西安瑞禧提供一種由二硫鍵鏈接的二親嵌段共聚物材料，用該材料自主裝制作膠束包裹的在二硫蘇糖醇（DTT）作用下或在谷胱甘肽的作用下可以加速釋放。

水凝膠是親水的聚合物網(wǎng)絡(luò)， 它能夠吸收的水分， 但由于聚合物鏈間的物理交聯(lián)和化學(xué)交聯(lián)作用而不會溶解于水中， 只能溶脹且保持一定的形狀。 水凝膠具有的生物相容性、 水滲透性， 而且通過人工可得到不同微觀結(jié)構(gòu)和性能的水凝膠材料， 這些性質(zhì)使水凝膠在生物學(xué)領(lǐng)域獲得了的應(yīng)用。 關(guān)于水凝膠的、 理化性質(zhì)及應(yīng)用方面的研究來受到科學(xué)家的， 已采用了交聯(lián)方法來制備水凝膠。 研制性能的水凝膠體系， 用于和生物學(xué)領(lǐng)域是倍受的課題之一。

巰基化聚合物中的自由巰基可以在空氣中被氧化形成二硫鍵而交聯(lián)， 不克服了以往采用小分子物質(zhì)如戊二醛、 ＥＤＡＣ等作交聯(lián)劑時存在的問題，反應(yīng)條件也比較溫和。 同時自由巰基還可以與雙鍵發(fā)生Ｍｉｅｈａｅｌ］Ｊ［］成反應(yīng)形成交聯(lián)網(wǎng)絡(luò)， 因此相關(guān)的研究工作目前在比較受。 Ｐｒｅｓｔｗｉｃｈ等人研究了巰基化透明質(zhì)酸． 巰基化明膠交聯(lián)膜和支架的制備和性能分析， 并進行了相容性的評價； Ｈｕｂｂｅｌｌ等人［６Ｈ則報道了乙烯基砜端基終止的多臂聚乙烯醇大分子單體和ａ－ｆ． ｏ線形半胱氨酸低聚肽通過Ｍｉｃｈａｅｌ加成反應(yīng)的雜化水凝膠。 用依據(jù)Ｍｉｌｌｅｒ－Ｍａｃｏｓｋｏ理論經(jīng)試驗測定得出的凝膠分率和從溶脹和流變測定得到的值作比較， 并按ＪＦｌｏｒｙ網(wǎng)絡(luò)模型來計算交聯(lián)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)中的彈性活性鏈的濃度。此類水凝膠正被研究用做軟骨組織工程的支架材料。

基于二硫鍵交聯(lián)的水凝膠材料以其的延展性、 通透性、 交聯(lián)能力， 在生物學(xué)材料領(lǐng)域具有的應(yīng)用， 但目前相關(guān)研究報道較少。 此類水凝膠材料的反應(yīng)條件如配比、 交聯(lián)度等都將對水凝膠的性能產(chǎn)生影響。

HA-SS-PLGA 透明質(zhì)酸-雙硫鍵-聚乳酸羥基乙酸

P(AAPBA-co-DMAA-co-AAm)

PNIPAM-DMAA

P(DMAA-co-NIPAm)

含二硫鍵的小分子肽

二硫鍵交聯(lián)的殼聚糖-明膠水凝膠

TPGS-S-S-DOX

TPGS-S-S-PTX

COSSA-AC-ss-DTPA-Gd

COSSA-AC-ss-DTPA-Gd

二硫鍵的端羧基聚乙二醇PEG-SS-COOH

mPEG-S-S-Cys-CLB

mPEG-Cys-AFC

mPEG-SS-HMA-Drug

mPEG-SS-HMA-CPT

mPEG-SS-HMA-CLB

PEG-SS-PPS
PEG-ss-chitosan 

PEG-ss-COS-ss-PEI

PEG-PLGA-SS-DTX

RGD-PEG-SS-PEI

PEG-SS-PLL

PEG-P(MAA-SS-VCL)

