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PCR原理

　　DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解旋成單鏈，在DNA聚合酶的參與下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。在實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈，當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此，通過(guò)溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性，加入設(shè)計(jì)引物，DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。
　　但是，DNA聚合酶在高溫時(shí)會(huì)失活，因此，每次循環(huán)都得加入新的DNA聚合酶，不僅操作煩瑣，而且價(jià)格昂貴，制約了PCR技術(shù)的應(yīng)用和發(fā)展。
　　發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個(gè)循環(huán)加酶，使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本，PCR技術(shù)得以大  taq酶[1]量應(yīng)用，并逐步應(yīng)用于臨床。
　　PCR技術(shù)的基本原理類似于DNA的天然復(fù)制過(guò)程，其特異性依賴于與靶序列兩端互補(bǔ)的寡核苷酸引物。PCR由變性--退火--延伸三個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成：①模板DNA的變性：模板DNA經(jīng)加熱至93℃左右一定時(shí)間后，使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈DNA解離，使之成為單鏈，以便它與引物結(jié)合，為下輪反應(yīng)作準(zhǔn)備；②模板DNA與引物的退火（復(fù)性）：模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后，溫度降至55℃左右，引物與模板DNA單鏈的互補(bǔ)序列配對(duì)結(jié)合；③引物的延伸：DNA模板--引物結(jié)合物在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP為反應(yīng)原料，靶序列為模板，按堿基互補(bǔ)配對(duì)與半保留復(fù)制原理，合成一條新的與模板DNA鏈互補(bǔ)的半保留復(fù)制鏈，重復(fù)循環(huán)變性--退火--延伸三過(guò)程就可獲得更多的“半保留復(fù)制鏈”，而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板。每完成一個(gè)循環(huán)需2～4分鐘，2～3小時(shí)就能將待擴(kuò)目的基因擴(kuò)增放大幾百萬(wàn)倍。

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甲基環(huán)戊烯醇酮/3-甲基環(huán)戊烷-1,2-二酮/3-甲基-1,2-環(huán)戊二酮/2-羥基-3-甲基-2-環(huán)戊烯酮/3-Methyl-1,2-SFySFloSFentanedioneBR，98%765-70-8RT 
6-正丙基-2-硫代尿嘧啶/丙基硫氧嘧啶/丙硫氧嘧啶/6-丙基-2-巰基-4-羥基嘧啶/6-丙基-2-硫代-2,3-二氫-4（1H）-嘧啶酮/丙基硫尿嘧啶/6-丙基-2-硫代尿嘧啶/4-羥基-2-巰基-6-丙基嘧啶/SFroSFylthiouraSFilBR，98%51-52-5RT 
桔皮素/5,6,7,8,4'-五甲氧基黃酮/3ˊ-5,7-三羥基-4ˊ-甲氧基黃烷酮/橙皮黃素/蜜桔黃酮/橘皮素/桔皮素提取物/TangeretinBR，98%481-53-82～8℃，避光 
標(biāo)準(zhǔn)品，99% 
醛固酮/醛甾酮/醛固醇酮/AldosteroneBR，98.5%52-39-12～8℃ 
原乙酸*酯/1,1,1-*氧基乙烷/乙酸*酯/*氧基乙烷/TrimethylorthoaSFetateBR，98%1445-45-0RT 
人參皂苷Rb1/人參皂甙Rb1/GinsenosideRb1分析標(biāo)準(zhǔn)品，98%41753-43-9RT 
人參皂苷Rb2/人參皂甙Rb2/GinsenosideRb2分析標(biāo)準(zhǔn)品，98%11021-13-9RT 
人參皂苷Rb3/人參皂甙Rb3/GinsenosideRb3分析標(biāo)準(zhǔn)品，98%68406-26-8RT 
人參皂苷Rg1/人參皂甙Rg1/GinsenosideRg1分析標(biāo)準(zhǔn)品，98%22427-39-0RT 
人參皂苷Rg2/人參皂甙Rg2/GinsenosideRg2分析標(biāo)準(zhǔn)品，98%52286-74-5RT 
人參皂苷Rg3/人參皂甙Rg3/GinsenosideRg3分析標(biāo)準(zhǔn)品，98%14197-60-5RT 
人參皂苷Re/人參皂甙Re/GinsenosideRe分析標(biāo)準(zhǔn)品，98%52286-59-6RT 
人參皂苷RSF/人參皂甙RSF/GinsenosideRSF分析標(biāo)準(zhǔn)品，98%11021-14-0RT 
人參皂苷Rd/人參皂甙Rd/GinsenosideRd分析標(biāo)準(zhǔn)品，98%52705-93-8RT 
人參皂苷Rf/人參皂甙Rf/GinsenosideRf分析標(biāo)準(zhǔn)品，98%52286-58-5RT 
人參皂苷Rh1/人參皂甙Rh1/GinsenosideRh1分析標(biāo)準(zhǔn)品，98%63223-86-9RT 
人參皂苷Rh2/人參皂甙Rh2/GinsenosideRh2分析標(biāo)準(zhǔn)品，98%78214-33-2RT 
2，4-二甲氧基苯甲醛/2-甲氧基茴香醛/2,4-雙甲氧基苯甲醛/2,4-二甲氧苯甲醛/β-間苯二酚甲醛二甲醚/2,4-Dimethoxybenzaldehyde高純，98%613-45-6RT，避光 
3-氟苯甲醛/間氟苯甲醛/3-FluorobenzaldehydeBR，97%456-48-4RT 
4-氟苯甲醛/對(duì)氟苯甲醛/4-FluorobenzaldehydeAR，98%459-57-4RT 
3-羥基苯甲醛/間羥基苯甲醛/間甲醛苯酚/2-羥基-4-甲硫基丁酸/蛋氨酸羥基類似物/3-HydroxybenzaldehydeBR，97%100-83-4RT，避光 
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2-硝基苯甲醛/鄰硝基苯甲醛/2-NitrobenzaldehydeAR，99%552-89-6RT 
3-硝基苯甲醛/間硝基苯甲醛/3-NitrobenzaldehydeSFSF，98%99-61-6RT 
4-硝基苯甲醛/對(duì)硝基苯甲醛/4-NitrobenzaldehydeAR，99%555-16-8RT 
苯乙醛/2-苯基乙醛/α-甲苯甲醛/1-氧代-2-苯乙烷/α-甲苯甲醛/芐基甲醛/風(fēng)信子醛/風(fēng)信子質(zhì)/SFhenylaSFetaldehydeLR，95%122-78-1RT，避光