HE培養(yǎng)基公司正在銷售的產(chǎn)品：兔生長(zhǎng)因子受體結(jié)合蛋白7(Grb7)試劑盒Anti-EPHB1 Antibody核糖體蛋白L5抗體
兔粒巨噬集落激因子抗體(GM-CSF Ab)試劑盒 Anti-EPHB3 Antibody磷酸化RNA聚合酶II CTD抗體
兔血管活性腸肽受體1(VIPR1)試劑盒Anti-EPHX2 Antibody磷酸化RNA聚合酶II CTD抗體
兔色氨酰tRNA合成酶(WAR

產(chǎn)品分類：培養(yǎng)基

儲(chǔ)存條件：4℃,6個(gè)月

用途：植物組織培養(yǎng)常用基本培養(yǎng)基

注意事項(xiàng)：主要由硝酸鉀、氯化鈣、硫酸鎂、磷酸鹽等組成，經(jīng)高壓滅菌，為無菌溶液。

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購(gòu)！

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測(cè)器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對(duì)于需要更高密度來檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

依澤替米貝;依折麥布 Meloxicam卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白51抗體包裝5g

；右亞 Memantine HCl卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白125抗體包裝1g

鹽鹽;右亞鹽鹽 Memantine hydrochloride卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白50抗體包裝5g

 Methotrexate卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白90A抗體包裝100mg

左旋/磺左旋 Methotrexate卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白71抗體包裝100mg

Diabetes Research Nimesulide卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白37抗體包裝1g

MSDC-0160 Miconazole Nitrate卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白47抗體包裝5g

Phenformin hydrochloride Miconazole Nitrate卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白17抗體包裝1g

Sotagliflozin(LX4211) Micronomicin Sulfate卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白58抗體包裝25g

艾凈;依帕列凈;恩 Micronomicin Sulfate卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白94抗體包裝5g

 4-MUG卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白82抗體包裝1g

 MinoxidilCDK5激活結(jié)合蛋白2抗體包裝250mg

吡 MinoxidilCDK2相互作用蛋白抗體包裝5g

喹 Minoxidil Sulfate周期蛋白依賴性激14抗體包裝1g

脲 Minoxidil Sulfate癌胚抗原相關(guān)粘附分子19抗體包裝5g

: AS4.273資源名稱: 產(chǎn)色鏈霉菌 質(zhì)量規(guī)格：>99.0%血血小板衍生生長(zhǎng)因子AB試劑盒銀杏內(nèi)酯B;Ginkgolide B

成團(tuán)泛菌Pantoea│agglomerans 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品血小板因子3試劑盒異鉤藤堿;Isorhychophylli

: Bt0219資源名稱: 蘇云金芽胞桿菌 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR血小板衍生生長(zhǎng)因子CC試劑盒銀杏內(nèi)酯A;Ginkgolide A
HE培養(yǎng)基Matrilin 1/CMP/FITC  熒光標(biāo)記軟骨質(zhì)蛋白IgG1-萘 97%

MBP/FITC  熒光標(biāo)記髓鞘性蛋白IgG菲醌 95%

MBP/HRP  辣根過氧化物標(biāo)記髓鞘性蛋白IgG菲醌 99%

Mcl-1/FITC  熒光標(biāo)記髓樣白血病-1IgG2-吡啶 99%

Phospho-Mcl1 (Ser159/Thr163)/FITC  熒光標(biāo)記化髓樣白血病-1IgG(R)-(+)-2-(4-羥苯氧) 98%

MCM2/FITC  熒光標(biāo)記微小染色體維持缺陷蛋白2IgG(S)-(-)-2-酯 98%

MCM3/FITC  熒光標(biāo)記微小染色體維持缺陷蛋白3IgG3,5-二叔丁 98%

MCM5/CDC46/FITC  熒光標(biāo)記微小染色體維持缺陷蛋白5IgG乳糖，無水 AR,98%