一、人反三碘甲狀腺原氨酸(rT3)ELISA試劑盒檢測原理

Elisa試驗是一種敏感性高，特異性強，重復(fù)性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡便，結(jié)果判斷較客觀等因素，已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗的各領(lǐng)域中。依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

二、標本要求

1. 血清：溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

2. 血漿：根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

3. 尿液：無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。

4. 細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。

5. 組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4)，或組織蛋白萃取試劑，用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

三、人反三碘甲狀腺原氨酸(rT3)ELISA試劑盒特點概述

1.專一性強?？乖c抗體的免疫反應(yīng)是專一反應(yīng)，而免疫酶技術(shù)以免疫反應(yīng)為基礎(chǔ)，所檢測的對象是抗原(或抗體)，使用的抗體除標記了酶以外，與普通抗體的免疫反應(yīng)特性并無多大差別。

2.靈敏度高。由于抗體聯(lián)結(jié)上了酶，因此，借助于酶與底物的顯色反應(yīng)，顯示抗原與抗體的結(jié)合，大大提高了檢測的靈敏性，使檢測水平接近放射免疫測定法。

3.樣品易保存。經(jīng)過酶反應(yīng)顯示的有色產(chǎn)物大多比較穩(wěn)定，因此有利于樣品的保存。

4.結(jié)果易觀察。對檢測結(jié)果即可用肉眼觀察，又可用顯微鏡觀察，也可以用分光光度計進行比色測定，還可用顯微鏡觀察。這是因為某些酶反應(yīng)產(chǎn)物能使電子密度發(fā)生改變，從而引起被檢測物的顯示。

5.可以定量測定。溶液中的抗原物質(zhì)，應(yīng)用酶免吸附技術(shù)進行比色測定，依據(jù)光密度值的變化，可以定量。預(yù)計用細胞分光光度計可對組織內(nèi)的抗原進行免疫酶技術(shù)的定量測定。

6.可以大規(guī)模測定樣品。如有成千上萬份樣品需要進行檢測，免疫酶技術(shù)都能在較短時間內(nèi)完成。

7.儀器和試劑簡單。對免疫沒技術(shù)來說，不需要熒光顯微鏡，也不需要測定放射性的特殊儀器，所用儀器及試劑均屬一般性儀器與試劑，普通實驗室及生產(chǎn)應(yīng)用單位均易購置

8.*，質(zhì)量保證，zui大限度的節(jié)省實驗經(jīng)費。

四、人反三碘甲狀腺原氨酸(rT3)ELISA試劑盒注意事項

1. 由于底物顯色劑對光及其敏感，因此要避光保存。

2. 檢測吸光度前應(yīng)將酶標儀打開，將其預(yù)熱30min以上。

3. 孵育的時間應(yīng)該嚴格按照試劑盒說明書上的時間為準。

4. 要盡量做雙孔實驗，這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準確性，又能反映出試劑盒的精密度。

5. 對樣本的結(jié)果有疑問時需要使用其他檢測方法進行驗證。

五、代測服務(wù)

客戶以快遞形式送標本，上海市內(nèi)客戶代測樣本可享我司上門取樣服務(wù)。

本公司公布的試劑盒，可以提供代測服務(wù)。 

本公司上尚未列出的試劑盒，可以代為研發(fā)和測定，費用等相關(guān)信息咨詢。

六、人反三碘甲狀腺原氨酸(rT3)ELISA試劑盒結(jié)果計算：

在半對數(shù)坐標紙上繪制標準曲線。標準品的濃度為X軸，相應(yīng)的OD值為Y軸，用四參數(shù)或?qū)?shù)-對數(shù)法繪制zui合適的標準曲線。濃度與OD值成反比關(guān)系，隨著標準品濃度的增加，黃色強度就減少，即OD值減少樣本濃度可直接從標準曲線上讀取。如果樣本實驗前進行了稀釋，則試劑盒zui后結(jié)果應(yīng)乘以相應(yīng)的稀釋因子標準曲線為逆向S型曲線。

附：采用全自動酶標儀檢測，只需檢測前設(shè)置好酶標儀的相關(guān)參數(shù)，如坐標參數(shù)（線性，半對數(shù)）和計算方式參數(shù)（三次回歸、四參數(shù)或雙對數(shù)曲線方程），即可直接得到結(jié)果。

產(chǎn)品名稱存放：收到貨后貯存于4℃，強烈建議盡快使用配制的試劑1X緩沖液貯存于4℃，將不用的微孔板放回至密封袋內(nèi)密封起來，貯存于4℃，已稀釋的標準品，生物標記物，抗體和HRP貯存于4℃。