【產(chǎn)品名稱】：人鈣聯(lián)蛋白(calnexin)ELISA試劑盒

【檢測方法】：酶聯(lián)免疫法/酶免法(ELISA)

【產(chǎn)品性狀】：96T/48T，盒裝液體

【貯    藏】：2-8°C

【有 效 期】：Elisa試劑盒二年，我公司Elisa試劑盒均為批次，可放心購買。

【主要成分】：酶標板,試劑,標準品等。

【標    本】：血清/血漿/細胞培養(yǎng)上清液/組織勻漿/組織液/尿液/分泌物

【質(zhì)量承諾】：我們堅持對產(chǎn)品質(zhì)量作不斷的評估、創(chuàng)新和改善以確保您對我們產(chǎn)品的高度信任。

【待檢樣本】：體液、血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等

【樣品采集】：Elisa試劑盒收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當天進行檢測的標本，儲存在4℃?zhèn)溆?，如有特殊原因需要周期收集標本，將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復凍融。標本2-8℃可保存48小時，-20℃可保存1個月。-70℃可保存6個月。部分激素類標本需添加抑肽酶。

【保 質(zhì) 期】：半年(六個月)

一、人鈣聯(lián)蛋白(calnexin)ELISA試劑盒實驗原理：

Elisa試劑盒原理

ELISA是以免疫學反應為基礎，將抗原、牽9體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術。由于抗原、抗體的反應在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行，每加入一種試劑孵育后，可通過洗滌除去多余的游離反應物，從而保證試驗結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。在實際應用中，通過不同的設計，具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測抗體的間接法(圖a)、用于檢測抗原的雙抗體夾心法(圖b)以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法。

二、人鈣聯(lián)蛋白(calnexin)ELISA試劑盒實驗過程：

1.  試劑準備：所有試劑都必須在使用前達到室溫，使用后請立即按照說明書要求保存試劑。  實驗操作中請使用一次性的吸頭，避免交叉污染。

2.   加樣：加樣或加試劑時，請注意在吸取標本 / 標準品，酶結(jié)合物或底物時，*個孔與zui后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大，將會導致不同的 “預孵育"時間，從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)控制在10分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用多道移液器加樣。

3.   孵育：為防止樣品蒸發(fā)，試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)，酶標板加上蓋或覆膜，以避免液體蒸發(fā)；洗板后應盡快進行下步操作，任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態(tài);同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。

4.   洗滌：洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干，勿將濾紙直接放入反應孔中吸水，同時要消除板底殘留的液體和手指印，避免影響zui后的酶標儀讀數(shù)。

三、人鈣聯(lián)蛋白(calnexin)ELISA試劑盒ELISA注意事項

1. 當混合蛋白溶液時應盡量輕緩，避免起泡。

2. 洗滌過程非常重要，不充分的洗滌易造成假陽性。

3. 一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

4. 請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。

5. 如標本中待測物質(zhì)含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請zui后乘以稀釋倍數(shù)。

6. 在配制標準品、檢測溶液工作液時，請以相應的稀釋液配制，不能混淆。

7. 底物請避光保存。

8. 不要用其它生產(chǎn)廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。

四、人鈣聯(lián)蛋白(calnexin)ELISA試劑盒優(yōu)點：

我司共有14000余種ELISA試劑盒物種涵蓋Human,Mouse,Rat等，品種具備以下優(yōu)點：

*品質(zhì)—高品質(zhì)的抗體和試劑是ELISA試劑盒的基礎

精確特異—特異檢測目標分子，結(jié)果精確可重復

高度靈敏—可檢測到pg/mL級別的目標

種類齊全—可覆蓋人、大鼠、小鼠、棉鼠、獼猴、豬、馬、犬和貓等多個種屬

優(yōu)化設計—可拆卸式96孔板(12X8)，為血清、血漿、尿樣和細胞培養(yǎng)物樣本檢測進行優(yōu)化

五、人鈣聯(lián)蛋白(calnexin)ELISA試劑盒常見問題解答

小編簡單整理了5個問題，具體內(nèi)容如下：

1、一個ELISA試劑盒檢測幾個樣品？

小編自己在各大論壇看到zui多的三個答案：

1）48T 可做42個樣本加6個標準曲線；96T 可做90個樣本加6個標準曲線

2）以96T試劑盒來算，定量的試劑盒一般可以做90個左右的樣品，定性的試劑盒可以做94個左右的樣品

3）96T的ELISA試劑盒，去除標準品復孔檢測，zui多還能檢測80個標本；48T的zui多30個樣本。

2、elisa試劑盒96T的能做檢測多少血清樣品？板能重復利用嗎？

96T，一般做復孔的話，做標準曲線需要16個孔，剩下80個孔就可以做40個樣本。這個板不能重復利用。而且配套的試劑也只是夠一塊板子用的。

3、想請教一下，我想用elisa法測血清里的一種抗原，查了資料，發(fā)現(xiàn)沒有現(xiàn)成的試劑盒用，現(xiàn)在就有2種備選方案，一種是買抗體對自己包被（查了滬鼎生物等大公司都沒有可用于elisa的單抗）。哪種比較好呢？自己包被的會不會比國產(chǎn)的試劑盒可靠呢？

如果你覺得技術不錯有隊其他公司不放心，可以自己購買抗體對自己包被，這個就是麻煩點，自己包被用著放心，舒心；

另外國內(nèi)還是有一些資質(zhì)不錯的公司，如上海滬鼎，上海滬鼎，上海滬鼎等等

4、western 和ELISA 處理樣本有何差別？

Western Blot 樣品制備要加蛋白裂解液（含有蛋白酶抑制劑），然后冰上研磨，收集于EP管，冰上裂解30min，4度12000rpm離心15min，取上清分裝，即得到蛋白樣品。建議直接電泳，多余的-80保存。建議分裝的蛋白每支略多于一次上樣量，一次性用完一支，避免反復凍融。

ELISA樣品，直接腦組織冰上勻漿，收集于EP管，同上一樣離心，大約220-250ul每支分裝（因為ELISA上樣量基本都是每孔100ul，做復孔，每個樣品2孔，就需要200ul，為了避免不夠2孔，分裝時要大于200ul每支），直接實驗。多余的-80保存，一樣避免反復凍融。

不過ELISA少量樣品進行預實驗，或者查閱文獻，看看大概組織里有多高濃度，選擇合適的試劑盒，測量范圍要與組織濃度相符。避免濃度過高測量不準，或者濃度過低，小于試劑盒zui低可測濃度。

5、Elisa試劑盒該買哪家公司的呢？

提出這個問題的朋友其實該打，目前上各個品牌的試劑盒生廠商，都會有其偏重點，像滬鼎生物在細胞因子方面的試劑盒就非常牛逼，而其他牌子也一樣的。

Bender：粘附分子方面的試劑盒；

Cayman：花生四烯酸類產(chǎn)品的試劑盒；

Merck(Linco)：內(nèi)分泌研究方面的試劑盒；

Tips：

1、買Elisa試劑盒時，盡量先查文獻，通過文獻找品牌，再找供應商，找供應商就找正規(guī)代理商，千萬不要去干“賠夫人又折兵”的蠢事。

2、ELISA中，復孔就是同一個樣品加到至少兩個孔中（一般3個或4個），zui后取其平均值作為樣品的讀數(shù)，這樣測得的結(jié)果才有說服力！

做復孔是為了較好的較少組內(nèi)差異，如果血清不足不做復孔也可以。