PMAA-chitosan-PEG

PDMAEMA-SS-PEG-SS-PDMAEMA

1.1巰基化殼聚糖一巰基化明膠雜混聚合物網(wǎng)絡(luò)水凝膠膜的制備

巰基化殼聚糖一巰基化明膠雜混聚合物網(wǎng)絡(luò)水凝膠膜以下簡稱殼聚糖一明膠交聯(lián)膜。

取ｐＨ ２和ｐＨ ３條件下制備的巰基化殼聚糖、 ＤＴＰＨ法和反應(yīng)配比為ｌ：ｌ的ＢＴＡ法制備的巰基化明膠做為制備殼聚糖一明膠交聯(lián)膜的， 制備方法如下：              

?。穑?/span> ３條件下制備巰基化殼聚糖和ＢＴＡ法制備的巰基化明膠若干， 分別溶于一定量的ｐＨ ３． ５的鹽酸溶液中配成不同重量百分比的溶液。 按配比均勻混合后在室溫條件下自然干燥成膜。 將膜用０． １Ｍ的氫氧化鈉溶液浸泡４ｈ， 用去離子水沖凈后再用０． １％的過氧化氫溶液浸泡ｌｈ。 后再用去離子水充分浸泡、沖洗， 在濕態(tài)下用打孔器制成直徑約８ｍｍ的薄片， 于室溫下自然干燥， 就得到了不同配比的殼聚糖． 明膠交聯(lián)膜。

BPEI-SS-PEG-cNGR

PEG-SS-PASP

PEG-SS-PLys-PLeu

PLGA-SS-PEG-FOL

MSNs-SS-PEG

Gal-PEG-PCL

CD-β-SS-PEI, β-cyclodextrin-SS-PEI 環(huán)糊精二硫鍵聚乙烯亞胺

Ferrocene-β-CD (β-Cyclodextrin) 二茂鐵-環(huán)糊精

Ferrocene-PNIPAM

RGD-PEG-SS-PEG-PAMAM

PEG-DMTK-SS-PLA

支化賴氨酸Lys-PEG-b-PCL

PSGMA-b-PMAPEG

PCL-b-PHEAA

mPEG-PLA-Mpeg

PEI-g-PEG

MPEG-SS-2SA，MPEG-SS-TPGS

mPEG-SS-PTX

mPEG-SS-DOX

?。穑?/span> ２、 ｐＨ ３條件下制備的毓基化殼聚糖和ＤＴＰＨ法、 ＢＴＡ法制各的巰基化明膠若干， 分別溶于一定量的ｐＨ ３． ５的鹽酸溶液中配成３％的溶液， 按配比均勻混合后在室溫條件下自然干燥成膜。 后處理方法同上， 得到不同交聯(lián)度的殼聚糖一明膠雜混聚合物網(wǎng)絡(luò)膜。 為了敘述／解釋， 特將為第５組的制膜條件稱為“低交聯(lián)度” ， 為第６組的制膜條件稱為“中交聯(lián)度” ，為第７組的制膜條件稱為“交聯(lián)度” 。 相應(yīng)的交聯(lián)膜分別稱為低交聯(lián)膜、中交聯(lián)膜和交聯(lián)膜。

mPEG-SS-PLA-SS-PEI

mPEG-SS-PEI

mPEG-SS-Pleu

mPEG-SS-NH-g-PHAsp-CPT

mPEG-SS-NH-g-PHAsp

mPEG-SS-P(BLA-co-APILA)

