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Taq DNA Polymerase Taq DNA 聚合酶
產(chǎn)品編號(hào) 規(guī) 格 價(jià) 格
T8410-500 500u 200.00
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:本制品是94KD的耐熱的DNA聚合酶。是把ThermusaquaticusDNA Polymerase的基因經(jīng)過(guò)克隆轉(zhuǎn)化到大腸桿菌中進(jìn)行表達(dá)后,分離提取而得到的。它與天然Taq DNA聚合酶具有相同的功能。
該酶反應(yīng)需Mg2+參與,它以雙鏈DNA為模板催化核苷酸從5’向3’末端形成雙鏈DNA。該酶同時(shí)具有5’→3’核酸外切酶活性。該產(chǎn)品主要用于DNA的PCR擴(kuò)增,DNA測(cè)序,可以很好地?cái)U(kuò)增1kb地DNA片段。該產(chǎn)品主要包括酶、10×反應(yīng)緩沖液與氯化鎂溶液。
單位定義:在74℃,30分鐘內(nèi),能夠吸收10mmol dNTP,形成酸性不溶性物質(zhì)所需的酶量為一個(gè)活性單位。
酶儲(chǔ)存緩沖液B:
50%甘油,20mM Tris-HCl(pH8.0),100mM KCl,1mM DTT,0.1mM EDTA,0.5%Tween20和0.5%Nonidet P40。
配套試劑:
1.10×反應(yīng)緩沖液(不含MgCl2): Taq DNA Polymerase 10 X Reaction buffer (without Mg2+)包含 500mM KCl,100mM Tris-HCl (pH9.0, 25℃), 1% Triton X-100.建議該緩沖液加入每種dNTP的zui適濃度為0.2毫摩爾。
2.25mM MgCl2:反應(yīng)中鎂離子在混合物中的zui終濃度由使用者根據(jù)自己需要決定。建議使用濃度在1-4毫摩爾。注:使用前*溶解氯化鎂溶液并充分振蕩幾秒鐘。
3.10X反應(yīng)緩沖液(含MgCl2):包含 15mM MgCl2,500mM KCl, 100mM Tris-HCl (pH9.0, 25℃), 1% Triton X-100. 建議該緩沖液加入每種dNTP的zui適濃度為0.2毫摩爾。注意:反復(fù)凍融可能會(huì)引起氯化鎂沉淀,將緩沖液在90℃加熱10分鐘能恢復(fù)溶液的均一性。
質(zhì)量控制:
1. 活性:大于5單位/微升。
2. Overdigest (OD) 檢測(cè): 30單位Taq DNA 聚合酶與1微克λDNA在74℃下反應(yīng)16小時(shí)后,用瓊脂糖凝膠電泳未檢出降解的λDNA。
3. 切口酶檢測(cè): 30單位Taq DNA 聚合酶與1微克超螺旋質(zhì)粒DNA在74℃下反應(yīng)4小時(shí)后,用瓊脂糖凝膠電泳未檢出切口酶或線性DNA帶。
4. 熱穩(wěn)定性檢測(cè): 94℃時(shí),每微升5單位Taq DNA 聚合酶在緩沖液中的半衰期長(zhǎng)于1小時(shí)。
儲(chǔ)存條件:−20℃
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