技術(shù)文章
ELISA試劑盒的包被方法
閱讀:1560 發(fā)布時間:2015-2-9目前做多的方式是采用pH9.6的碳酸鹽緩沖液包被,4℃過液包被或者37℃包被2h,包被的適濃度隨固相載體和包被物的性質(zhì)變化,一般蛋白質(zhì)的包被濃度為1-5ug/ml,要明確針對特定包被抗原的適包被濃度需要通過實(shí)驗(yàn)來確定。
聚本乙烯載體中加入定量的蛋白質(zhì)包被液后,多數(shù)放在4℃冰箱過液,讓固相表面充分吸附,或用37℃孵育2h也可以達(dá)到同樣的吸附效果,但37℃包被2~3h與1h,兩者后測得的吸光度值相差不顯著。 蛋白質(zhì)吸附于聚苯乙烯酶標(biāo)板的動力學(xué)研究表明: 加入包被液后1MIN, 固相上便發(fā)生吸附作用,吸附量與蛋白質(zhì)濃度, 包被時間有關(guān)。 當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)濃度為5ug/mL時,包被60MIN出現(xiàn)明顯吸附,12h后吸附量不再隨時間延長而增加: 蛋白質(zhì)濃度為10ug/mL 和20ug/mL時, 兩者的吸附作用類似, 包被3min 便出現(xiàn)明顯吸附, 6h后吸附*, 5min 的吸附量為6min的30%