人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子 （VEGF）ELISA試劑盒僅供科研使用，定量檢測(cè)血清、血漿、組織勻漿、細(xì)胞裂解液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液等相關(guān)樣本中人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子 （VEGF）的濃度。

人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子 (VEGF)ELISA試劑盒

使用手冊(cè)

產(chǎn)品貨號(hào)：DB2473-Hu

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【產(chǎn)品名稱】

中文名稱：人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子 (VEGF)ELISA試劑盒

【包裝規(guī)格】

96T/盒

【預(yù)期用途】

僅供科研使用，定量檢測(cè)血清、血漿、組織勻漿、細(xì)胞裂解液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液等相關(guān)樣本中人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子 (VEGF)的濃度。

【檢測(cè)原理】

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子 (VEGF)水平。用純化的人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子 (VEGF)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子 (VEGF)，再與HRP標(biāo)記的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子 (VEGF)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子 (VEGF)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子 (VEGF)濃度。

【產(chǎn)品性能】

1、物理性能

試劑盒的各液體組分應(yīng)澄清透明、無(wú)沉淀或者絮狀物。微孔板鋁箔袋應(yīng)真空包裝，無(wú)破損漏氣(如有漏氣，不影響使用）。

2、劑量反應(yīng)曲線線性

標(biāo)準(zhǔn)品劑量反應(yīng)曲線相關(guān)系數(shù)r值，大于等于0.9900。

3、檢測(cè)范圍

30 pg/ml-1200 pg/ml。

4、靈敏度

di檢出劑量小于7.5 pg/ml。

5、精密度

精密度用樣品測(cè)定值的變異系數(shù)CV 表示。CV（%） = SD/mean×100

批內(nèi)差：取同批次試劑盒對(duì)低、中、高值定值樣本進(jìn)行定量檢測(cè)，每份樣本連續(xù)測(cè)定20 次，分別計(jì)算不同濃度樣本的平均值及SD 值。

批間差：選取3 個(gè)不同批次的試劑盒分別對(duì)低、中、高值定值樣本進(jìn)行定量測(cè)定，每個(gè)樣本使用同一試劑盒重復(fù)測(cè)定10 次，分別計(jì)算不同濃度樣本的平均值及SD 值。

批內(nèi)差： CV<6.7%

批間差： CV<9.3%

6、回收率

分別往5個(gè)不同樣本中添加已知濃度的目標(biāo)蛋白，做回收實(shí)驗(yàn)，得出回收率范圍和平均回收率。

Sample Type	Range (%)	Average Recovery (%)
Tissue Lysates (n=5)	93-102	97
Serum (n=5)	98-105	101
EDTA plasma (n=5)	95-109	102
Cell culture media (n=5)	82-101	91

 

7、線性

分別往5個(gè)樣本中添加已知濃度的目標(biāo)蛋白，做回收實(shí)驗(yàn)，得出回收率范圍及平均回收率。將5個(gè)樣本分別稀釋2倍，4倍，8倍，16倍做回收實(shí)驗(yàn)，得出回收率范圍及平均回收率。

Sample	1:2	1：4	1:8	1:16
Tissue Lysates (n=5)	98-105%	84-95%	90-102%	80-93%
Serum (n=5)	81-103%	89-99%	86-98%	83-101%
EDTA plasma (n=5)	85-97%	90-101%	83-96%	79-91%
Cell culture media (n=5)	83-105%	89-112%	81-106%	82-110%

8、特異性

本試劑盒識(shí)別天然和重組人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子 (VEGF)，經(jīng)檢測(cè)與其它相似物質(zhì)無(wú)明顯交叉反應(yīng)。由于受到技術(shù)及樣本來(lái)源的限制，不可能完成所有相關(guān)或相似物質(zhì)交叉反應(yīng)檢測(cè)，因此本試劑盒有可能與未經(jīng)檢測(cè)的其它物質(zhì)有交叉反應(yīng)。

9、穩(wěn)定性

經(jīng)測(cè)定，試劑盒在有效期內(nèi)務(wù)必按推薦溫度保存，活性降低率小于5%。為減小外部因素對(duì)試劑盒破壞前后檢測(cè)值的影響，實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境條件需盡量保持一致，尤其是實(shí)驗(yàn)室內(nèi)溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實(shí)驗(yàn)員來(lái)進(jìn)行操作可減少人為誤差。