mPEG-SeSe-St 聚乙二醇-雙硒鍵-淀粉

mPEG-SS-St 聚乙二醇-二硫鍵-淀粉

Dex-SA 葡聚糖-硬脂酸

Dex-PLGA 葡聚糖-聚（乳酸-羥基乙酸）共聚物

Dex-PLGA-PTX葡聚糖-聚（乳酸-羥基乙酸）-紫杉醇

TRITC-Dex-PLGA

Dex-PLGA-DOX

mPEG-PBLG-SS-DTX

mPEG-SS-NH2

mPEG-SS-NH-graft-PAsp-DA

mPEG-PCL-SS-DTX

MPEG-SS-PCPT

mPEG-SS-Lysn-r-Hism

mPEG-SS-PNLG

mPEG-SS-PMMA

mPEG-SS-PPhe

1.2交聯(lián)膜相容性的評價

1.2．1     材料制備

?。穑?/span> ３條件下制備的巰基化殼聚糖和ＤＴＰＨ法、 ＢＴＡ法制備的巰基化明膠若干， 分別溶于一定量的ｐＨ ３． ５的鹽酸溶液中配成３％的溶液， 按１： １的體積比均勻混合后在室溫條件下自然干燥成膜。 將膜用Ｏ． １Ｍ的氫氧化鈉溶液浸泡４ｈ，用去離子水沖凈后再用Ｏ． １％的過氧化氫溶液浸泡１ｈ。 后再用去離子水反復(fù)浸泡、 沖洗， 在濕態(tài)下用打孔器制成直徑約８ｍｍ的薄片， 室溫下自然干燥， 就得到了交聯(lián)度不同的殼聚糖． 明膠雜混聚合物網(wǎng)絡(luò)膜， 利用輻射度為２５Ｋ Ｇｙ的丫射線將干燥后的交聯(lián)膜照射２８ｈ， 備用。

聚醚-聚酸酐共聚物mPEG-ss-CPP-SA

MPEG–PCL-SS-TAT 聚乙二醇-聚已內(nèi)酯-二硫鍵-多肽

PALA-PEG-PALA聚丙氨酸-聚乙二醇-聚丙氨酸

mPEG-PLGA-SS-DTX

Insulin-SS-PEG聚乙二醇修飾胰島素

mPEG-SeSe-PEI

Dox-SS-Dox 阿霉素-二硫鍵-阿霉素

CPT-SS-CPT

pHLIP-SS-DOX 多肽-二硫鍵-阿霉素

Chol-SS-Dox -雙硫鍵-阿霉素

mPEG-PCL-SS-DOX

SWCNTs-HA-SS-DOX

alginate-SS-DOX 海藻酸鈉-二硫鍵-阿霉素

PEOz-PLA-g-PEI

mPEG-b-PMAGP-SS-DOX

Chol-SS-COS/DOX

iRGD-HES-SS-C18

cRGD-SS-DOX

HA-SS-PZLL@SPIO/DOX

Dox-DTPA-PLL

Dox-PGA 阿霉素-聚谷氨酸

Dox-DSPL-LyP-1

1.３實驗

按照ＩＳ０１０９９３標準， 將材料以６ｃｍ２／ｍＬ的標準浸提于１６４０培養(yǎng)液中， 置于３７℃、 ５％Ｃ０２、 濕度為１００％的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)２４ｈ， 得到浸提液。在２４孔培養(yǎng)板每孔中種入含有５× １０３個Ｌ９２９的懸液ｌｍＬ， 培養(yǎng)１ｄ后，吸取培養(yǎng)液， 加入制備好的浸提液ｌｍＬ。 于２， ４， ７天， 測定紫外吸光度。 取每個時間點的樣品， 用磷酸鹽緩沖液（ＰＢＳ）輕輕洗去未貼附于培養(yǎng)板表面的， 每孔用１０％甲醛溶液ｌｍＬ固定３０ｍｉｎ， 之后常水沖洗３次以上。 每孔加入２滴０． ５％結(jié)晶紫溶液染色３ｍｉｎ， 常水沖洗充分以除去未著色的染料。 每孔加入１％十二烷基硫酸鈉（ＳＤＳ）溶液ｌｍＬ萃取結(jié)晶紫。 萃取后的溶液加入比色皿內(nèi)， 加入２ｍＬ ＳＤＳ溶液， 混合， 用紫外分光光度計于５８８ｎｍ處測定吸光度值。

DTPA-rhodamin

cRGD-SS-DOX 

PAMAM-SS-PEG/DOX

殼聚糖-聚乙烯亞胺-對肼基苯甲酸-阿霉素聚合物(CS-PEI-HBA-DOX)

