

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。

3. 傳代培養(yǎng)過程中,消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。

4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和技術(shù)部溝通。

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