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哈靈生物教您如何正確選擇透析膜
閱讀：1390 發(fā)布時間：2015-5-14 正確選擇透析膜
透析成功進行的關(guān)鍵是在適當?shù)臈l件下選用合適的膜.選擇時可參照下列6步:
◆根據(jù)目的選擇膜的等級(生物技術(shù)或標準)
◆根據(jù)溶液的化學特性選擇膜材質(zhì)(CE,RC)-參見化學相容性表格
◆根據(jù)使用方法選擇產(chǎn)品類型(管狀,即用性)
◆根據(jù)溶質(zhì)分子量在18種MWCO中選擇
◆根據(jù)處理量在多種尺寸(即用型透析裝置)或多種寬度(管狀)中選擇
◆根據(jù)目的選擇膜預(yù)處理方式
關(guān)鍵的選擇
◆正確選擇合適的截留分子量
截留分子量的選擇是以預(yù)留在膜內(nèi)的大分子的分子量和將要被除去的小分子污染物的分子量為基礎(chǔ)的。使用Spectra/Por 膜時,為達到合理有效的分離,需分離的兩種物質(zhì)分子量的比率至少為25.
選擇截留分子量的經(jīng)驗法則:選擇截留分子量約為要保留的大分子分子量的一半,以獲得至少90%的保留率.
◆膜的化學相容性表格
化學相容性表格主要用作使用指導(dǎo),不作為化學相容性的保證.溫度,濃度,長時間曝光等因素的改變可能影響產(chǎn)品的使用.建議您自設(shè)條件進行測試.
◆正確選擇扁平寬度
透析管扁平寬度的選擇取決于樣品的體積和透析容量.較小的透析管更快;較大的透析管因擴散距離較長透析較慢.為易于使用,建議使用總長(包括閉合夾和頂部空間)為大約10-15厘米的膜管.
膜的使用:
下述透析程序是一個普通的基礎(chǔ)透析過程.在開始透析之前應(yīng)考慮到許多變數(shù).透析樣品溶劑\膜的化學相容性、膜的截留分子量，透析溶劑、透析體積、溫度等變量都會影響透析速率，因此，一些應(yīng)用中下述過程可能需要適當變化。
1、把適量的透析液（緩沖液）加入Spectra/Por透析裝置。透析液的體積應(yīng)為樣品體積量的100倍。（例如：在一升液中透析10毫升的樣品）
2、裁剪適當長度的透析管。預(yù)留一段額外長度（約占總樣品體積量的20%）作為頭部空間。
3、釋放安全鎖打開閉合夾。把透析管插入打開的閉合夾，在約超出閉合夾3-5毫米的位置再夾住。不要折疊纖維素酯（CE）膜。
4、由透析管開口端將樣品裝入。調(diào)整一下頂部空間的長度，夾緊閉合器。
5、把透析樣品放在合適的透析緩沖液中。
6、往透析裝置中放入一個干凈的磁性攪拌子。要確保磁子足夠大能夠攪動整個透析液，但不能大到無法自由旋轉(zhuǎn)。把透析裝置放置在攪拌器上，調(diào)整到不把樣品拉下旋渦的大速度。
7、透析要求根據(jù)具體的應(yīng)用要求。通常情況，允許透析。在持續(xù)透析的過程中，至少要進行3次全部更換透析液。建議在（透析后）2-4小時，6-8小時和10-14小時（第2天早晨）更換透析液。在后一次透析液的更換后要至少繼續(xù)進行2小時的透析。
注：對于高濃度污染物，樣品可能需要較長的時間透析，透析液需要更頻繁的更換。
8、抓住超出閉合夾部分的透析管，打開閉合夾。慢慢倒出透析樣品或用吸管，注射器把樣品移走。非常小的樣品也可用24號注射針刺穿透析管吸取樣品。
透析溫度主要取決于樣品。溫度限制主要取決于膜的類型。CE可以承受的溫度高達37℃，RC可以承受的溫度高達60℃。
膜的貯存和保質(zhì)期:
干燥的膜要在室溫或4℃儲存在聚乙烯袋中。未開封的濕膜4℃儲存。一旦變濕，膜應(yīng)浸泡在下列之一的溶液總：0.05%*，1%的苯甲酸鈉或1%甲醛。（備注：一旦變潮濕，不要讓膜干燥。不斷干燥會造成孔隙借口不可恢復(fù)的倒塌。）
在適當?shù)膬Υ鏃l件下，保質(zhì)期為兩年。為保證濕膜的長保質(zhì)期，防腐劑溶液應(yīng)當定期更換。