MSNs-Peptide-BSA-LA@DOX

HMS-SS-DOX-CD-PEG羥基淀粉-雙硫鍵-阿霉素-環(huán)糊精-聚乙二醇

ICG@HES-SS-DOX 吲哚菁綠-羥基淀粉-二硫鍵-阿霉素

Au-PEG-SS-DOX 納米金棒-聚乙二醇-二硫鍵-阿霉素

Dextran-PEI-SS-DOX 葡聚糖-聚乙烯亞胺-二硫鍵-阿霉素

Stearate-g-dextran 硬脂酸-葡聚糖

Mn-SS/DOX@PDA-PEG

DOX-SS-PEG-FA 阿霉素-二硫鍵-聚乙二醇-

PEtOz-SS-PCL

Dextran-SS-PCL 葡聚糖-二硫鍵-聚已內(nèi)酯Dex-SS-PCL

FA-PEG-PLGA-SS-DOX

Gal-PEEP-a-PCL-SS-PDMAEMA

Dex-SS-PAA-DOX 葡聚糖-二硫鍵-聚丙烯酸-阿霉素

樹枝狀聚甘油硫酸dPGS-SS-PCL（dendritic polyglycerol sulfate）

HA-PCL，Hyaluronan-PCL 透明質(zhì)酸-聚已內(nèi)酯

PTX-SS-PTX

1.４ＭＴＴ實驗

在覆蓋有材料的４８孔培養(yǎng)板中種入密度為５ｘ１０４個／ｍＬ的Ｌ９２９０． ５ｒｉｄ， 培養(yǎng)２， ４， ７天， 用ＭＴＴ實驗檢測活性。 每孔加入５０“ＬＭＴＴ（５ｍｇ／ｍｌｉｎ Ｄｕｌｂａｃｏｏ’ ｓ ＰＢＳ）， 在３７℃、 ５％Ｃ０２、 濕度１００％的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)４ｈ。 除去培養(yǎng)液， 用ＰＢＳ沖洗一次， 每孔加入０． ５ｍｌ二甲基亞砜（ＤＭＳ０）溶解轉(zhuǎn)化的染料， 每孔取出１００９Ｌ溶液轉(zhuǎn)移９６孔板， 用標儀（Ｌａｂｓｙｓｔｅｍｓ ＤｒａｇｏｎＷｅｌｌｓｃａｎ ＭＫ３）測定５７０ｎｍ處的吸光度。

Chol-ss-PEG-ss-Chol

PEG-SS-PBLGs

PTX-SS-C18 硬脂酸-二硫鍵-紫杉醇

PTX-HECS-ss-OA殼聚糖膠束

PCL-SS-PTX

PTX-SS-VE 阿霉素-二硫鍵-維生素E

PEG-SS-PTX

HA-SS-VE透明質(zhì)酸-二硫鍵-維生素E

HA-SS-PTX透明質(zhì)酸-二硫鍵-紫杉醇

Chitosan-PAA-PTX 殼聚糖-聚丙烯酸-紫杉醇

PTX-PLGA

HA-SS-TOS

mPEG-SS-C18

HA-ss-TOS-PTX 透明質(zhì)酸-二硫鍵-生育酚-紫杉醇

奧曲肽紫杉醇偶聯(lián)物PTX-OCT

CPT-ss-Ara喜樹堿-二硫鍵-阿糖胞苷

CPT-SS-Cy7/CY5.5

CPT-ss-芳烴5

Dex-SS-CPT

Dex-hyd-DOX

Biotin-SS-CPT -二硫鍵-紫杉醇

PCL-SS-PDEA-PS

DEX-SS-Ce6 葡聚糖-二硫鍵-二氫卟吩

Dex-SS-CPT

1.５原位熒光觀測的形態(tài)

