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公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
原釩酸鈉溶液 | 10ml | FS-R7522 |
產(chǎn)品分類:酶抑制劑
儲存條件:—20℃,36個月
用途:廣譜酪an酸磷酸酶抑制劑,又稱正釩酸鈉
注意事項:無色溶液。工作濃度,0.1-1mmol/L。
配制與標(biāo)定的實驗原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標(biāo)線,搖勻。
實驗方法與判定:
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應(yīng)不低于10000。
4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。
楊盤二孢菌*RhoA抗體Anti-DYRK1A Antibody原鈣黏8(PCDH8)
葡萄汁有孢漢遜酵母Rho相關(guān)蛋白激2抗體Anti-DVL3 Antibody原鈣黏7(PCDH7)
河生萊略特氏菌信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子4抗體Anti-E2F1 Antibody原鈣黏24(PCDH24)
彎曲假單胞菌活性氧簇ROS抗體Anti-E2F2 Antibody原鈣黏22(PCDH22)
擬可可毛球二孢磷化遷移誘導(dǎo)因子5抗體Anti-E2F3 Antibody原鈣黏21(PCDH21)
皮狀假絲酵母磷化核轉(zhuǎn)錄因子NFKB-RelB蛋白抗體Anti-E2F2 Antibody原鈣黏20(PCDH20)
空腸彎曲桿菌磷化Ras相關(guān)GTP結(jié)合蛋白抗體Anti-E2F3 Antibody原鈣黏19(PCDH19)
冷解糖芽孢桿菌轉(zhuǎn)錄因子RelB蛋白抗體Anti-E2F4 Antibody(PB1113)原鈣黏18(PCDH18)
異常漢遜酵母復(fù)制因子A蛋白2Anti-E2F4 Antibody原鈣黏17(PCDH17)
鏈霉菌磷化復(fù)制因子A蛋白2抗體Anti-EAAT3/SLC1A1 Antibody原鈣黏15(PCDH15)
雞傳染性法氏囊病陽性血清 Ras相關(guān)GTP結(jié)合蛋白抗體Anti-E2F6 Antibody原鈣黏12(PCDH12)
蕈狀芽孢桿菌磷化ras基因相關(guān)蛋白Rab24抗體Anti-E2F5 Antibody原鈣黏11(PCDH11)
塔賓曲霉磷化ras基因相關(guān)蛋白Rab24抗體Anti-EAPP Antibody原鈣黏10(PCDH10)
土生類諾氏菌磷化G蛋白信號轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子19抗體Anti-ECI1 Antibody原卟啉原氧化(PPOX)
釀酒酵母磷化G蛋白信號轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子19抗體Anti-EBAG9 Antibody原卟啉(EPP)
焦曲霉磷化絲/蘇激p90RSK蛋白抗體Anti-ECE1 Antibody3(PRM3)
蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
芽孢桿菌Bacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%
: 長傳2514資源名稱: 福氏志賀氏菌 質(zhì)量規(guī)格:0.98
原釩酸鈉溶液ATPase Na+/K+protein/FITC 熒光su標(biāo)記鈉鉀ATPmei通道蛋白IgG規(guī)格: 0.2ml
Na,K-ATPase alpha-1 (Phospho Ser23) /FITC 熒光su標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷suan化鈉鉀ATPmei蛋白a1IgG規(guī)格: 0.2ml
Phospho-Na,K-ATPase alpha-1 (Tyr) /FITC 熒光su標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷suan化鈉鉀ATPmei蛋白a1IgG規(guī)格: 0.2ml
Na,K-ATPase alpha-1 (Phospho Ser16) /FITC 熒光su標(biāo)記兔抗小鼠、牛、豬磷suan化鈉鉀ATPmei蛋白a1IgG規(guī)格: 0.2ml
ATP-sensitive K+ channel subunit Kir6.2/FITC 熒光su標(biāo)記ATP敏感性鉀通道亞基kir6.2IgG規(guī)格: 0.2ml
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,來確定最佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度。
1) 第一天:未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。
2) 根據(jù)細胞類型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當(dāng)細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。