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公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
EA50染色液 | 100ml | FS-R6667 |
產(chǎn)品分類:細胞染色
儲存條件:室溫,12個月
用途:細胞學樣本常規(guī)染色,尤其適用于婦科細胞學涂片染色、細胞脫落標本染色。
注意事項:巴氏染色液的一種主要成分,主要由亮綠、磷鎢酸等組成。OG6與EA50聯(lián)合使用,可以將細胞漿染成鮮明的綠色、藍色、粉色。
配制與標定的實驗原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻。
實驗方法與判定:
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應不低于10000。
4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。
款冬(標準品) Celite, acid-washedG蛋白偶聯(lián)受體109A抗體包裝5g
葵花盤(標準品) Celite® 545γ-銜接蛋白相關蛋白1抗體包裝1g
昆明山海棠(標準品) Chlorhexidineγ-銜接蛋白相關蛋白2抗體包裝25g
蠟梅堿 β-Citronellolγ-銜接蛋白相關蛋白3抗體包裝5g
,辣椒(天然提取) Carbendazim solution配子生成抗體包裝1g
,辣椒(天然提取標準品) Carbendazim solutionγ谷酰轉(zhuǎn)肽2重鏈抗體包裝250mg
辣蓼(標準品) Chryseneγ-谷酰轉(zhuǎn)肽5重鏈抗體包裝5g
萊苞迪甙A(標準品) Carbaryl磷化GATA結(jié)合蛋白3抗體包裝100mg
萊苞迪甙C(標準品) Chlorpyrifos磷化GATA結(jié)合蛋白3抗體包裝500mg
萊苞迪甙D(標準品) Cyromazin solution延伸因子G2抗體包裝1g
萊苞迪苷G Clofentezine葡糖淀粉抗體包裝25g
萊菔子(標準品) Clofentezine solution谷酰6-磷果糖轉(zhuǎn)移抗體包裝5g
蘭雪醌,白花丹醌,白花丹(標準品) Clofentezine solutionS轉(zhuǎn)移θ抗體包裝100mg
藍布正(標準品) CarboxineS轉(zhuǎn)移θ2抗體包裝25mg
欖香 Cyclohexanolγ-谷酰轉(zhuǎn)肽6抗體包裝25g
: AS2.126資源名稱: 釀酒酵母 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品橋粒芯糖蛋白3抗體試劑盒泊金;Propylparaben
副溶血弧菌Vibrio│parahaemolyticus 質(zhì)量規(guī)格:Purity>99.0%;蕈堿型乙酰受體拮抗劑橋粒芯糖蛋白2試劑盒泊金乙;Ethylparaben
尖鐮孢古巴?;停ㄏ憬犊菸【?/span>Fusarium│oxysporum f. sp. cubense 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標準品橋粒芯糖蛋白1抗體試劑盒泊金;Methylparaben
EA50染色液Mac-1 (Mac-1/CR3/CD11b+CD18) 巨噬細胞表面分子抗原規(guī)格: 0.5mg
Mafa(avian)(V-maf musculoaponeurotic fibrosarcoma oncogene homolog A) v-maf 肌腱膜纖維肉瘤癌基因同源物A抗原規(guī)格: 0.5mg
MAGE-1 gen (Melanoma gen Recognized by T-cells 1) 黑色su瘤相關抗原規(guī)格: 0.5mg
MAPKK1 (MAP kinase kinase 1) 絲裂原活化蛋白激mei激mei1抗原規(guī)格: 0.5mg
ASK1/MAPKKK5 細胞凋亡信號調(diào)節(jié)激mei1/絲裂原活化蛋白激mei激mei激mei5抗原規(guī)格: 0.5mg
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定最佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度。
1) 第一天:未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。
2) 根據(jù)細胞類型,設定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。