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金屬蛋白酶,人解整合素樣金屬蛋白酶10(ADAM10)ELISA試劑盒

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更新時(shí)間:2016-01-04 16:52:24瀏覽次數(shù):563

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

人解整合素樣金屬蛋白酶10(ADAM10)ELISA試劑盒加蔗糖的主要目的是保護(hù)ELISA板子吸附(包被)的蛋白,起到“保護(hù)劑"的作用。

詳細(xì)介紹

Elisa試劑盒簡(jiǎn)單介紹:

【產(chǎn)品名稱(chēng)】:人解整合素樣金屬蛋白酶10(ADAM10)ELISA試劑盒

【英文名稱(chēng)】:Human A Disintegrin And Metalloprotease 10,ADAM10 ELISA KIT

【檢測(cè)種屬】:人、大鼠、小鼠等動(dòng)植物。

【產(chǎn)品用途】:被測(cè)樣品定性或定量分析

【產(chǎn)品規(guī)格】:48T、96T

【檢測(cè)方法】:酶免法/酶聯(lián)免疫法(ELISA)

【保存條件】:2-8℃

【供 貨 期】:1-3天(現(xiàn)貨供應(yīng))

【產(chǎn)品性狀】:液體盒裝

【服務(wù)優(yōu)勢(shì)】:全程提供ELISA實(shí)驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)和ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)

【樣本儲(chǔ)存】:收集標(biāo)本前必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。對(duì)收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測(cè)的標(biāo)本,儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆?,如有特殊原因需要周期收集?biāo)本,將標(biāo)本及時(shí)分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復(fù)凍融。標(biāo)本2-8℃可保存48小時(shí),-20℃可保存1個(gè)月。-70℃可保存6個(gè)月。部分激素類(lèi)標(biāo)本需添加抑肽酶。

人解整合素樣金屬蛋白酶10(ADAM10)ELISA試劑盒操作步驟

1、準(zhǔn)備:從冰箱取出試劑盒,室溫復(fù)溫平衡30分鐘。

2、配液:用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。

3、加標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)樣本:取足夠數(shù)量的酶標(biāo)包被板,固定于框架上,分別設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測(cè)樣本孔和空白對(duì)照孔,記錄各孔位置,在標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品50μL;待測(cè)樣本孔中先加入待測(cè)樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL(即樣本稀釋5倍);每孔再加入酶標(biāo)工作液100μL;空白對(duì)照孔不加。

4、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)按說(shuō)明書(shū)操作洗板)。

6、顯色:每孔先加入顯色劑A 液50μL,再加入顯色劑B液 50μL,37℃避光顯色15min。

7、終止:取出酶標(biāo)板,每孔加終止液50μL,終止反應(yīng)(顏色由藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

8、測(cè)定:以空白孔調(diào)零,在終止后15分鐘內(nèi),用450nm波長(zhǎng)測(cè)量各孔的吸光值(OD值)。

9、計(jì)算:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對(duì)應(yīng)的OD值,計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程,再根據(jù)樣本的OD值,在回歸方程上計(jì)算出對(duì)應(yīng)的樣品濃度,也可以使用各種應(yīng)用軟件來(lái)計(jì)算。zui終濃度為實(shí)際測(cè)定濃度乘以稀釋倍數(shù)。

人解整合素樣金屬蛋白酶10(ADAM10)ELISA試劑盒的基本原理有這幾條: 

  1.抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體表面,可能是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水 性部分相互吸附,并保持其免疫學(xué)活性;  

  2.抗原或抗體可通過(guò)共價(jià)鍵與酶連接形成酶結(jié)合物,而此種酶結(jié)合物仍能保持其免疫學(xué) 和酶學(xué)活性; 

  3.酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后,可根據(jù)加入底物的顏色反應(yīng)來(lái)判定是否有免疫反 應(yīng)的存在,而且顏色反應(yīng)的深淺是與標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例的,因此,可以按底物顯色的程度顯示試驗(yàn)結(jié)果。 

人解整合素樣金屬蛋白酶10(ADAM10)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中封閉

  1.ELISA實(shí)驗(yàn)中,蔗糖本身沒(méi)有封閉作用;

  2.封閉液一般是BSA、酪蛋白等或者是Tween等。

  3.加蔗糖的主要目的是保護(hù)ELISA板子吸附(包被)的蛋白,起到“保護(hù)劑”的作用。

  4.蔗糖溶液一般在ELISA板子經(jīng)過(guò)BSA封閉后加,當(dāng)然也有將蔗糖加到封閉液中同時(shí)進(jìn)行處理。

ELISA試劑盒的操作技術(shù)有哪些影響?

  1.合理安排檢測(cè)量,以免反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。

  2.加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。

  3.嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。操作前將試劑在室溫下平衡30~60min。

  4.加樣后及時(shí)放人孵箱。標(biāo)本較多時(shí),要分批操作。按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間,防止孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周?chē)y以清洗*。

  5.封板溫育時(shí),各孔一定要封嚴(yán),防止陽(yáng)性標(biāo)本的液體蒸發(fā),產(chǎn)生周邊現(xiàn)象從而導(dǎo)致“花板”的出現(xiàn)。

為何選擇上海滬鼎生物科技有限公司人解整合素樣金屬蛋白酶10(ADAM10)ELISA試劑盒? 

我司是一家專(zhuān)業(yè)從事“產(chǎn)品研發(fā)生產(chǎn)、市場(chǎng)銷(xiāo)售、技術(shù)服務(wù)”為一體的生物技術(shù)公司,公司生產(chǎn)的產(chǎn)品質(zhì)量有保證,含量高,能夠給實(shí)驗(yàn)帶來(lái)準(zhǔn)確的結(jié)果。同時(shí)試劑隨貨附帶質(zhì)檢報(bào)告和圖譜,能為用戶(hù)更好的解決各種疑難問(wèn)題。如有需要可我司銷(xiāo)售人員,我們將竭誠(chéng)為您服務(wù)。 

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