利用熒光素二醋酸鹽（Ｆ． ＤＡ）來原位觀察材料表面的形態(tài)。 Ｆ． ＤＡ以５ｍｇ／ｍＬ的濃度溶解在丙酮溶液中， 再用Ｄｕｌｂａｃｏｏ’ ｓ ＰＢＳ（ＤＰＢＳ）稀釋成０． ０２ｍｇ／ｍＬ的染液。 在覆蓋有材料的２４孔板種入密度為５× １０４個／ｍＬ的Ｌ９２９ｌｍＬ。 培養(yǎng)２４ｈ后， ＤＰＢＳ沖洗兩次， 洗去未貼附的， 每孑Ｌ加入ｌｍＬ染液， 室溫染色３ｒａｉｎ， 再用ＤＰＢＳ沖洗５ｍｉｎ。 熒光顯微鏡觀察， 活為綠色。 激發(fā)波長為４９０ｎｍ， 發(fā)射波長５２０ｎｍ， 藍色激發(fā)塊。

二硫鍵的葡聚糖衍生物(Dex-SS-PA)

Dex-SS-PEI 葡聚糖-二硫鍵-聚乙烯亞胺

Dex-SS-PMA-DOX

Dex-SS-Ad/CD-SS-pDM 葡聚糖-二硫鍵-金剛烷

Dex-SS-NH2

Dex-g-SS-PZLL Dex-SS-PCL-PLL

Dex-g-SS-OLA(oligolactide)

chitosan-SS-Mpeg

PAA-SS-OA 聚丙烯酸-二硫鍵-油酸

FA-CPT 偶聯(lián)喜樹堿

cytarabine油酸修飾阿糖胞苷OA-Ara

正己酸HA修飾阿糖胞苷Ara

他米巴羅汀-阿糖胞苷偶聯(lián)物（設(shè)計）

5-FU@AM80 5-氟尿嘧啶偶聯(lián)他米巴羅汀

HDAC-AM80他米巴羅汀偶聯(lián)組蛋白去乙?；?/span>

修飾的蓓薩羅丁白蛋白納米粒

喜樹堿(CPT)二硫鍵鍵接伊立替康(Ir)(CPT-ss-Ir)

Gem-Cb綴合物吉西他濱偶聯(lián)苯丁酸氮芥

K5多糖-阿霉素前體，K5-hydrazone-DOX（KHD）

半乳糖-偶聯(lián)物galactose-cholesterol

生物活性芹菜素和金合歡素糖苷及黃酮糖綴合物

良姜素Galangin-BSA，

山萘酚Kaempferol-BSA,

槲皮素Quercetin-BSA牛血清白蛋白

黃酮類小分子偶聯(lián)牛血清白蛋白BSA

沒食子兒茶素-BSA

表沒食子兒茶素EGC-BSA

二氫楊梅素偶聯(lián)牛血清白蛋白

1.6結(jié)論

以巰基化殼聚糖、 巰基化明膠制各了不同固含量、 不同交聯(lián)度和不同混合比的基于二硫鍵交聯(lián)的殼聚糖． 明膠雜混聚合物網(wǎng)絡(luò)膜， 對交聯(lián)膜的溶脹動力學(xué)、平衡溶脹度、 交聯(lián)度以及體外降解特性做了研究， 并用Ｌ９２９評價了其相容性評價， 得到如下結(jié)論：

（１）交聯(lián)膜的溶脹速率在２ｈ后趨于平緩， ６ｈ溶脹基本到達平衡狀態(tài)。 到達溶脹平衡所需時間與膜的配比關(guān)系不大；

（２）對不同固含量、 不同交聯(lián)度的交聯(lián)膜來說， 隨明膠量的增多各交聯(lián)膜的平衡溶脹率均呈線性增加。 初始溶液的固含量、 交聯(lián)程度大， 交聯(lián)膜的平衡溶脹度小。

（３）以不同巰基含量的殼聚糖、 明膠改性物制備交聯(lián)膜， 其交聯(lián)度均在殼聚糖．明膠混合比為５０： ５０時平衡； 與理論值相比， 只有４５％的巰基被氧化成-Ｓ-Ｓ-的形式。

（４）隨著交聯(lián)度的增加， 交聯(lián)膜的解速率隨之降低。 相比較而言， 膠原對交聯(lián)膜的降解作用要于溶菌， 而交聯(lián)膜基本上不發(fā)生水解或溶解。

