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ELISA檢測試劑盒原理和局限性分析
閱讀：1259 發(fā)布時(shí)間：2013-8-5ELISA檢測試劑盒原理和局限性
ELISA檢測試劑盒原理
酶聯(lián)免疫吸附測定法定量測定三聚氰胺殘留。將標(biāo)準(zhǔn)、樣品提取物和三聚氰胺酶標(biāo)記物添加到現(xiàn)已包被有三聚氰胺抗體的微孔中開始反應(yīng)。在30分鐘的培養(yǎng)過程中，樣品萃取物中的三聚氰胺與三聚氰胺酶標(biāo)記物競爭結(jié)合微孔中的三聚氰胺抗體，培養(yǎng)30分鐘后洗掉微孔中所有沒有結(jié)合的三聚氰胺及三聚氰胺酶標(biāo)記物。在用稀釋的洗液清潔完畢后，每孔中添加清澈的底物溶液，結(jié)合的酶標(biāo)記物將無色的底物轉(zhuǎn)化為藍(lán)色的物質(zhì)。培養(yǎng)20分鐘后中止此反應(yīng)，根據(jù)各孔色彩深淺進(jìn)行數(shù)據(jù)讀取。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)的色彩得出樣品中三聚氰胺的的濃度值。
ELISA檢測試劑盒局限性
ELISA檢測試劑盒的發(fā)現(xiàn)
我們現(xiàn)已對能夠呈現(xiàn)在檢測樣品中的許多有機(jī)和無機(jī)物做了檢測，發(fā)現(xiàn)它們不與這個(gè)試劑盒產(chǎn)生交叉反應(yīng)。然而在樣品中也含有一些容易變質(zhì)的化合物，它們通過基質(zhì)影響來攪擾測定，如含脂肪的食物，它們在測定前要經(jīng)過稀釋來消除一些基質(zhì)對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。在運(yùn)用的過程中呈現(xiàn)失誤也會(huì)影響成果，例如試劑盒存儲(chǔ)的條件、汲取液體的程序、汲取液體的不、在產(chǎn)生免疫和底物反應(yīng)的過程中培養(yǎng)時(shí)間不。