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人宮頸平滑肌細(xì)胞

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5×10^57750元15 瓶 可售
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更新時間:2024-01-29 13:10:49瀏覽次數(shù):459

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
貨號 A01X1375 主要用途 僅供科研研究實驗
組織來源 子宮組織 種屬來源
生長特性 貼壁 細(xì)胞形態(tài) 長梭形,不規(guī)則細(xì)胞
人宮頸平滑肌細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:兔視網(wǎng)膜muller細(xì)胞灰銹赤鏈霉菌Streptomyces griseorubiginosus兔腦動脈血管內(nèi)皮細(xì)胞黃麻鏈霉菌Streptomyces corchorusii兔膀胱上皮細(xì)胞韋臘鏈霉菌Streptomyces werraensis兔破骨細(xì)胞微管螺旋鏈霉菌Streptomyces capillispiralis

詳細(xì)介紹

QQ截圖20240123162116.png

一、細(xì)胞基本屬性:

細(xì)胞名稱

人宮頸平滑肌細(xì)胞

商品貨號

A01X1375

組織來源

子宮組織

產(chǎn)品規(guī)格

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

種屬來源

傳代特性

細(xì)胞特性確定傳代

生長特性

貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞形態(tài)

長梭形,不規(guī)則細(xì)胞

 

細(xì)胞簡介

子宮頸位于子宮下部,近似圓錐體,  長2.5~75px,上端與子宮體相連,下端深 入陰道。宮頸的大小與宮體比例隨年齡及內(nèi)分泌狀態(tài)等而變化。

宮頸壁由黏膜、肌層和外膜組成。其中,  肌層是由平滑肌細(xì)胞構(gòu)成。

包被條件: 

培養(yǎng)基:原代平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)體系

換液頻率:每2-3天換液一次

傳代比例:

消化液:0.25%胰蛋bai酶

培養(yǎng)條件:氣相:  空氣,95%;CO2 ,5%

1.jpg

5.jpg



原代細(xì)胞實驗步驟:

一、取7-10d雄性SD大鼠,頸椎脫臼處死,浸泡于75%乙醇消毒3-5min。

二、在超凈工作臺中,將大鼠斷頭置于玻璃培養(yǎng)皿中,打開顱腔后取出全腦,放在盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中,去除小腦和間腦。

三、將大腦半球在干濾紙上緩慢滾動以去除軟腦膜和腦膜大血管,再放在新的盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中。

四、用細(xì)解剖鑷去除大腦白質(zhì)、殘余大血管和軟腦膜,保留大腦皮質(zhì)。

五、大腦皮質(zhì)放于DMEM中,剪碎成約1mm3大小,放入50ml的離心管中,加入混合酶液I(0.05-0 .1%II型膠原酶,0 .025-0 .05%IV型膠原酶,200-400U DNaseI),混勻后37℃水浴消化1-1.5h。

六、室溫1 000×g離心8min,去上清液。

七、沉淀中加入20%BSA重懸浮,充分混勻,1 000×g,20min,4℃離心,去上清。

八、沉淀加入4ml混合酶液II( 0.05-0.1%的膠原酶/分散酶,0.05-0.1%I型膠原酶,100-300U DNaseI )重懸浮,混勻,37℃水浴消化0.5-1h,700×g室溫離心6min,去上清液。

九、沉淀加入2ml DMEM培養(yǎng)液懸浮混勻,鋪于經(jīng)離心形成連續(xù)梯度的12ml 50%Percoll(25 000×g,60min,4℃),1000×g,4℃離心10min。

十、靠近底部的紅細(xì)胞層之上的白黃色的層面即為純化的微血管段,吸出后DMEM

漂洗兩次(離心1000×rpm,6min,室溫),去上清液。

加入DMEM培養(yǎng)液(20%FBS,4ug/ml嘌呤霉素 )重懸浮,接種于含5%的大鼠 血清37℃孵育過夜所制備的細(xì)胞培養(yǎng)皿中,置于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)24h后更換不含嘌呤霉素的混合培養(yǎng)基,隨后隔天換液。

原代細(xì)胞使用方法:

是一種貼壁培養(yǎng)細(xì)胞,細(xì)胞形態(tài)呈長梭形,不規(guī)則細(xì)胞,在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下,細(xì)胞可傳2-3代;建議您收到細(xì)胞后盡快進行相關(guān)實驗。

客戶收到細(xì)胞后,請按照以下方法進行操作。

1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2. 貼壁細(xì)胞消化

1)吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;

2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml培養(yǎng)基終止消化;

3)用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);

4)待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基。

3. 細(xì)胞收貨脫落

1)收集所有細(xì)胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀;

2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min);消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化;

3)經(jīng)1000rpm,離心5min,丟棄上清,用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi);

4)待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱)。

5)原瓶內(nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。

4. 細(xì)胞實驗

因原代細(xì)胞貼壁特殊性,貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細(xì)胞貼壁性,避免細(xì)胞因沒貼好影響實驗;包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被。
公司正在出售的產(chǎn)品:
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 -熒光素酶標(biāo)記

大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記
人胃癌細(xì)胞耐藥株
人宮頸癌細(xì)胞耐藥株
人肺腺癌耐藥性細(xì)胞
人卵巢癌耐DDP細(xì)胞,2mmol/L
大鼠心肌細(xì)胞
小鼠腹水瘤細(xì)胞
大鼠胰島β細(xì)胞
小鼠肺癌細(xì)胞
大鼠肉瘤細(xì)胞
小鼠纖維肉瘤細(xì)胞
大鼠肝癌細(xì)胞
垂體瘤細(xì)胞系
大鼠垂體瘤細(xì)胞
Bacteroides uniformis單形擬桿菌
Belnapia rosea玫瑰別爾納普氏菌
Bergeyella zoohelcum動物潰瘍伯杰氏菌
Bosea thiooxidans硫氧化博斯氏菌
Bowmanella pacifica太平洋鮑曼氏菌
Brachybacterium faecium糞小短桿菌
Brachybacterium paraconglomeratum副凝聚小短桿菌
Brevibacterium casei乳酪短桿菌
Brevibacterium frigoritolerans耐寒短桿菌
Brevibacterium linens擴展短桿菌
人宮頸平滑肌細(xì)胞Brevibacterium iodinum碘短桿菌
Burkholderia ambifaria雙向伯克霍爾德氏菌
Burkholderia kururiensis久留里伯克霍爾德氏菌
Burkholderia sacchari蔗糖伯克霍爾德氏菌
Burkholderia tropica熱帶伯克霍爾德氏菌

 


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