一、人整合素連接激酶1(ILK-1)ELISA試劑盒檢測概述

    ELISA（酶聯(lián)接免疫吸附反應(yīng)分析）是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)，將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。 由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行，每加入一種試劑孵育后，可通過洗滌除去多余的游離反應(yīng)物，從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。
實(shí)際應(yīng)用中，通過不同的設(shè)計(jì)，具體的方法步驟可有多種。即：用于檢測抗體的間接法、用于檢測抗原的雙抗體夾心法以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等。目前我們對客戶提供比較常用的ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法服務(wù)。

二、人整合素連接激酶1(ILK-1)ELISA試劑盒特點(diǎn)概述

1.專一性強(qiáng)?？乖c抗體的免疫反應(yīng)是專一反應(yīng)，而免疫酶技術(shù)以免疫反應(yīng)為基礎(chǔ)，所檢測的對象是抗原(或抗體)，使用的抗體除標(biāo)記了酶以外，與普通抗體的免疫反應(yīng)特性并無多大差別。

2.靈敏度高。由于抗體聯(lián)結(jié)上了酶，因此，借助于酶與底物的顯色反應(yīng)，顯示抗原與抗體的結(jié)合，大大提高了檢測的靈敏性，使檢測水平接近放射免疫測定法。

3.樣品易保存。經(jīng)過酶反應(yīng)顯示的有色產(chǎn)物大多比較穩(wěn)定，因此有利于樣品的保存。

4.結(jié)果易觀察。對檢測結(jié)果即可用肉眼觀察，又可用顯微鏡觀察，也可以用分光光度計(jì)進(jìn)行比色測定，還可用顯微鏡觀察。這是因?yàn)槟承┟阜磻?yīng)產(chǎn)物能使電子密度發(fā)生改變，從而引起被檢測物的顯示。

5.可以定量測定。溶液中的抗原物質(zhì)，應(yīng)用酶免吸附技術(shù)進(jìn)行比色測定，依據(jù)光密度值的變化，可以定量。預(yù)計(jì)用細(xì)胞分光光度計(jì)可對組織內(nèi)的抗原進(jìn)行免疫酶技術(shù)的定量測定。

6.可以大規(guī)模測定樣品。如有成千上萬份樣品需要進(jìn)行檢測，免疫酶技術(shù)都能在較短時(shí)間內(nèi)完成。

7.儀器和試劑簡單。對免疫沒技術(shù)來說，不需要熒光顯微鏡，也不需要測定放射性的特殊儀器，所用儀器及試劑均屬一般性儀器與試劑，普通實(shí)驗(yàn)室及生產(chǎn)應(yīng)用單位均易購置

6、*，質(zhì)量保證，zui大限度的節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。

三、Elisa試劑盒應(yīng)用領(lǐng)域

本公司產(chǎn)品試用與各研究單位、學(xué)?？蒲袑?shí)驗(yàn)

四、人整合素連接激酶1(ILK-1)ELISA試劑盒操作流程（具體請參照說明書）

① 加抗體包被 → 4℃過一夜，洗滌三次、拋干

② 加待檢抗原 → 37℃ 30分鐘，洗滌三次、拋干

③ 加酶標(biāo)抗體 → 37℃ 30分鐘，洗滌三次、拋干

④ 加底物液　→ 37℃ 15分鐘，加終止液

⑤ 用ELISA檢測儀測定OD值

五、人整合素連接激酶1(ILK-1)ELISA試劑盒常見問題

實(shí)驗(yàn)中zui可能出現(xiàn)問題       

（1）、所有孔未顯色？

分析原因：      

1、微孔加入抗體后，洗板不*，微孔中存在游離的抗體。          

2、用錯試劑。          

3、在操作中忘記加酶或抗體。     

 解決辦法：            

1、檢查洗板器械，比如洗板機(jī)管道是否堵塞、洗液是否用完。          

2、在加樣前，要看清瓶簽。          

3、嚴(yán)格按說明書操作步驟進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，確保每步都到位。          

（2）、所有孔顯色偏低？

分析原因：    

1、微孔加入抗體后，洗板不*，微孔中存在游離的抗體。          

2、洗板不干凈。          

3、抗體污染了酶結(jié)合物等其它試劑。          

4、溫度沒達(dá)到要求。          

5、每孔加入的試劑量低于說明書要求量。      

解決辦法：     

1、手工加蒸餾水洗板時(shí)，要避免吸頭接觸微孔，常更換新的蒸餾水。    

2、洗板時(shí)要確保每孔都注滿蒸餾水（約400ul），且至少洗板五次。      

3、嚴(yán)格按說明書要求操作，每次取樣要更換吸頭。      

4、控制孵育溫度在25℃。       

5、加樣器吸頭安放牢固避免吸樣不足，加樣時(shí)務(wù)必將吸頭內(nèi)液體打盡。 

六、人整合素連接激酶1(ILK-1)ELISA試劑盒儲存方式

試劑盒在4℃下存放不要凍結(jié),4℃保存，有效期六個(gè)月，客戶應(yīng)要求供應(yīng)商，提供批次試劑盒