欧美……一区二区三区,欧美日韩亚洲另类视频,亚洲国产欧美日韩中字,日本一区二区三区dvd视频在线

產(chǎn)品展廳收藏該商鋪

您好 登錄 注冊(cè)

當(dāng)前位置:
上海哈靈生物科技有限公司>資料下載>細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激活性氧超氧陰離子MitoSOX紅色熒光測(cè)定試劑盒說(shuō)明書(shū)

資料下載

細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激活性氧超氧陰離子MitoSOX紅色熒光測(cè)定試劑盒說(shuō)明書(shū)

閱讀:14446          發(fā)布時(shí)間:2018-6-15
提 供 商 上海哈靈生物科技有限公司 資料大小 155.6KB
資料圖片 下載次數(shù) 457次
資料類(lèi)型 PDF 文件 瀏覽次數(shù) 14446次
免費(fèi)下載 點(diǎn)擊下載    

細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激活性氧超氧陰離子MitoSOX紅色熒光測(cè)定試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)

 

主要用途

 

細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激活性氧超氧陰離子MitoSOX紅色熒光測(cè)定試劑是一種旨在通過(guò)透膜熒光染色劑MitoSOX,在線(xiàn)粒體氧化損傷條件下,產(chǎn)生紅色熒光,來(lái)檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)超氧陰離子活性氧族的生成和增加的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。可以被用于細(xì)胞凋亡、信號(hào)傳遞、衰老、代謝和營(yíng)養(yǎng)學(xué)等的研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,操作簡(jiǎn)易,活體檢測(cè),性能穩(wěn)定。

 

技術(shù)背景

 

超氧自由基陰離子(superoxide radical;O2-)、過(guò)氧化氫(hydrogen peroxide;H2O2)、羥自由基或氫氧基(hydroxyl radical;OH-)、過(guò)氧化基(peroxyl radical;ROO-)、氫過(guò)氧自由基(hydroperoxyl;HOO)、烷氧自由基(alcoxyl radical)、氮氧基(nitric Oxide;NO-、過(guò)氧亞硝基陰離子(peroxynitrite anion;ONOO-次氯酸(hypochlorous acid;HOCl)、半醌自由基(semiquinone radical)、單線(xiàn)態(tài)氧氣(singlet oxygen)等細(xì)胞內(nèi)活性氧族(Reactive Oxygen Species;ROS)的產(chǎn)生和增多,將導(dǎo)致細(xì)胞衰老或凋亡。其中線(xiàn)粒體氧化磷酸化副產(chǎn)物之一是超氧陰離子,為線(xiàn)粒體內(nèi)主要的活性氧族,與心血管疾病,包括高血壓、冠狀動(dòng)脈硬化、糖尿病相關(guān)的血管疾病、神經(jīng)退行性疾病(巴金森氏癥、阿茨罕默癥、肌萎縮硬化癥)相關(guān)。MitoSOX是一種*自由通過(guò)細(xì)胞膜,并選擇性活體細(xì)胞線(xiàn)粒體內(nèi)長(zhǎng)期滯留而不外漏的染色劑。一旦被超氧自由基陰離子氧化,便產(chǎn)生熒光。據(jù)此證明細(xì)胞線(xiàn)粒體內(nèi)超氧陰離子活性氧族的存在。

 

產(chǎn)品內(nèi)容

 

清理液(Reagent A)    毫升

染色液(Reagent B)    微升

稀釋液(Reagent C)    毫升

保存液(Reagent D)    毫升

產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)    1份

 

保存方式

 

保存染色液(Reagent B)在-20冰箱里,嚴(yán)格避免光照;其余的保存在4冰箱里;有效保證6月

 

用戶(hù)自備

 

胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液(HL12024):用于細(xì)胞脫離

*細(xì)胞培養(yǎng)液(HL12052):用于細(xì)胞操作所需的培養(yǎng)基

15毫升錐形離心管:用于細(xì)胞操作的容器

1.5毫升離心管:用于細(xì)胞染色的容器

培養(yǎng)箱:用于反應(yīng)孵育

血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀:用于細(xì)胞計(jì)數(shù)

臺(tái)式離心機(jī):用于樣品操作

比色皿或96孔板:用于熒光定量分析的容器

細(xì)胞流式儀:用于細(xì)胞熒光分析

(共聚焦)熒光顯微鏡:用于觀察熒光細(xì)胞

熒光分光光度儀或熒光酶標(biāo)儀:用于細(xì)胞熒光定量分析

 

實(shí)驗(yàn)步驟

 

  • 間接法

 

