詳細介紹
【名稱】:人環(huán)磷酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒
【規(guī)格】:48T/96T
【方法】:酶聯(lián)免疫法/酶免法(ELISA)
【性狀】: 液態(tài)
【Elisa試劑盒種屬】馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
【標本】血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等
【用途】:科研 實驗
【貯存】: 貯存于2℃-8℃.如有需要,我們將竭城為顧客提供售前,售中,售后的*服務!
試劑的準備之顯色
顯色是 ELISA 中的zui后一步溫育反應,此時酶催化無色的底物有色的產物。反應的溫度和時間仍是影響顯色的因素。在一定時間內,陰性孔可保持無色,而陽性孔則隨時間的延長而呈色加強。適當提高溫度有助于加速顯色進行。在定量測定中,加入底物后的反應溫度和時間應按規(guī)定力求準確。定性測定的顯色可在室溫進行,時間一般不需要嚴格控制,有時可根據陽性對照孔和陰性對照孔的顯色情況適當縮短或延長反應時間,及時判斷。
OPD 底物顯色一般在室外溫或37℃反應20-30 分鐘后即不再加深,再延長反應時間,可使本底值增高。OPD 底物液受光照會自行變色,顯色反應應避光進行,顯色反應結束時加入終止液終止反應。OPD 產物用硫酸終止后,顯色由橙黃色轉向棕黃色。
TMB 受光照的影響不大,可在室溫中置于操作臺上,邊反應觀察結果。但為保證實驗結果的穩(wěn)定性,宜在規(guī)定的適當時間閱讀結果。T MB 經HRP 作用后,約40 分鐘顯色達,隨即逐漸減弱,至2 小時后即可*消退至無色。TMB 的終止液有多種,疊氮鈉和十二烷基硫酸鈉(SDS)等酶抑制劑均可使反應終止。這類終止劑尚能使藍色維持較長時間(12-24 小時)不褪,是目視判斷的良好終止劑。此外,各類酸性終止液則會使藍色轉變成黃色,此時可用特定的波長(450nm)測讀吸光值。
人環(huán)磷酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒注意事項
1. 嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
2. 洗板不正確可以導致不準確的結果。在加入底物前確保盡量吸干孔內液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。
3. 消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。
4. 底物顯色液應呈無色或很淺的顏色,已經變藍的底物液不能使用。
5. 避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果。
6. 在儲存和溫育時避免強光直接照射。
7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
8. 任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。
9. 不能使用過期產品。
10. 如果可能傳播疾病,所有的樣品都應管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。
保存: 貯藏于2-8°C。
標本收集
1. 本試劑盒可使用血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、組織液標本。
2. 室溫(20-25℃)下保存標本不要超過8小時。2-10℃保存標本,不超過48小時。如耽擱的時間更長,請在-20℃或更低的溫度下保存標本。標本避免多次凍融,這樣可能會損失蛋白活性,產生錯誤結果。
人環(huán)磷酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒操作步驟
試劑盒應平衡至室溫(20-25°C )再試驗。 取出所需反應板。
1. 加入10ul標準品(Standards)、10ul標本于相應反應板孔中。
2. 每孔加入40ul Anti mouse IL-1 Biotin 和40ul Anti mouse IL-1 POD。輕輕混勻30秒,封住板孔,室溫溫育 45分鐘。
3. 洗板:甩盡板內液體,用洗滌液洗滌反應板(每孔內加入350ul洗滌液),并去除水滴(在厚疊吸水紙上拍干);反復洗滌5次。
4. 每孔加入100ul顯色液, 輕輕混勻10秒,室溫溫育20分鐘。
5. 每孔加入100ul終止液(Stop Solution)。輕輕混勻30秒;30分鐘內在450nm處讀OD值。
以OD值為縱坐標,以標準品濃度為橫坐標,繪制標準曲線。根據樣品的OD值可在標準曲線上查出其濃度。
人環(huán)磷酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒高質量的貨物運輸保證
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