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哈靈實(shí)驗(yàn)室教大家凝膠制備中有哪些方法

凝膠制備中有哪些方法

凝膠制備：

1.玻璃板對(duì)齊后放入夾中，垂直卡緊，加滿水檢漏。

2.配10%分離膠，APS和TEMED作用為促凝，后灌膠前加。若板不漏水，則將水倒出，并用吸水紙洗凈后灌膠，灌至大約3/4處，上面加滿水壓平。

3.配濃縮膠，同樣地，APS和TEMED后加，分離膠灌入約30min后觀察小燒杯中剩余分離膠是否已凝，同時(shí)仔細(xì)觀察可見玻板水和膠間有一條折線，說(shuō)明膠已凝固。

4.將上面的水倒去，吸水紙洗凈，灌入濃縮膠，灌滿，注意一定不要有氣泡，然后將梳子插入，注意保持水平，約30min后凝固可用。

5.拔梳子在電泳緩沖液中拔，加樣孔用小針筒沖洗干凈再上樣，注意上樣時(shí)勿使樣品逸至鄰孔，樣品混勻時(shí)要輕，不要產(chǎn)生氣泡，否則加樣時(shí)易導(dǎo)致逸出而使結(jié)果不準(zhǔn)確。

上海哈靈生物科技有公司以*產(chǎn)品為標(biāo)準(zhǔn)，自主研究開發(fā)了一系列應(yīng)用于分子生物學(xué)、蛋白質(zhì)學(xué)、免疫學(xué)研究的相關(guān)產(chǎn)品，并代理了國(guó)外 gibco/ elisa/Amresco/Sigma/Pharmacia等品牌的生物試劑，力爭(zhēng)成為生物技術(shù)的產(chǎn)品供應(yīng)商。   

 酶譜法的基本過(guò)程是先將樣品進(jìn)行SDS-聚丙烯酰胺（SDS-PAGE，含0.1％明膠）電泳分離，然后在有二價(jià)金屬離子存在的緩沖系統(tǒng)中使樣品中的MMP-2和MMP-9恢復(fù)活性，在各自的遷移位置水解凝膠里的明膠，后用考馬斯亮藍(lán)將凝膠染色，再脫色，在藍(lán)色背景下可出現(xiàn)白色條帶，條帶的強(qiáng)弱與MMP-2和MMP-9活性成正比。歡迎新老客戶詳細(xì)信息。