實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,將-20℃冰箱里的試劑盒中的染色液(Reagent B)置入冰槽里融化,稀釋液(Reagent C)放進(jìn)37℃恒溫水槽里預(yù)熱。然后移出xx微升染色液(Reagent B)到新的1.5毫升離心管,加入xx微升稀釋液(Reagent C),混勻后,標(biāo)記為染色工作液,置入暗室里。然后進(jìn)行下列操作。

 

  • 準(zhǔn)備1瓶25cm2細(xì)胞培養(yǎng)瓶的待測(cè)細(xì)胞
  • 小心抽去細(xì)胞培養(yǎng)液
  • 加入xx毫升 清理液(Reagent A)到細(xì)胞培養(yǎng)瓶,覆蓋培養(yǎng)瓶表面
  • 小心抽去清理液(Reagent A)
  • 加入1毫升用戶(hù)自備的胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液,鋪滿(mǎn)整個(gè)培養(yǎng)平面
  • 置入37培養(yǎng)箱1分種
  • 振動(dòng)培養(yǎng)瓶,使細(xì)胞脫落
  • 加入4毫升用戶(hù)自備的*細(xì)胞培養(yǎng)液
  • 移入15毫升錐形離心管,充分混勻(注意:懸浮細(xì)胞直接從這一步驟開(kāi)始
  • 移取10微升在血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀上進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)
  • 移出1 X 106細(xì)胞到新的15毫升錐形離心管
  • 放入臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘,速度為300g
  • 小心抽去上清液
  • 加入xx毫升含有染色液(Reagent B)稀釋液(Reagent C)染色工作液,輕柔混勻
  • 放進(jìn)37℃恒溫水槽孵育20分鐘,避免光照
  • 放入臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘,速度為300g
  • 小心抽去上清液
  • 加入預(yù)冷的xx微升保存液(Reagent D),輕柔混勻細(xì)胞顆粒群
  • 放進(jìn)冰槽里
  • 選擇下列方式之一進(jìn)行操作:
    • 即刻進(jìn)行細(xì)胞流式儀分析:藻紅蛋白(phycoerythrin;PE)波段觀察50000個(gè)細(xì)胞以上――

波峰右移,表明超氧陰離子含量高

 

  • 或使用(共聚焦)熒光顯微鏡觀察(定性檢測(cè)):

1)移取10微升上述細(xì)胞懸液到載波片上,蓋上蓋玻片

2)激發(fā)波長(zhǎng)510nm,散發(fā)波長(zhǎng)580nm――

紅色熒光增強(qiáng),表明超氧陰離子含量高

 

  • 或使用熒光分光光度儀或熒光酶標(biāo)儀檢測(cè)(定量檢測(cè)):

1)移取400微升上述細(xì)胞懸液到1毫升比色皿

2)加入xx微升保存液(Reagent D)

3)上下傾倒混勻數(shù)次

4)放進(jìn)熒光分光光度儀:激發(fā)波長(zhǎng)510nm,散發(fā)波長(zhǎng)580nm――

RFU增高,表明超氧陰離子含量高

 

  • 直接法

 

實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,將-20℃冰箱里的試劑盒中的染色液(Reagent B)置入冰槽里融化,稀釋液(Reagent C)放進(jìn)37℃恒溫水槽里預(yù)熱。然后移出xx微升染色液(Reagent B)到新的1.5毫升離心管,加入xx微升稀釋液(Reagent C),混勻后,標(biāo)記為染色工作液,置入暗室里。然后進(jìn)行下列操作。

 

1.準(zhǔn)備1個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)24孔板的待測(cè)細(xì)胞,細(xì)胞鋪滿(mǎn)率達(dá)70%

(注意:可以使用載玻片,載玻片培養(yǎng)皿,35mm培養(yǎng)皿,和其它培養(yǎng)孔板,見(jiàn)注意事項(xiàng)5

2.小心抽去細(xì)胞培養(yǎng)液

3.小心沿著孔壁加入xx微升含有染色液(Reagent B)稀釋液(Reagent C)

染色工作液到1個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)孔,覆蓋培養(yǎng)孔表面

4.放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育20分鐘

5.小心抽去含有染色工作液 

6.小心沿著孔壁加入xx微升37℃預(yù)熱的保存液(Reagent D)到細(xì)胞培養(yǎng)孔

7.選擇下列方式之一進(jìn)行操作:

(A)使用倒置熒光顯微鏡觀察(定性檢測(cè)):

激發(fā)波長(zhǎng)510nm,散發(fā)波長(zhǎng)580nm――紅色熒光增強(qiáng),表明超氧陰離子含量高

 

  • 使用熒光分光光度儀或熒光酶標(biāo)儀檢測(cè)(定量檢測(cè)):

放進(jìn)熒光分光光度儀或熒光酶標(biāo)儀:激發(fā)波長(zhǎng)510nm,散發(fā)波長(zhǎng)580nm――RFU增高,表明超氧陰離子含量高

 

