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哈靈實驗室教大家有關(guān)牛血清的使用問題
閱讀:1109 發(fā)布時間:2015-5-25哈靈實驗室教大家有關(guān)牛血清的使用問題
1、保存血清的方法?
我們建議血清應(yīng)保存在-5℃~-20℃。若您一次無法用完一瓶,建議您無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。
2、如何解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損?
我們建議您將血清從冷凍箱取出后,先置于2---8℃冰箱使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但須注意的是,溶解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。
3、血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),如何處理?
血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因,但普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后,也會存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的質(zhì)量。欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),以1000轉(zhuǎn)/分~2000轉(zhuǎn)/分稍微離心,上清液即可直接加入培養(yǎng)基內(nèi)使用。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀物,因為它可能會阻塞您的過濾膜。
4、何謂熱滅活?有無必要?
一般以56℃、30分鐘來處理已解凍的血清,因為此加熱步驟,可以使補體去活化,而補體所參與的反應(yīng)有:溶細(xì)胞活性,平滑肌的收縮,肥大細(xì)胞和血小板組胺的釋放,增強吞噬作用,淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞的趨化和激活。
實驗顯示,即使對血清進行正確的熱滅活處理,對大多數(shù)的細(xì)胞而言也是不需要的。經(jīng)此處理過的血清對細(xì)胞的生長只有微小的促進,或*沒有任何作用,甚至通常因為高溫處理影響了血清的質(zhì)量,而造成細(xì)胞生長速率的降低。
而經(jīng)過熱處理的血清,沉淀物的形成會顯著的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是"小黑點",常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環(huán)境中,又會使此沉淀物更增多,使研究者認(rèn)為是微生物的分裂擴增。
因此我們建議您,若非必須,您可以不需要做熱處理這一步。如此一來,不但節(jié)省您寶貴的時間,更確保您的血清的質(zhì)量。
質(zhì)量控制、容器管道清潔度監(jiān)控、設(shè)備及工藝衛(wèi)生監(jiān)控、膜可靠性監(jiān)控、加工過程中間樣品檢測、加工時間控制。
5、如何避免沉淀物的產(chǎn)生?
我們建議您在使用血清的時候,注意正確的血清解凍步驟,并盡量避免滅活血清及長時間的將血清置于高溫環(huán)境中。