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技術(shù)文章

植物細(xì)胞壁鈣熒光白熒光染色試劑盒產(chǎn)品說明書

閱讀:832          發(fā)布時(shí)間:2024-11-1

主要用途

植物細(xì)胞壁鈣熒光白熒光染色試劑是一種經(jīng)典的技術(shù)方法,旨在通過熒光染色劑鈣熒光白與細(xì)胞壁中的纖維素和殼多糖結(jié)合,產(chǎn)生熒光,從而檢測植物細(xì)胞壁的生成變化。該技術(shù)經(jīng)過精心研制和成功實(shí)驗(yàn)證明,可用于顯示植物細(xì)胞壁的生成變化和原生質(zhì)體細(xì)胞的鑒定。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡易,支持活體檢測,性能穩(wěn)定。

技術(shù)背景

鈣熒光白(Calcofluor white;CFW)是一種非特異性熒光增亮染料,能夠結(jié)合β-鏈接的糖苷,如纖維素(cellulose)和殼多糖(chitin)等。在植物生物學(xué)中,鈣熒光白用于顯示藻類和高等植物中細(xì)胞壁生物合成過程中的細(xì)胞壁生成變化,以及原生質(zhì)體細(xì)胞的鑒定。

產(chǎn)品內(nèi)容

  • 清理液(Reagent A):XX毫升

  • 染色液(Reagent B):XX微升

  • 產(chǎn)品說明書:1份

保存方式

  • 保存染色液(Reagent B)在-20℃冰箱里,嚴(yán)格避免光照。

  • 其余的保存在4℃冰箱里,有效保證6個(gè)月。

用戶自備

  • 1.5毫升離心管:用于細(xì)胞染色的容器

  • 微型臺(tái)式離心機(jī):用于沉淀細(xì)胞

  • (共聚焦)熒光顯微鏡:用于觀察熒光細(xì)胞

實(shí)驗(yàn)步驟

  1. 準(zhǔn)備1管待測植物細(xì)胞或原生質(zhì)體細(xì)胞(1 × 10^7細(xì)胞/毫升)。

  2. 移取100微升懸浮細(xì)胞到1.5毫升離心管。

  3. 加入XX微升染色液(Reagent B),混勻。

  4. 室溫下孵育5分鐘,避免光照。

  5. 放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘,速度為1000g。

  6. 小心抽去上清液。

  7. 加入XX微升清理液(Reagent A),輕柔混勻細(xì)胞顆粒群。

  8. 放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘,速度為1000g。

  9. 小心抽去上清液。

  10. 重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟7至9二次。

  11. 加入XX微升清理液(Reagent A),輕柔混勻細(xì)胞顆粒群。

  12. 移取10微升上述細(xì)胞懸液到載波片上,蓋上蓋玻片。

  13. 使用(共聚焦)熒光顯微鏡觀察:激發(fā)波長355nm,散發(fā)波長440nm——細(xì)胞壁顯示強(qiáng)烈藍(lán)色熒光。

注意事項(xiàng)

  1. 本產(chǎn)品為20次操作。

  2. 操作時(shí),須戴手套。

  3. 操作時(shí),須無菌操作,避免污染母液。

  4. 孵育時(shí),必須避免光照。

  5. 建議細(xì)胞染色完成后,即刻進(jìn)行細(xì)胞熒光分析。

  6. 本公司提供系列植物細(xì)胞分析試劑產(chǎn)品。

質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

  1. 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定。

  2. 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定熒光清晰。


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