注意事項(xiàng)

 

  • 本產(chǎn)品為20次(1毫升體系)或40次(0.5毫升體系)操作
  • 操作時(shí),須戴手套
  • 孵育時(shí),避免光照
  • 本產(chǎn)品適合各種規(guī)格的培養(yǎng)細(xì)胞:載玻片,載玻片培養(yǎng)皿,35mm培養(yǎng)皿,和各種培養(yǎng)孔板,須相應(yīng)調(diào)整操作用量:

 

操作容器

操作用量

載玻片

100微升

載玻片培養(yǎng)皿

1毫升

35mm培養(yǎng)皿

1毫升

96孔培養(yǎng)板

100微升

48孔培養(yǎng)板

200微升

24孔培養(yǎng)板

500微升

12孔培養(yǎng)板

1毫升

6孔培養(yǎng)板

2毫升

25cm2細(xì)胞培養(yǎng)瓶

3毫升

 

  • 根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型,調(diào)整染色工作液使用劑量(1:200至1:1000容量比),避免過(guò)度染色
  • 建議細(xì)胞染色完成后,即刻進(jìn)行細(xì)胞熒光分析
  • 本公司同時(shí)提供系列超氧陰離子活性氧檢測(cè)試劑產(chǎn)品

 

質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

 

  • 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
  • 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定熒光清晰

收藏該商鋪

請(qǐng) 登錄 后再收藏

提示

您的留言已提交成功!我們將在第一時(shí)間回復(fù)您~

對(duì)比框

產(chǎn)品對(duì)比 產(chǎn)品對(duì)比 聯(lián)系電話(huà) 二維碼 意見(jiàn)反饋 在線(xiàn)交流

掃一掃訪(fǎng)問(wèn)手機(jī)商鋪
在線(xiàn)留言
在线观看中午中文乱码-2021国产一级在线观看| 亚洲一区二区少妇激情-国产精品美女久久高潮| 久久人妻一区二区三区欧美-国内不卡的一区二区三区| 亚洲女人黄色录像一区-日韩av电影在线免费看| 日韩欧美国产综合久久-国产精品一起草在线观看| 午夜福利卫生纸福利院-一区二区三区久久亚洲| 人妻丝袜中文字幕在线视频-亚洲成av人片一区二区三区| 欧美aa一级视频播放-久一一区二区三区大香蕉| 中文字幕日韩精品不卡一区二区-成人av在线观看一区二区| 久色高清精品在线国产-国产精品视频一区三区四区| 亚洲欧洲一区二区福利-亚洲欧美日韩高清中文| 成人免费黄色在线网站-日韩精品一区二区三区四区在线| 7m视频7m精品视频网站-亚洲综合香蕉视频在线| 欧美日韩国产亚洲免费-肉体粗喘娇吟国产91| 四虎成人在线免费视频-亚洲熟女中文字幕天堂| mm在线精品视频在线观看-欧美国产日韩在线一区二区三区| 日韩精品一区二区三区粉嫩av-欧美亚洲国产中文字幕| 欧美伦乱淫老妇女激情吧-亚洲女邻居精品二区久久| 免费av一区在线观看-国产精品视频高潮流白浆视频免费| 欧美伦乱淫老妇女激情吧-亚洲女邻居精品二区久久| 欧美精品午夜一二三区-a屁视频一区二区三区四区| 国模自慰一区二区三区-日韩一级黄色片天天看| 国产精品熟女视频一区二区-国产日韩精品欧美一区喷水| 欧美精品一区二区不卡-精品国产一区二区三区香蕉网址| 十九禁止观看无码视频-亚洲国产激情福利专区| 亚洲视频一区二区三区免费-国产一级黄色大片在线| 小12萝自慰喷水亚洲网站-chinese偷拍一区二区三区| 亚洲欧美精品在线一区-99热国产在线手机精品99| 亚洲欧美精品在线一区-99热国产在线手机精品99| 天天日天天干天天综合-99久久综合狠狠综合久久| 欧美一级一线在线观看-亚洲一区二区亚洲三区| 日本欧美在线视频观看-国产一区二区三区无码下载快播| 国产老熟女激情小视频-成人一区二区人妻不卡视频| 亚洲一区二区少妇激情-国产精品美女久久高潮| 亚洲国产视频不卡一区-激情欧美视频一区二区| 婷婷亚洲欧美综合丁香亚洲-超刺激国语对白在线视频| 一区二区国产高清在线-日本高清无卡一区二区三区| 一区二区三区国产高清mm-美女张开腿让帅哥桶爽| 亚洲综合久久综合激情-日韩欧美精品人妻二区少妇| 婷婷六月视频在线观看-久久亚洲综合国产精品| 亚洲美女喘息呻吟的网站-国产免费一区二区三区三洲|