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組織半胱氨酸(cysteine)含量比色法定量
閱讀:1424 發(fā)布時(shí)間:2015-5-19提 供 商 | 上海哈靈生物科技有限公司 | 資料大小 | 45.5KB |
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資料類型 | WORD 文檔 | 瀏覽次數(shù) | 1424次 |
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主要用途
組織半胱氨酸(cysteine)含量比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過先酸性預(yù)處理,有機(jī)溶劑萃取后,在堿性條件下,與萘醌磺酸鈉進(jìn)行反應(yīng)后,由次亞硫酸鈉作用產(chǎn)生的紅色顯色產(chǎn)物,在分光光度儀下,即采用比色法來測(cè)定樣品中半胱氨酸含量的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心改良沙利文反應(yīng)(Sullivan Reaction)、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種組織(動(dòng)物、人體等)裂解萃取液樣品中半胱氨酸水平檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定。
技術(shù)背景
L-半胱氨酸(L-cysteine;Cys;C)學(xué)名為2-氨基-3-巰基丙酸,是一種疏水性非必需α-氨基酸,分子式是HO2CCH(NH2)CH2SH或C3H7NO2S,分子量121.16,編碼為UGU和UGC。其側(cè)鏈?zhǔn)菐€基(thiol),為非極性,作為親核劑(nucleophile),參與酶類反應(yīng)。氧化后,產(chǎn)生二硫化物和衍生物(disulfide derivative)胱氨酸(cystine),二硫化物成為蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)形式。動(dòng)物通過胱硫醚β合酶(cystathionine beta synthase)和胱硫醚γ裂合酶(cystathione gamma lyase)由絲氨酸(serine)和蛋氨酸(methionine)轉(zhuǎn)化成同源半胱氨酸(homocysteine)、S-腺苷蛋氨酸(S-adenosylmethionine)、胱硫醚(cystathionine),后產(chǎn)生半胱氨酸和α-酮基丁酸(α-ketobutyrate)。而植物和細(xì)菌通過絲氨酸乙?;D(zhuǎn)移酶(transacetylase)和O-乙酰絲氨酸巰基裂合酶(O-acetylserine(thio)lyase),由絲氨酸產(chǎn)生半胱氨酸和乙酸。半胱氨酸,是谷胱苷肽的前體,具有抗氧化作用、抗蛋白水解、使蛋白分子之間交聯(lián)、參與硫化物代謝、與各種金屬原子,例如鐵、鋅、銅等結(jié)合、參與蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)錄后修飾、中和酒精毒性等功能。應(yīng)用于食品調(diào)味和添加、化妝品防護(hù)、生物標(biāo)記、藥物等。血漿半胱氨酸水平用于評(píng)估心血管疾病風(fēng)險(xiǎn);半胱氨酸和同源半胱氨酸的比例可以評(píng)價(jià)靜脈血栓形成、心肌梗死、腎衰的風(fēng)險(xiǎn)。在植物中,半胱氨酸參與各種植物生理活動(dòng),例如光質(zhì)流動(dòng)(photoplasmic streaming)、電子傳導(dǎo)、光合成磷酸化、細(xì)胞分裂、維持抗壞血酸還原狀態(tài)、抗寒性(frost hardiness)、調(diào)節(jié)作物成熟等。半胱氨酸代謝異常將導(dǎo)致胱氨酸?。╟ystinosis)、胱氨醇尿(cystinuria)、肝損傷、生長(zhǎng)遲緩、毛發(fā)去色(hair depigmentation)、水腫(edema)、嗜睡(lethargy)等。基于半胱氨酸,通過酸性預(yù)處理,有機(jī)溶劑萃取,進(jìn)而在堿性條件下,與萘醌磺酸鈉(1,2-naphthoquinone-4-sodium sulfonate)進(jìn)行反應(yīng),由次亞硫酸鈉(sodium hyposulfite)作用,產(chǎn)生顯色產(chǎn)物,呈現(xiàn)紅色,通過分光光度儀(505nm波長(zhǎng))來定量分析半胱氨酸的含量。