（５）采用Ｌ９２９大鼠成纖維， 使用浸提液法和ＭＴＴ法對殼聚糖． 明膠交聯(lián)膜的相容性進行了評價， 結(jié)果證實交聯(lián)膜表面的活性與對照組相比無差異， 表明該交聯(lián)膜適合。 交聯(lián)膜交聯(lián)度的差異并沒有影響在其表面的活性。

制備相關(guān)產(chǎn)品：

BSA牛血清白蛋白偶聯(lián)

牛血清白蛋白5-氟尿嘧啶偶聯(lián)物，(FA-BSA-5-FU)-前體

聚乙二醇/牛血清白蛋白/5-氟尿嘧啶(mPEG/BSA/5-FU)偶聯(lián)物

牛磺熊去氧膽酸鈉偶聯(lián)牛血清白蛋白

CdTe量子點與牛血清白蛋白偶聯(lián)(QOs-BSA)

龍須菜多糖-牛血清白蛋白BSA偶聯(lián)物

牛血清白蛋白偶聯(lián)皮質(zhì)酮

過氧化氫-牛血清白蛋白偶聯(lián)物(CAT-BSA)

磺胺對甲氧嘧啶(SMD)與牛血清白蛋白(BSA)

諾氟沙星與牛血清蛋白偶聯(lián)物(NFLX-BSA)

偶聯(lián)白蛋白納米粒

牛血清白蛋白-三聚氰胺偶聯(lián)物

黃芩苷(BAL)與牛血清白蛋白(BSA)偶聯(lián)

DOX-PABA-BSA

BSA-(Gd-DTPA)

黃酮半乳糖綴合物

生物活性黃酮醇和香豆素及其糖綴合物

素前體K5多糖-Hyd腙鍵-DOX

K5多糖-脫氧膽酸膠束材料

K5-SS-DOCA ，K5多糖-二硫鍵-脫氧膽酸

K5多糖偶聯(lián)（K5-CHOL）

KD-DOX, 素前體K5多糖偶聯(lián)阿霉素

二硫鍵結(jié)構(gòu)的喜樹堿(CPT)單體

喜樹堿-環(huán)糊精-納米金 CPT-CD/AuNPs

PEG-DOX聚乙二醇-阿霉素

殼聚糖-鉑(IV)前體偶聯(lián)物

聚輪烷—喜樹堿偶聯(lián)物(前體)

5-氟尿嘧啶-β-環(huán)糊精結(jié)腸靶向前體

穿膜肽-β-葡萄糖苷—西妥昔單抗偶聯(lián)物

靶向性的阿霉素前體PASP-DOX

阿霉素偶聯(lián)物DOX-Folate

偶聯(lián)的青霉素G?；?/span>(Folate-PGA)

雷公藤內(nèi)酯醇-溶菌偶聯(lián)物的

奧曲肽-聚乙二醇-紫杉醇(OCT-PEG-PTX)前體

Pt-PEG-GNRs

美沙拉嗪PEG修飾物(5-ASA-mPEG)

-腙鍵-阿霉素前體(LA-Hyd-DOX)

介孔二氧化硅包裹的Pd@Ag納米材料

二氧化硅殼層連接光敏劑二氫卟吩 (Ce6)

甘草次酸-聚乙二醇 GA-PEG

5-氟尿嘧啶偶聯(lián)聚乙二醇 5Fu-PEG

PEG-AMLS聚乙二醇化亮甲琥酯

聚谷氨酸衍的紫杉醇(Xyotax,Opaxio)

聚甲基丙烯酸羥丙酯衍的阿霉素(PK1,PK2)

C16-SS-COOH 棕櫚酸-二硫鍵-羧基

C16-SS-NHS 硬脂酸-二硫鍵-活化羧基

多種聚合物嵌段 (PLGA/PLA/PCL/PEG/Crgd/PLL/PEI/PS/PAA/PHB/PAMAM)

親水端或疏水端可連十幾種活性基團（NH2/COOH/NHS/MAL/N3/Bio//FITC/Folate…...）

末端基團率大于90%，PDI聚合度小于1.4，可提供核磁圖譜

提供復(fù)雜定制服務(wù)，如：雙硫鍵或CO鏈接（ZLF）