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ELISA技術與自動化
閱讀:613 發(fā)布時間:2021-9-16在一般的概念里,ELISA技術的可操作性強,不需復雜設備,甚至*手工加樣、洗板和肉眼判讀結果,便可完成該技術的操作。隨著人們對質量控制意識的加強,盡可能做到zui低限度的減少系統(tǒng)誤差,以及減少勞動強度等觀念的不斷改進,解決ELISA技術中加樣、溫育、洗板及判讀結果過程的系統(tǒng)誤差問題及高效率運作問題導致了自動化概念的形成。ELISA技術的加樣、溫育、洗板及判讀結果過程的科學地、有機地、系統(tǒng)地結合,盡可能地減少各環(huán)節(jié)的人為因素的影響,便成為自動化ELISA技術的理論基礎。
在自動化ELISA技術中,可以將整個體系分成加樣系統(tǒng)、溫育系統(tǒng)、洗板系統(tǒng)及判讀系統(tǒng)、機械臂系統(tǒng)、液路動力系統(tǒng)及軟件控制系統(tǒng)等幾種結構,這些系統(tǒng)既獨立又緊密聯(lián)系。加樣系統(tǒng)包括加樣針、條碼閱讀器、樣品盤、試劑架及加樣臺等構件。加樣針有兩手中,一為有TEFLON涂層的金屬針,另一為可更換的一次性加樣頭(Tip) 。有些儀器的加樣針只配金屬針,無一次性加樣頭,有些是兩種針都配備。加樣針的功能主要是加樣品及試劑,它是靠液路動力系統(tǒng)提供動力,通過注射器樣的分配器進行精確加樣的。加樣針的數(shù)量在各型號儀器上是不同的,有一根的、兩根的或多根的。條碼閱讀器是幫助識別標本的重要工作,目前的儀器均配有此裝置。樣品盤除了放置標本外,還能放置稀釋標本用的稀釋管,供不同檢測目的使用。試劑架是供放置酶標記試劑、顯色液、終止液等試劑用的,有些型號的儀器這一部分是獨立的,有些是并在樣品盤上。加樣臺是酶標板放置的平臺,有些儀器在臺上設置溫育裝置,讓溫育在臺上進行。整個加樣系統(tǒng)由控制軟件進行協(xié)調(diào)操作。
溫育系統(tǒng)主要由加溫器及易導熱的金屬材料板架構成。有些是盒式的,有些是臺式的。一般控制的溫度可在室溫- 50°C之間。溫育時間及溫度設置是由控制軟件需確調(diào)控的。
洗板系統(tǒng)是整個體系的重要組成部分,主要由支持板架、洗液注入針及液體迸出言路等組成。;洗液注入針一般是8頭的。每項洗板的洗板殘留量一般控制在5µL以內(nèi)。最好設備可控制在2µL內(nèi)。洗板次數(shù)可通過軟件控制實現(xiàn)并可更改次數(shù)。
讀板系統(tǒng)由光源、激光片、光導纖維、鏡片和光電倍增管組成,是酶促反應最突結果客觀判讀的設備。各型號儀器的比色探頭配置不一樣,有單頭的3也有8頭的。控制軟件通過機械臂和輸送軌道將酶標板送入讀板器進行自動比色,再將光信號轉變成數(shù)據(jù)信號又回送到軟件系統(tǒng)進行分析,最終得出結果。
酶標板的移動靠機械臂或軌道運輸系統(tǒng)來完成。機械臂的另一重要功能是移動抽樣針。機械系統(tǒng)的運動受控子控制軟件,其運動非常地精確和到位。