大鼠膀胱腫瘤抗原(BTA)試劑盒
大鼠膀胱腫瘤抗原(BTA)試劑盒專業(yè)經營進口胎牛血清、細胞因子、ELISA試劑盒、細胞、抗體、生物試劑、耗材、培養(yǎng)基、一抗、二抗、其產品吸附均勻,吸附性好,空白值低,孔底透明度高,代做ELISA實驗等。完善的庫存及供應體系以及高效穩(wěn)定的純化技術,保證產品均能現(xiàn)貨供應和產品質量的穩(wěn)定性。
一、客戶收到細胞先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞時的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;
收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。
二、如為貼壁細胞,請在顯微鏡下觀察細胞密度:
1. 未超過80%匯合度時,用75%酒精(建議配置75%酒精的水也是滅菌超純水,噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內,嚴格無菌操作;然后打開蓋子,先用槍頭把培養(yǎng)基吸出10ml左右,放在離心管里,然后瓶口過火(嚴禁直接傾倒),這樣可以保證不污染,再用10ml的移液管,將剩余的培液全部吸出,放于離心管中,培養(yǎng)瓶中只剩余10ml左右培液就可以了。培養(yǎng)16hr(時間根據(jù)細胞生長情況調整)之后,傳代或者凍存。
2. 超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:
1) 棄去培養(yǎng)液,用3ml PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次;
2) 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于T25培養(yǎng)瓶中,倒轉放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預熱,然后又將培養(yǎng)瓶倒轉大約30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓分散,輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶,細胞隨即脫落下來;
3) 加入6-8ml*培養(yǎng)基,吸出,分到新的培養(yǎng)瓶中,按要求分瓶。
三、如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液,1000轉/分鐘離心5分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。
注意:換液時一半用我們的培養(yǎng)基,一半用你們的,以免細胞不適應而造成生長不好。
四、細胞出現(xiàn)問題,可重發(fā)的情況有哪些?判定標準是什么?
?。?)細胞運輸途中遭遇的各種問題,細胞丟失、破損、漏液等,重發(fā);
(2)凍存的細胞復蘇后,絕大多數(shù)細胞未存活,重發(fā);
(3)存活的細胞靜置24小時后,絕大多數(shù)細胞未存活,重發(fā);
?。?)凍存的細胞復蘇后或存活的細胞靜置4小時后并且未開封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
(5)視具體情況而定。
五、細胞出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
?。?)客戶造成細胞污染,不重發(fā);
?。?)客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
?。?)細胞狀態(tài)不好,未提供細胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
?。?)細胞培養(yǎng)時經其它處理的,不重發(fā);
?。?)細胞收到2天內,未告知,不重發(fā);
?。?)視具體情況而定。
成分復雜的培養(yǎng)基還含有許多化合物,包括蛋白質、多肽、核苷、檸檬酸循環(huán)的中間產物、丙酮酸及脂類等。已發(fā)現(xiàn)當培養(yǎng)基中的血清濃度減少時,這些成分都是必需的。既使在使用血清的情況下,這些成分也可幫助細胞的克隆化培養(yǎng)及維持某些特殊細胞系的生長。
激素和生長因子在大多數(shù)常規(guī)培養(yǎng)基的配方中都沒有注明,但在無血清培養(yǎng)基中通常要加入它們,用其來代替血清中的激素能增加多種不同類型細胞的貼瓶率;生長因子包括FGF家族、EGF、PDGF、IGF-1和IGF-2及白介素等,生長因子和細胞因子有著廣泛的特異性,一般與激素或其它物質起相互協(xié)同或加成作用。另一種常見的添加物就是血清替代物,目前已有許多可*或部分替代傳統(tǒng)培養(yǎng)液中血清成分的商業(yè)產品,其穩(wěn)定性較好,但批次間仍有差別,產品的成分也不很確定。
◇ 注意事項:收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定,對收集后當天進行檢測的標本,儲存在4℃?zhèn)溆?,如有特殊原因需要周期收集標本,將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復凍融,標本2-8℃可保存48小時,-20℃可保存1個月,-70度可保存6個月,部分標本需添加抑肽酶。我公司是國內信譽雙收的放心企業(yè)代理商,具有良好的市場信譽與口碑,有一對一的*的老師對客戶進行技術指導,專業(yè)的銷售和技術服務團隊,歡迎廣大師生、研究機構等,洽商。