一、人第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理

ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí)，受檢標(biāo)本（測(cè)定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開(kāi)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。

二、樣品收集、處理及保存方法

1.血清：操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2.血漿：EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

3.細(xì)胞上清液：1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4.組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液

5.保存：如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

三、人第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)ELISA試劑盒的特點(diǎn)：

1.專(zhuān)一性強(qiáng)?？乖c抗體的免疫反應(yīng)是專(zhuān)一反應(yīng)，而免疫酶技術(shù)以免疫反應(yīng)為基礎(chǔ)，所檢測(cè)的對(duì)象是抗原(或抗體)，使用的抗體除標(biāo)記了酶以外，與普通抗體的免疫反應(yīng)特性并無(wú)多大差別。

2.靈敏度高。由于抗體聯(lián)結(jié)上了酶，因此，借助于酶與底物的顯色反應(yīng)，顯示抗原與抗體的結(jié)合，大大提高了檢測(cè)的靈敏性，使檢測(cè)水平接近放射免疫測(cè)定法。

3.樣品易保存。經(jīng)過(guò)酶反應(yīng)顯示的有色產(chǎn)物大多比較穩(wěn)定，因此有利于樣品的保存。

4.結(jié)果易觀察。對(duì)檢測(cè)結(jié)果即可用肉眼觀察，又可用顯微鏡觀察，也可以用分光光度計(jì)進(jìn)行比色測(cè)定，還可用顯微鏡觀察。這是因?yàn)槟承┟阜磻?yīng)產(chǎn)物能使電子密度發(fā)生改變，從而引起被檢測(cè)物的顯示。

5.可以定量測(cè)定。溶液中的抗原物質(zhì)，應(yīng)用酶免吸附技術(shù)進(jìn)行比色測(cè)定，依據(jù)光密度值的變化，可以定量。預(yù)計(jì)用細(xì)胞分光光度計(jì)可對(duì)組織內(nèi)的抗原進(jìn)行免疫酶技術(shù)的定量測(cè)定。

6.可以大規(guī)模測(cè)定樣品。如有成千上萬(wàn)份樣品需要進(jìn)行檢測(cè)，免疫酶技術(shù)都能在較短時(shí)間內(nèi)完成。

7.儀器和試劑簡(jiǎn)單。對(duì)免疫沒(méi)技術(shù)來(lái)說(shuō)，不需要熒光顯微鏡，也不需要測(cè)定放射性的特殊儀器，所用儀器及試劑均屬一般性儀器與試劑，普通實(shí)驗(yàn)室及生產(chǎn)應(yīng)用單位均易購(gòu)置

四、人第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)ELISA試劑盒保存：

1.所有試劑均按試劑瓶標(biāo)簽上所示保存。請(qǐng)注意，收到試劑盒后請(qǐng)盡快將標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液A、檢測(cè)溶液B以及96孔板保存于-20℃。

2.使用后的試劑盒：剩余試劑仍需按照試劑瓶標(biāo)簽所示的溫度保存，開(kāi)封后的酶標(biāo)板要加干燥劑后密封保存于-20℃，避免潮濕。

3.試劑盒內(nèi)酶標(biāo)條可拆卸，按實(shí)驗(yàn)需求可分多次使用。使用后的剩余試劑盒建議在*實(shí)驗(yàn)后1個(gè)月內(nèi)使用完畢。產(chǎn)品過(guò)期時(shí)間以盒子上的標(biāo)簽為準(zhǔn)，保質(zhì)期內(nèi)所有組分都確保是穩(wěn)定的。

五、注意事項(xiàng)

1.于2-8℃保存，有效期6個(gè)月。每次使用前應(yīng)先平衡至室溫。

2.中終止液具有腐蝕性，要小心使用。

3.未使用完的板條應(yīng)密封保存。

4.瓶蓋每次使用后要擰緊，各瓶蓋之間不可混用。不同批號(hào)試劑盒的試劑組份不可混用。

5.試驗(yàn)樣本應(yīng)為無(wú)染菌、無(wú)血脂、無(wú)溶血的血清。任何樣本都應(yīng)視為傳染源妥善處理。

六、人第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)ELISA試劑盒訂貨說(shuō)明

1）賣(mài)方確保所訂產(chǎn)品與目錄技術(shù)指標(biāo)保持*；

2）為了確保買(mǎi)方產(chǎn)品在運(yùn)輸中的質(zhì)量，對(duì)有特殊要求的低溫產(chǎn)品予以濕冰運(yùn)輸。

3）收到貨物后如出現(xiàn)質(zhì)量問(wèn)題，買(mǎi)方需在收到貨物一個(gè)月內(nèi)向賣(mài)方提出書(shū)面異議。買(mǎi)方逾期不提出異議，視為貨物符合其要求，賣(mài)方不付任何責(zé)任。

4）出現(xiàn)質(zhì)量以外的問(wèn)題，如破損等，買(mǎi)方應(yīng)在收貨后一個(gè)周內(nèi)提出。買(mǎi)方未按時(shí)提出異議，視為該產(chǎn)品合格。

本公司對(duì)所有售出的產(chǎn)品保證質(zhì)量，并提供良好的售后服務(wù)，有關(guān)產(chǎn)品質(zhì)量的投訴，請(qǐng)?jiān)谑盏截浳锏?2天內(nèi)以書(shū)面形式提出，并向我公司技術(shù)人員提供相應(yīng)的材料，我們會(huì)及時(shí)派人解決。所有形式的賠償或退換僅限于產(chǎn)品本身，不涉及其他間接內(nèi)容。凡購(gòu)買(mǎi)本公司任意款elisa試劑盒，均可享受免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，并提供技術(shù)指導(dǎo)。